Штамм @ ИНМИ-КЗ-2,используемый для очистки сточных вод от 2-хлорбензойной кислоты Советский патент 1983 года по МПК C12N1/20 C02F3/34 C12N1/20 C12R1/38 C02F3/34 C02F101/36 

ьэ

со

Ю

Изобретение относится к микробиологической промьшшенности и касается нового Штамма, используемого для очиср ки сточных вод от стойких и токсических галогенсодержащих ароматических соединений, в частности 2-хлорбёнзойной кислоты (2--ХБК),

Получению культур микроорганизмов, способных использовать галогенсодержа- щие бензойные кислоты в качества единственного источника углерода и энергии с полной минерализацией субстрата, уделяется большое внимание, однако до последнего времени не удалось получить микроорганизм, способный утилизиро- вать.2-ХБК.

Известно, что 2-ХБК разлагается обогащенной культурой, полученной с завода по аэробной переработке сточюлк вод ll,

Известно также, что разлагается активным . Однако в известном источнике приведены данные только об убыли 2-ХБК, но не говорится о полноте разложения этого соединения и количестве, высвобождающегося хлора. AKTHBiibiE ил разлагает ОД г/л за 145 ч. .

Микроорганизмы, утилизирующие 2-ХБК, не были вьщепены.

Целью изобретения является шта1угм

Р5е1)с1оп10ио9серас«1ИНМИ-кз-2| спо- .

собный утилизировать 2-ХБК, в результате чего происходит разложение этого соединения с полным дехлорированием органической молекулы.

Штамм бактерии получен путем выделения наиболее быстро растущей колонии на агаризованной сш1тетической среде с 2-ХБК после длительного вьщерживания образцов садовой почвы Подмосковья в среде, содержащей салициловую кислоту и 2-ХБК.

Штамм депонирован во Воесокхзной . i коллекции микроорганизмов при ИБФМ АН СССР, имеет номер ВКМ В-1448Д,

- Предлагаемый штамм Pseuc3omonO$ ерамЪ ИНМЙ-КЗ-2 использует 2-ХБК в качестве единственного источника углерода и энергии. Оптимальная концентрация 2-ХБК для роста штамма составляет О,З-г/л, Это количество 2-ХБК в jTsnoBKHX аэрации исчезает за 40-5 О ч. Предельная концентрация 2-ХБК, при которой наблюдается рост, равна 1, 5 г/л. В процессе роста штамма на 2-ХБК/в среде не накапливаются щзодукты неполного превращения этого соединения, а высвобождение иона хлора составляет 100%. Тиамин и рибофлавин в концентрации 1 мг/л ускоряют утилизацию 2-ХБК.

Штамм имеет следующую характеристику.

Морфологические и культуральные признаки.

Клетки прямые, пaлoJj кoвидньш, размеры 2,4-1,2 X О,8-О,9 мкм, подаия ные, лофотрихи от 1 до 3 жгутиков, грамотрицательные, неспоррсносные.

Сусло агар. Колонии белые, вьшуклые, гладкие, блестящие, с ровными краями, слизистые, пигмент в среду не вьщеляют.

Сусло жидкое. Образуется муть, ПИР мент в среду не вьзделяется, Мясопепто. ный агар. Колонии мелкие, белые, выпук-. лые, гладкие, блестящие, с ровными краями, слизистые, пигмент в среду не вьзделяют.

Среда Кинга А. Колонии белые, выпуклые, гладкие, блесгтящие, с ровными краями, слизистые, пигмент в среду . не вьщеляют.

Среда Кинга Б. Колонии белые, выпуклые гладкие, блестящие с ровными краями, слизистые, вьвделявот в среду 9ветло-желтый пигмент.

Минеральная агаризованная среда

с 2-ХБК. Колонии белые, вьшуклые, Гладкие, блестящие с ровными краями,

пигмент в среду не вьоделяют.

Жидкая минеральная среда с 2-ХБК. Образуется муть, плотный осадок, который при взбащ-ывании легко взмучивается, Шгмент в среду не выделяется

Физиологические и биохимические признаки.

Аэроб, дает положительную оксида ную реакцию, накапливает в клетках пОлиоксимальную кислоту. Растет при , не растет при 4 и 41 С Оптимальная температура для роста 28-ЗО С

Отношение к углеводам: усваивает D-глюкозу, t -галактозу, j -арабиноау, Т)-ксилозу, Т) -фруктозу, , -рамнозу, В-рибозу, целобиозу, лактозу, сахарозу. Не усваивает мальтозу, крахмал,

Отнощехше к сахароспиртам: уоваивавт даозит, макнет, сорбит, адонит.

Отношение к органическим кислотам: усвайзает 2-з(лорбензоат, 2-фторбензоат, 4-фгорбензоат, 2-аминобвнаоат, бвнзрат, салицилат, 3-оксибенаоат, 4-окси6енэоат, 2, З-дИоксибензоат, протокатехат ацетат, цитрат, сутщюлеег, малеат, адипат, малонат оаркоаии. Не усваивает ннкотииат, 2,3-диоксибекзоат, 3-хпорбе аоат, 4-хлорбенаоат. Отношение к фенолам : усваивает пи рокатехин, гидрохинон. Не усваивает фе йол, резорцин Отношение к амвнокисйотам: усваивает ЭЬ -аргинин, валин, норпейцин, -аланин, орнитин, лизин, лебцин, про лин, Д -{ фенилаланвн. Не уезживает U} -тгрш1тофан. Отношение к источникам азота; уоваивает аммонийный, нитратный азот. Нитратное да.1хание отрицательное. Желатину не разжижает. При м е р. Культуру штамма PseudomOMoe. сераЫа ИНМй-КЗ-2, выращенную цри 28 в течение 14 суток на агаризованной минеральной среде с 2-ХБК, следующего состава г/л: 4,ОГ NaH РО4-2Н ,0 0,4i,M80Q4«7Ha.O O,15jV; Са (N0 LO WHi 1.504 O,5i НаМоО4 O,O04i 2-ХБК 0,3 рН 7,2-7.3) - петлей вь севают в колбу ёмкостью 25О мл, со20держащую 5О мл посевной того же состава. Колбу помещают на круговую качалку {18О об/мин,). Посевной материал выращив 1ют в течение 96 ч при 28 С. Приготовленным посевным материалом в количестве 1О мл засевают колбы емкостью 75О мл, сод ржащие 100 мл среды того же состава. Выращивание культуры провод sir на качалке (180 об/мин) при , В этих условиях 2-ХБК исчезает за 5О ч, высвобожденне иона хлора составляет 1ОО%, Таким офазом, в отличие ,от известь ных данных i2j , разложение 2-ХБК осуществляет штамм бактерия PsetJ 5&r«c ИО% cepaCia ИНМИ-КЗ-2 с полным высвобождением иона хлора. При этом скорость разложения в три раза быстрее при исходной концентраини 2-ХБК в три раза большей, так как при концентрации 2-ХБК 0,3 г/л разложение проходит за 4О - 5О ч, в то время как активный ил разлагает 0,1 г/л 2-ХБК за 145 ч.

Штамм P eu6oVwonds cepocia ИНМИ-КЗ-2 (Всесоюзная коллекция микрооргаиизмсю при ИБФМ АН СССР, ВКМ В-1448 Д), используемый для очистки сточных вод от 2-хлорбвнзойной кислоты. . (/)