Штамм Советский патент 1979 года по МПК C12K1/00 

(54) ШТАММ Psaudomonas aerug-ihosa 640х

Изобретение относится к области микробиологических исследований и представляет србой новый штамм, который может быть использован для разрушеН-йя ДДТ, / ..

МикробиЬлоги 1еским методам, раз ложения ДЦТ придается в настоящее время большое значение. Основные .усилия направлены на получение куль тур микроорганизмов, способных разлагать ДЦТ-до нетоксичных продуктов Существенных успехов, однако, до последнегс) времени достичь не удавалось. Установлено, что некоторые микроорганизмы способны трансформировать ДЦТ вДДД, ДДЕ и ДБФ l .

Расщепление ДДТ было достигнуто. также с помощью культуры гриба PeniciCiomsp. АТСС 20.369 2j|.

Однако в описании патента приводятся лишь данные об убьши ДЦТ в Среде без характеристики продуктов превращения и интенсивности процесса. . - .

Целью изобретения-является выделение штамма Pseudomonois aeruginosoi 640х, обладающего способностью к деградации ДДТ, включающей полное дехлорирование и раскрытие одного ИЗ колец молекулы пестицида.

. Предлагаемый штамм Pseudomonas aeru -fnosa 640х характеризуется следующими признаками. Штамм деградирует молекулу ДДТ фенилуксусной кислоты в процеЬсе роста на гексадекане.

Морфологические и культуральные признаки. Штамм выделен из почвы Фруктового сада Крымской области, в течение .23 лет. обрабатьУваемой

0 ДЦТ. Клетки прямые, палочковидные, размеры 0,7 - 1,0 (отдельные клетки 1,5) X 0,3 г, 0,5 мК . J. подвижные, монотрихи имеют фимбрии, грамотрицательные, неспороносные.

5

Мясо-пептонный агар. Колонии светло-серые, плоские, гл-аДкие, блестящие, с ровнымикраями. В агар выделяют желто-зеленый, флуоресцирующий пигмент.. .

0

Мясо-пептонный бульон. Образуется муть, пленка и флуоресцирующий пигмент. . Минеральная среда Е-8 с глюкозой. Колонии белые, гладкие, блестящие,

5 плоские, с ровным краем, пигментов в среду не выделяют..

Среда Чапека. Колонии мелкие/ белые, глаДкие, блестящие, плоские, с ровнымкраем, пигментов в среду

0 не выделяют. & ГлюкЪзо-.картофельный агар. Колонии светло-буЕие, гладкие, блестящие, край pOBHfcjfi, пигментов в среду .не выделяют. Среда Кинга А.Колонии бледно-голу оые, гладкие, блестящие, выделяют в средуголубой пигмент-пиоцианин, Среда Кинга Б. Колонии светлые, желто-зеленые, гладкие, блестящие, выделяют S cpejjy флуоресцирующий пи мент - Фиэиолргйч еские и биохимические пpизнaкиi.Аэроб, дает положительную Ьксидазную реакцию, не накапливает в клетках поли jb- оксимасляную йислоту. Растёт при 41с/ нё р1а ::тет при 1-10®С, оптимальная тёйПё| атура дл:я роста 29- 30с. . . : Отношение к сахарам. УсваиваетХ фруктозу, ксилозу, сахарозу, трегаЯОэу, I) - глюкозу. Не усвайвйет рибоэу, арабинозу, рамибзу;, р ффиноэу, лактозу, мальтозу, галактоз :ббразуёт кислоты на ксилрзе ифрукт зе. - :. ,.. - :. - ;.,.; , --- ; Отношение -к органическим кислотам Усваивает цетат, пропионат, цитрат пируват, малат, сукцинат, бензоат,, h -оксибензоат, прдтокатёхат. Не .испрльзует тартрат, п- толуат. . ; Отношение к углеводоролай. Не ус ваиваёт нафталин, п-ксилол, пкрезол, фенол, бифенил. Растет на н -алканах от С до Ц, ОтношениеК спиртам. Усваивает этаноЛи глицерин, не усваивает Сбр бит . ;:, ; ,- , . ;. . ртношенйе к аминокислотам. Усваивает йалин, а ргинину аланйя, Отношенне к источникам азота. Не усваивает нитратный азот, усванвает аммонийный азот. : Редукция нитратов отсутствует. Нитратное дыхание положительное, Желатину разжижает, казеин гидро ЛИЗУеТ. :, ;. . . . В отличив ОТ ранееопМсаннах. Йикроб1 га1нйэнов штйгда Pseudomonas ae -ug-iiT06ei б40х осуществляет полное дехлорирование молекулы, про,дуктрм является веадестёо, легко раз;пагйемое многими микроорганизмами, не требуется вырашшвайиё культур на субстратах - аналогах. ДЦТ, процесс .И|{ет при более высоких исходных кон цен грациях; ДДТ и со значительно большей интенсивностью. .Особенностью процесса является то, что он осуществляется в процессе роста культуры на н-; гексадакане. Предлагаемый штамм Pseudotnonas aerug4nosa б40х может быть использован для деградации ДДТ, которой мо3KST присутствовать как загрязнитель в вода, промьааленных стоках, в разяичных почвах, загрязненных ДДР, Пр цесс очистки от ДДТ может быть осу- шестален при загрязнении природных источников нефтепродуктаьш, так как ультура осуществляет деградацию ЦТ в процессе роста на н-алканах. Формула изобретения; Штамм Pseudomonasaerugrinoba б40х,Хранится в коллекции культур Отдела микробиологической трансфорации органических соёдйнений ИБФМ Afl СССР. Предназначен для разложения ДЦТ.. .; Морфологические и культурные признаки. Штамм .вццелен из почвы фруктовых садов Крымской области, в течение 23 лёт обрабатываемых ДЦТ. .- : . , . . Мелкая палочка,О,7-1,0x0,3-0,5 мкм, отдельные клетки достигают 1,5 глкм, клетки подвижные, мОнотрихи, грамотрицательные, неспоросные. Мясд- ептйнный агар. Колонии светло-серые, плоские, гладкие, блестящие, с ровныгли краями. В агар выделяют жёлто-зеленый флуоресцйрую,щий пигмент. . . -. , , Мясо-пептонный бульон. Образуется муть, плёнка ифлуоресцирующий, пигмент.;: ;. f- Минеральнаясреда Ё-8 с глюкозой, Колонии белые, гладкие, блестящие, плоские, с ровным краем, пигментов в среду не. выделяют. . Среда; ;Чапека. Колонии мелкие, белые, гладкие, блестящие, плоские, с ровным краем, пигментов в среду не выделяют. ;. . . . ; : ГлюкозО-картофельный агар. Колонии . ;светлО-бУрые, гладкие,блестящие, край ровный, пигментов в среду не выделяют ... ... ......... Среда КйнЕа А. Колонии бледноголубые, гладкие, блестящие, вьщеляют в среду голубой пигмент-пйоцйанцн. - ;,. . ; Среда Кинга Б. Колонии светлые,зкёлто-з.еленые, гладкие, блестящие, выделяют .в среду флуоресцирующий пигмент. ; . . . ., Физиологические и биохимичеОкие признаки. Аэроб, дает положительную оксидазную реакцию це накапливает в клетках поли - | - оксимасляную кислоту. Растет при , не растет при , оптимальная температура для роста 20-30 с. Отнощенйе к сахарам. Усваивает D -фруктозу, ксилозу, сахарозу, трегалозу, Ъ -глюкозу. Не усваив ает рибозу, раффинозу,арабинозу, рамнозу, Лактозу, мальтозу, галактозу Образует кислоты на ксилозе и фруктозе. Отношение к органическим кислотам. Усваивает ацетат, пропионат, цитрат, пируват, малат, сукцннат, бензоат, п -оксибензоат, прстокатёхат, не использует тартрат, п-толуат. Отношение к углеводородам. Не усваивает нафталин, ti -ксилол, п .-5 крезол, фенол, бифенил . Растет на н-алканах от Cjg. Отношение к спиртам. Усваивает этанол и глицерин , не усваивает сорбит. Отношение к аминокислотам. Усва ивает аргинин, валин, аланин Отношение к источникам азота. Н усваивает нитратный азот, усваивае аммонийный азот. Редукция нитратов отсутствует. 9 Нитратное дыхание положительное Желатину разжижает, казеин гиЯррлизует. Источники.информации, принятые во внимание при экспертизе ipatitK.et «е. pegrradalion of end-, г in aeobrtn BDT tv Soie microopgraniam ApptWicrofcioe.,.t97O,9;c.879-881 2. Патент США 3979283, кл. 210-11, 1976.