Питательная среда для определения амилолитической активности вибрионов Советский патент 1978 года по МПК C12K1/06 

Изобретение относится к микроби логии . Известна питательная среда для определения амилолитической активн ти вибрионов, содержащая крахмал, источник азота и воду l . Цель изобретения - повышение то ности определения. Это достигается тем, что пре,цла гаемая среда дополнительно содержи магнезию сернокислую, каипий фосфор нокислый двузамещенный, калий фосф нокислый однозамещенный, цитрат на рия, агар Дифко, а в качестве исто ника азота она содержит а№4оний се нокислый при следующем соотношении компонентов, г на 1 л воды: 5,0-15,0 Крахмал Магнезия сер0,05-0,15 нокислая Аммоний серО , 57-2 ,0 нокислый Калий фосфорнокислый дву5,0-10,0 замещенный Калий фосфорнокислый од1,0-3,0 нозамещенный 0,3-0,7 Цитрат натрия 18,0-21,0 Агар Дифко Пример. Состав из 0,1 г сернокислой магнезии, 7,0 г двузамещенного калия, 1,0 г сернокислого аммония, 2,0 г однозамещеиного фосфорнокислого калия, 0,5 г цитрата натрия и 20,0 г агара Дифко автоклавируют в дистиллированной воде при 2 атм в течение 20-30 мин и остужают. За сутки до употребления к расплавленной горячей основе среды добавляют 10,0 г пищевого крахмала или 5,0 г гликогена. Кипячение допускается только для крахмала не более 3-5 мин. Посевы на агаровых пластинках инкубируют в течение 18-24 час при З7с. Затем на поверхность среды наносят несколько капель пятипроцентного спиртового раствора йода. При наличии фермента амилазы через 3-5 мин наблюдается зона разложения размером 3-5 мм с четкой границей на светлокоричневом (среда с гликогеном) или синем (среда с пищевым крахмалом) фоне. Испытано 618 штаммов возбудителя холеры двух биотипов (классического и Эль-Тор), 935 штаммов неагглютинирующегося вибриона и 170 штаммов кишечной группы и близкородственных к вибрионам микроорганизмов.

Из зарубежных штаммов амилолитиескуто активность не проявляют тольо два штамма Эль-Тор холерных вибионов. Из имеющихся в музее живых ультур института 170 штаммов холерных вибрионов Эль-Тор зову лизиса формируют .

Из свежевьшеленных штаь«мов холерного вибриона Эль-Тор из различных объектов ЗОНУ лизиса образуют 72,6%. Все штампы холерного вибриона ЭльТор, выделенные от людей, обладают аи нлолктической активностью. Различная ги «илолитическая ферментативная активность отмечается и у неагглютинируюашхся вибрионов различной группы по Хейбергу.

Предлагаемая среда позволяет выявить два типа холерных и неагглютинирующкхся вибрионов по способности продуцировать амилолитические ферменты, что имеет важное практическое значение.

В одной агаровой пластинке предлагаемой среды Можно исследовать десятки штамуюв вибрионов, что значительно сокращает объем используемых сред и лабораторной посуды.

Предлагаемая среда не содержит в своем составе пептона, в ней может быть применен любой крахмал или гликоген, что делает среду общедоступной всем бактериологическим лабораториям..

Формула изобретения

Питательная среда для определения амилолитической активности вибрионов, содержащая крахмал, источник азота и воду, отличающаяс я тем, что, с целью повышения точности определения, она дополнительно содержит магнезию сернокислую, калий фосфорнокислый двузамещенный, калий фосфорнокислый однозамещенный, цитрат натрия, агар Дифко, в качестве источника азота она содержит аммоний сернокислый при следующем соотношении компонентов, г на 1 л воды

5,0-15,0

0,05-0,15

0,5-2,0

5,0-10,0

1,0-3,0

0,3-0,7

18,0-21,0

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1. Бургасов П.Н. Холера Эль-Тор. 30 М., 1971, с. 171.