Устройство для откидывания оконной створки Советский патент 1978 года по МПК E06B3/50 

руюшего U -ЛИЭИН с экономическим коэффвдиенгом по треонину, равным не менее 50, независимым ог концентраций иаэлейиина и валика, соотношение которы равно (1 - 16) : 1, и с удельной скоро стью роста в указанных условиях 0,2 0,33 ч -. Новый штамм получают в непрерывной культуре на минеральной среде с добавлением необходимых органических компонентов при лимитации треонина и избытк кислорода, соотношении изолейцина и вал на равно 0,25 : 1, скорости разбавления .около 0,1 после повышения установившегося в равновесном состоянии ( Sieoiclv - ei-Oite ) уровня бномаосы, а образовавшиеся селектанты изолируют на комплексную агариэованную среду, например мясо-пептонный агар, и затем испытывают на миндальной среде с добавлением необходимых органических компонентов при соотнсшюнии изолейиина и валина.равном (1-16):1. Изолированные культуры показывают более высокий биомассы на единицу субстрата U -треонина (1 г клеточного сухого вещества на 1 г треонина), а также постоянную скорость роста при ув личении содержания изолейцина по отношению к валину, в частности штамк -селектант M.Buiawt CUS Т-3-1, происходящий oT.gEuiamicusT-3, в условиях непрерывного культивирования гфи изменении в среде соотношения изолейцина и валина равном 1 - 16) : 1 обес печивает выход биомассы на единицу суб сграта-треонина на уровне 50, а скорост роста 0,2 - 0,33 ч -i. Штамм образует на комплексных средах по крайней мере ЗО-4О г/л U -лизин в периодическом, процессе и 25 г/п в не прерывном. Пример. 24-часовую культуру штамма M.SutamicU&T-3, выращенну на скошенном мясном агаре, СМЫВЕЦОТ дн тиллированной водой и помещают в tpn колбы емкостью 450 мл со 1ОО мл питательной среды. В 1 л пита тельной среды содержится 2 г сахарозы; 5ОО мг казактанокислот (без витаминов, фирма.Di{со ); 2,72 г KHjrPO ; 7,16 г . ; 0,535 гННдСЕ ; 0,04ir Mgce 6Н 0,О5 г FeCEg ; О,ОО4 г МнСЕ ; ; .6,5 м U -метионина; ЗО мг U -треонина; 20 м L-валина; 20 мг L -изолейцина; 10 мг L - пантотената; 20 мл L - лейцина; 100 мкг ферриоксамина В ; 20 мкг биотина. Среду стерилизуют при 12О С в течение 2О мин, рН до стерилизации 6,8, рН после стерилизации 6,9 - 7,0. Культура в колбах инкубируется при 28 С на качалке, делающей 15О об/мин. Через 2О ч путем измерения оптической плотности определяют концентрацию клеток спектрофотометрическим методом при длине волны 56О нм, которая должна составлять 150-200 мг/л по сухому весу. Затем 25О мл культуры помещают в сосуд с рабочим объемом 25О мл, на дне которого нахо{1итсг стеклянный фильтр Q4Peiite . Через культуральную жидкость пропускают воздух. Дополнительную питательную среду подают в культуральную жидкость с помощью насоса со скоростью 25 мл/ч. Эта среда имеет тот же состав, что и посевная, но отличается концентрацией .следующих аминокислот: 1О мг Ь метионина, 2О мг U -треонина, ВО мг Ir -валина, 2О мг U -иголейцина, Пробы ОЛЯ определения концентрации клеток отбирают черев каждые 12ч. SLecicI -state характеризуется следующими параметрами: биомасса (по сухоксу весу) 15О-200 мг/л; температура 28 i 1°С; рН 7,р - 7,2; скорость разбавления О,1 ч аэрация 250 мл/мин (1:1). Увеличение концентрации биомассы до 25О-ЗОО мг (по сухому весу) указыв&ет на накопление селектантов. at die с новым уровнем биомассы созфаняется в течение 1О-12 дней, прежде чем приступают к изол5тии нового штамма. Для изоляции н дальнейшего изучения свойств нового штамма используют комплексную агецзнаованаую среду и жидкую минеральную среду без или с добавлением необходимых аминокислот. Новый штамм M Rutam4CUsT-3 по . своим основным генетическим свойствам (потребность в биотине,гомос€ ине, изолейцине и валине) подобен родительскому штамму. Инокулят культуры на минерал ной среде с необходимыми органическими компонентами, по составу соответствующей среде, использованной в хемостате, через 24 ч роста в количестве 5% переносят в серию колб, содержащих 1ОО мл среды. Состав среды в этих колбах в ооновном соответствует составу среды в хемостате, за исключением концентрации следующих аминокислот: 50 мг Ь -метио559нина; 10 Mf U -грвонииа| 20,40,80,16О н 32О мг U -иэолейцнна;; 2О мг U -валина. Таким образом, соотношение конценгра ций иэолейцина и валяна в различных на- риангах сред равно (1-16):1. Скорость роста ju ари любом соогношении изолейцина и валяна равна О,33 ч . Выход биомассы на единицу субсгрататреонина повышается от ЗО до 5О и осгаегся постоянным в указанных условиях. Перемиоленные новые свойства штамма являются наследственно за1фепленными и сга6иль но сохраняются при пересевах культур. Формула изобретения Оюсоб получения штаммовMicTOCOCcus gEutawicUe - продуцентов лизина, предуематривающий их культивирование в питательной среде и последующий отбор, отличающийся тем, что, с целью получения штаммов, обеспечивающих в режиме непрерывной ферментации более 9 высокий выход биомассы на единицу субстрата, а также постоянную скорость роота при различных соотношениях в питатель ной среде изолейцина и валина, исходный штамм культивируют в непрерывном процессе в питательной среде, содержашей источник углерода, ааота, необходим1.:е минеральные соли и органические добавки при лимитации треонина, избытке кислорода в соотношении нзолёйцнна и вали- на равном 1 : 4 и скорости разбавления Ojl ч -1- , а затем после повьццения уотановившегося в заданном режиме фер ментацин уровня биомассы осуществляют отбор накопившихся селектантов пугем изолирования их на комплексной агаризованной среде и последующего испытания на минеральной среде с добавлением необходимых органических компонентов при . ....-... ..,.. соотношении изолейнина и валина равном (1 - 16) : 1. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе: 1. Авторское свидетельство СХ)СР № 17494О, кл. С 121 13/06, 1976,

Составитель М. Андреева Редактор Л. Письман Техред Н. Андрейчук Корректор Н. Ковалева

Заказ 6097/5ОТираж 526Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров CCCF

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., а. 4/5

Ф«лиал ППП Патент, г.Ужгород, ул., Проектная, 4