Способ получения арахидоновой кислоты Советский патент 1979 года по МПК C07C57/02 C11B13/00 

Изобретение относится к усовершен ствованному способу .получения арахидоновой кислоты, которая является предшественником простагладнинов. Известен;способ получения арахиДОНОВОЙ кислоты из ЛИПИЖ В ЖИБОТНЫК тканей путем их олвзшеиия с последующей последовательной фракционной кристаллизацией смеси тлсвтх жирных кислот при температуре от-70 до -20 и обработкой мочевиной, дальнейшей кристаллизации полученных ючевннных комплексов при температуре от -75 до -2Q°C и их разложением при рУ 3 и температуре 40-4S C, получ йин - при этом смесь полиеновык кислрт этерифицируют в присутствии кислых катгор заторов и полученные полиековы кислот последовательно подвергают фракционированию при остаточном давл НИИ 0,01-0,06 им рт.ст., омылению и фракционировании при 0,010,06 мм рт.ст. 1. Этот способимеет недостаток, который заключается в том, что обработ ка мочевиной значительно усложняет техиологию процесса. Цепь изобретения - упрощение технологии процесса. Это достигается тем, что в способе получення .арахидоновой кислоты из липидов животных тканей путем их ол&шення с использованием низкотемпературной кри :таллиэации, этерификации и омыления. полученную после о№лления смесь высаних жирных кислот подвергают кристаллизации при температуре от О до -5°С, из жидкой фазы извлекают неомыляемую часть липидов экстракцией петролейным эфиром, оставшуюся жидкую фазу подкисляют минеральной кислотой, нз полученной реакционной массы экстрагнруют жирные кислоты петролейньви эфиром, экстракт подвергают кристаллизации при температуре от -28 до , а затем при температуре от -75 до -7бс, петролейный эфир отгоняют, полученную смесь кислот подвергаиот кристаллизации в ацетоне при температуре от -77 до -78С с последующей его отгонкой, полученный при этом концентрат арахидоновой кислоты этерифнцируют метиловым спиртом и очищают хроматографией на силикагеле, импрегнированном нитратом серебра в колонке с использованием в качестве элюента гексана и/или диэтилового эфира, причем последний бфрут в количестве 5-100% от веса гфксана, из полученного концентрата мфтиловых эфиров выделяют арахндонов кислоту путем испарения элюента с последующим «елочным гидролизом, экстракцией петролейньм эфиром, подкис полученной реакционной смеси минеральной кислотой и экстракцией а ахидоновой кислоты петролейным эфиром. Способ осуществляют следующим образом250 г липидов надпочечников крупнфго рогатого скота подвергают щелоч гидролизу с расчетом 20 мл 0,3 раствора едкого натра в метаноле на липидов. Гидролиз проводят в 2 час при температуре рефлюкс и;перемешивании реакционной смеси в а -мосфере аргона. По окончании гидр смесь охлаждают льдом до температуры 0-5°С. В результате охлаждения содержание арахидоновой кислоты в смеси кислот, присутствующих в гйдролизате, повьвиается с 8-10 до (отн. % по xpOMaTOrpaivMe) . жидкую фазу отделяют через мелкопор:лстую пластинку при помовди вакуумного насоса и извлекают неомыляемые 3-4-кратным экстрагированием пётролейным эфиром (ПЭ), При т.кип. 4р-бО с порциями по 500 мл водносриртовую фазу подкисляют соляной кислотой до рН 1 и экстрагируют жирные кислоты тремя-четырьмя порциями П& по 500 мл в атмосфере инертного г|аза. Жирно-кислотные экстракты сое ф1няют и охлаждают 12-15 час при температуре от -28 до , при э;том происходит частичное выкристаллйз.овывание насьтщенных жирньк кислот пЬсле чего содержание арахидоновой кислоты в растворе смеси кислот составляет 24-25%. Маточный раствор отделяют при этой же температуре непосредственно в другой кристаллизаци онной цилиндр под действием вакуума через мелкопористую пластинку и подвергают низкотемпературной кристаллизации (НТК) при температуре от -75 до над твердой углекислотой в течение 6-7 час. Содержание арахидоновой кислоты в смеси жирных кисло повышается до 40-45%. После этого петролейный эфир удаляют на роторном испарителе и заменяют там же 700 мл ацетона. Ацетоновый раствор помещаю На твердую углекислоту при -78с на 10-12 час,, после чего маточный рас вор извлекают приведенным способом в следующий кристаллизационный сосуд (цилиндр), ацетон упаривают в поток инертного газа (азот или аргон особо чистоты) до объема 150 мл и повторяю НТК при -73°с в течение 10 час. Получаемый после упаривания ацетона концентрат арахидоновой кислоты (89 г содержат 65-67% основного компонента) подвергается после метилирования очистке на S Og/AgNOs колонке с использованием гексана и/или диэтилового эфира. Последний берут в количестве 5-100% (от веса гексана), получают концентрат метиловых эфиров кислот в Ешде смеси с сольвентом. Гексан и/или диэтиловый эфир испаряют, конц€;нтрат эфиров гидролизуют действием метанольного раствора SdОН, после гидролиза щелочную реакционную смесь экстрагируют петролейным эфиром, после этого реакционную смесь подкисляют соляной кислотой и экстрагируют арахидоновую кислоту петролейным эфиром. После колоночной хроматографии выход составляет 5-6 г 95-97% арахидоновой киблоты. Остальные 3-5% составляют более ненасыщенные жирньЛе кислоты с 4- и 5-кратнь ми связями. В получаемой арахндоновой кислоте отсутствуют сопряженные полиеновые кислоты. Отсутствие сопряжения кислот проверялось по УФ-спектру на длине волн 233, 268, 278 и 315 нм. При испытании пригодности полученной арахидоновой кислоты (ля биосинтеза простагландина Еа (ПГЕ) выход последнего составил из расчета на свободную кислоту. Выход ПГЕ 2 определялся по известному методу щелочной деградации. Анализы полученной арахндоновой кислоты, а также промежуточных продуктов осуществляют газохроматографическим методом на хроматографе Хром-4 (пламенно-ионизационный детектор, колонка 3,5 м-З мм, жидкие фазы: 1,4бутандиолсукцинат и ХЕ-60, температура термостата колонки 210-220с, газноситель- гелий). Формула изобретения Способ получения арахидоновой кислоты из липидов животных тканей путем их омыления с использованием низкотемпературной кристаллизации, этерификации и О1«йлления, отличающийс я тем, что, с целью упрсвцения технологии процесса, полученную после омыления смесь высших жирных кислот подвергают кристаллизации при 0-(-)5с, из жидкой фазы извлекают неомыляемую часть липидов экстракцией петролейным эфиром оставшуюся жидкую фазу подкисляют минеральной кислотой, из по- лученной реакционной массы экстрагируют жирные кислоты петролейны1.1 эфиром, экстракт подвергают кристаллизации при температуре от -30С, а Ъатем при -75 до , петролейный эфир отгоняют, полученную смесь кислот подвергают кристаллизации в ацетоне при температуре от -77 до с Последующей его отгонкой, полученный при этом концентрат арахидоновой кислоты этерифицируют метиловым спиртом

и очищают хроматографией на силикагеле, импрегиированном нитратом серебра в колонке с использованием в качестве элюента гексана и/или диэтилового эфира, причем последний берут в количестве 5-100% от веса гексана, из полученного концентрата метиловых эфиров выделяют арахидоновую кислоту Ьутем испарения элюента с последующим щелочным гидролизом, экстракцией

петролейным эфиром, подкислением полученной реакционной смеси минеральной кислотой и экстракцией арахидоновой кислоты петролейным эфиром.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1, Заявка 2339452/04, кл. С 07 С 57/02, 31.03.76, по которой принято решение о выдаче авторского свидетельства.