Средство для стерилизации питательных сред Советский патент 1979 года по МПК C12K1/06 C12B3/00 

1

Изобретение относится к области микробиологии, в частности к средствам для стерилизации питательных сред, предназначенных для культивирования грамотрицательных микробов.

Известна стерилизация питательных сред для микробов при помощи текучего пара, дробной стерилизации, тиндализации, пара под давлением, стерилизующей фильтрации

1 Стерилизацию текучим паром производят в текуче-паровом аппарате Коха или в автоклаве при незавинченной крышке и открытом выпускном кране. Длится она от 30 мин до 1 ч в зависимости от характера и предполагаемой загрязненности стерилизуемого объекта при 100°С. Стерилизация текучим паром как правило, проводится дважды, так как однократное прогревание при 100°С не обеспечивает полного обеспложивания.

Известна также стерилизация среды для микроорганизмов (дрожжей) путем электролиза металлического серебра или его сплава в питательной среде. При этом последнюю подают со скоростью преимущественно 40-45 м/ч, а концентрацию серебра поддерживают от 0,135-0,151 мг/л 2.

Известна стерилизация питательной среды и путем предварительной обработки ее

химическими веществами, например антисептиком группы хлора, с последующим нагреванием при температуре более 40°С 3J.

Перечисленные средства стерилизации имеют два существенных недостатка: необходимость специальной аппаратуры и большая затрата времени на проведение стерилизации. Все это исключает возможность приготовления питательных сред ускоренным способом и представляет значительное неудобство при работе в полевых условиях.

Целью изобретения является упрощение стерилизации питательных сред для грамотрицательных микробов; возможность проведения стерилизации в момент приготовления питательных сред без специальной аппаратуры.

Это достигается применением додецилбензолсульфоната натрия в качестве химического стерилизатора питательных сред.

Это вещество вносится в количестве 0,05 г на каждые 100 г питательного агара, пептонной воды, мясо-пептонного бульона, жидких и полужидких сред Гисса, среды на подвижность, среды с малонатом натрия, сред Симмонса и ацетатной. Приготовленные среды с додецилбензолсульфонатом натрия кипятятся в течение 5 мин, после чего их разливают в стерильную посуду. Как показали исследования, додецилбензолсульфонат

натрия не изменяет свойств питательных сред и обеспечивает стерильность в течение 7-14 сут.

Принцип стерилизующего свойства додецилбензолсульфоната натрия основан на его избирательном бактерицидном действии на грамноложительную спороносную флору. Микробы, вырастающие на средах, содержащих додецилбензолсульфонат натрия, не изменяют своих культуральных, тинкториальных, морфологических, биохимических и антигенных свойств. Этот вывод был сделан на основании изучения следующих микробов, засевавшихся на среды, с додецилбензолсульфонатом натрия, в количестве: шигелл 118, салмонелл 67, эщерихий коли 145, нротей 85, иерсиний нсевдотуберкулеза 86, энтероколитик 57, чума 1 (штаммов).

Пример 1. Скошенный питательный агар. В колбу с 100 г дистиллированной воды всыпать 3,5 г сухого питательного агара рН 7,2-7,4, добавить 0,05 г додецилбензолсульфоната натрия, тщательно размешать, кипятить до быстрооседающей крупной пены под ватно-марлевой пробкой 4-6 мин, после чего разлить стерильной пипеткой в стерильные пробирки, скосить.

Пример 2. Среда Гисса, приготовленная из сухого препарата с реактивом ВР. В колбу со 100 г дистиллированной воды внести 2 г сухого препарата с глюкозой (или с другим углеводом), тщательно размешать, внести туда же 0,05 г додецилбензолсульфоната натрия, прокипятить под ватно-марлевой пробкой, помешивая и не допуская пригорания, после чего разлить стерильной пипеткой в стерильные пробирки.

Пример 3. Приготовление жидкой питательной среды (1%-ная пептонная вода, мясо-пептонный бульон). В 100 г питательной среды вносится 0,05 г додецилбензолсульфоната натрия, среда кипятится под

ватно-марлевой пробкой 4-6 мин после че-го разливается в стерильную посуду.

Пример 4. К 100 г жидкой среды Гисса добавляется 0,05 г додецилбензолсульфоната натрия, смесь кипятится и разливается стерильно в стерильные со стеклянными «поплавками пробирки. Чтобы освободить поплавки от воздуха, пробирки помещают в водяную баню, в которую налит раствор хлористого натрия (40 г). Кипячение в растворе хлористого натрия обеспечивает не только освобождение поплавков от воздуха, ,но и дополнительную стерилизацию среды. Следзет иметь в виду, что среда в пробирке закипит раньше, чем раствор хлористого натрия, температура кипения которого . Время кипячения среды 2-3 мин.

Во всех случаях рН среды устанавливают с учетом ее применения.

Использование додецилбензолсз льфоната натрия для стерилизации питательных сред исключает потребность в специальной аппаратуре и позволяет готовить стерильные питательные среды в минимальный (ех temроге) срок как в лабораторных, так и в нолевых условиях бактериологической практики.

Формула изобретения

Применение додецилбензолсульфоната натрия в качестве средства для стерилизации питательных сред, предназначенных для выращивания грамотрицательных микробов.

Источники информации, принятые во внимание нри экспертизе

1.Мейнелл Д., Мейнелл Э. Экспериментальная микробиология. М., 1967, с. 104- 145.

2.Авторское свидетельство СССР №358358, кл. С 12В 3/16, 1972.

3.Патент Японии № 49-6672, кл. 36(2), 1974.