Питательная среда для выращивания спор микроорганизмов из рода @ Советский патент 1983 года по МПК C12N1/20 

-vl

1C СР

Изобретение относится.к культивированию микроорганизмов, в частности к средам для выращивания спор и может быть применено в различных областях микробиологической промышленности.

Известна питательная среда для выращивания спор микроорганизмов, содержащая в равных количествах мясо-пен.тонный агар и сусло-агар l.

Недостатком данной питательной среды является то, что споры выращивают на плотной среде, в результате чего процедура приготовления посевного материала сложна, а выход бактериальных .клеток низкий.

Наиболее близкой к предложенной является среда для выращивания спор микроорганизмов BaclCCus subtigis, содержащая двузвмещенный лимоннокислый аммоний, сернокислый магний, сернокислое железо, аминобензойную кислоту, а также мальтозу, однозамещенный фосфорнокислый калий, двузамещенный фосфорнокислый натрий, сернокислый кальций, сернокислый марганец и сернокислую медь при следующе соотношении компонентов, г/л воды; Мальтоза100,0

Дву3амещенный . лимоннокислый аммоний29,0 Однозс1мещенный фосфорнокислый калий . 2,5 Двузамещенный фосфорнокислый натрий 2,5 Сернокислый магний 1,5 Сернокислый кальций 1,5 Сернокислое железо 0,02 Сернокислый марганец 0,001 Сернокислая медь 0,007 Аминобензойная кисло-, та . 0,01 Недостатком известной среды является ее высокая стоимость и .необходимость длительного выращивания спорового материала (до 5 сут).

Целью изобретения является удешевление среды и сокращение срока выращивания спор.

Поставленная цель достигается тем, что питательная среда для выращивания спор микроорганизмов из рода Baciggus, содержащая двузамещенный лимоннокислый аммоний, сернокислый магний, сернокислое железо аминобензойную кислоту и воду, дополнительно содержит крахмал картофельный, гидролизат дрожжей, лимоннкислый натрий, Двузамещенный лимоннокислый калий, фосфорнокислый кальций, салициловую кислоту и бактериальную о1-амилазу при следующем количественном соотношении компонентов, г/л воды:

Картофельный крахмал 100-120

Гидролизат дрожжей 20-25

Двуз амеще нн.ый лимоннокислый калий 9-12 Лимоннокислый натрий9-12Двузамещенный лимон5 нокислый аммоний 9-12 Фосфорнокислый кальций . 4-5 Сернокислый магний 2-3 Сернокислое железо 0,02-0,04 10 Салициловая кислота 0,01-0,02 Аминобензойная кислота 0,02-0,04 Бактериальная

clL-амилаза0,4-0,6

Пример. Для выращивания спор микроорганизмов используют жидкую питательную среду при следующем соотношении компонентов, г/л воды: Картофельный крахмал 100,0 Гидролизат дрожжей 20,0 Двузамещенный лимоннокислый калий9,0 Лимоннокислый натрий 9,0 Двузамещенный лимоннокислый аммоний 9,0 Фосфорнокислый кальций 4,и Сернокислый магний 2,0 Сернокислое железо 0,02 , Салициловая кислота 0,01 Аминобензойная кислота 0,02 Бактериальная о(.-амилаза0,4 Питательную среду готовят следующим образом.

К 100 г крахмала приливают 200 мл воды и 0,4 г бактериальной амилазы с активностью 600 ед/г. С5спензию тщательно размещивают. клейст.еризуют в водной ванне при 70 С. Оклейстеризованный крахмал разжижается под влиянием бактериальной амилазы. Процесс ведут до образования эритродекстранов (красное окрашивание с иодом) . Разжиженный крахмал быстро охлажлают и фильтруют через вату. Другие компоненты растворяк1т последовательно в воде и смешивают с осахаренным крахмалом, общий объем доводят водой до 1000 МП. Устанавливают рН 6,6-6,8 с помощью 40%-ного NaOH. Среду размешивают и разливают по плоскодонным колбам и стерилизуют в течение 30 мин при 127°С. Среда после стерилизации темнеет, рН падает до 6,0-6,2. Колбы с питательной средой засевают с помощью.водной суспензии двухсуточной культуры, выращенной на МПА.

Засеянные колбы вьодерживЭют в термостате при З7с в течение 2 сут За это время на поверхности среды развивается толстая равномерно сморщенная без коричневых и других пятен пленка культуры.

Cpaч итeльнaя оценка роста бацилл на известной и предложенной 5 средах представлена в таблице. вас subtleis G-43 Толстая, равномерн Вас. subtiPis 5140 To же I Вас. subtleis G-28 Вас. subtle is G-19 Вас. subtieis G-22 Тонкая, неравномер Бас. subtieis G-78 Толстая, равномерн Вас. st4}ti€is 103 Толстая, равномерн Вас. subtieis 163 Вас. subtle is SK-52 Вас. subtieis 402 .Вас. subtieis M-71 Вас. subtieis 623 Вас. cereus 370 Вас. cereus 80-35 Вас. cereus 75-77 Вас. coagutaus 497 Вас. 729 Вас. mesentericus 1 Вас. . centcsporus RFL-1 Вас. megatkerium 394 i. На предложенной питательной ере- 4510 де выращивание спор микроорганизмов .из рода Bacieeus длится 2 сут и поз-1, воляет увеличить количество бактери-ки альных.клеток на единицу объема досо Тонкая, неравномерная То же - - Толст ая, рав номерная Тонкая, неравномерная «То же Толстая, равнсмёрная Тонкая, неравномерная То же Рост отсутствует Тонк а я, нерав номерн ая Рост отсутствует Толстая, равн(ерная Рост отсутствует Тонкая, неравнсмерная еток в 1 мл среды, сть предложенной среды за 1 л. Годовой экономичест от реализации изобретения около 20 тыс.рублей.

ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАПЩВАНИЯ СПОР МИ1$ РООРГАНИЗМОВ ИЗ РОДА BACILLUS, содержащая двузамещенный лимоннокислый аммоний, сернокислый магний, сернокислое железо, аминобензойную кислоту и воду, о т л ичающаяся тем, что, с целью удешевления среды .и сокращения срока выращивания спор, среда допол;нительно содержит картофельный крахмал, бактериальную оС амилазу, гидролизат дрожжей, лимоннокислый натрий, двузамещенный лимоннокислый калий, фосфорнокислый кальций и салициловую кислоту при следующем количес твенном .соотношении компонентов, г/л воцы: Картофельный 100-120 Гидролизат дрожжей ;:ао-25 Двузамещенный лимоннокислый калий 9-12 Лимоннокислый натрий Г9-12 Двузамещенный лимоннокислый аммоний ;t9-12 Фосфорнокислый кальций Сернокислый магний .J 2-3 еернокислое железо 6,02-0,04 Салициловая кислота 0,01-0,02 АмиИобензойная кислота0,02-0,04 Бактериальная rfамилаза0,4-0,6