Способ диагностики специфической сенсибилизации организма Советский патент 1979 года по МПК A61B10/00 

Изобретение относится к области медицины, а именно иммунологии и может быть использовано д,ля диагностики иммупо-натологически.к состояний организма.

Известен способ диагностики специфической сенсибилизации организма, заключающийся во взятии пробы крови, культивировании ее с аллергеном с последующим приготовлением мазков 1.

Однако известный способ не обеспечивает высокой достоверности диа1-ностики.

Целью изобретения является повышение достоверности диагностики.

Эта цель достигается тем, что пробу крови с аллергеном культивируют на питательном агаре, готовят мазки-отпечатки через 3-5, 50-60, 110-120 мин от начала культивирования и но изменению физиолого-морфологического состояния клеток в мазках в процессе и по окончании культивирования диагносцируют иммуно-аллергическое состоякие организма.

Способ поясняется следующими нримерами.

Пример I. Пробу крови (1,0 .мл) больного с обострением хронической пневмонии, имевщего резкогюложительную кожную пробу на стрептококковый аллерген (4 X 6см)

и слабоположительную реакцию на стафилококковый аллерген (1 X I см), разделяют на три равные части, две из которы.х соединяют со стрептококковым и стафилококковым аллергенами (по 0,1 мл аллергена, содержащего 1 кожную дозу аллергена), третья часть служит контролем. Все три части крови в нробирка.х ставят в термостат (-т-37С) на, 30 мин. После этого каждую часть крови наносят тонким слоем на поверхность 3°/о-ного мясо-пептонового агара и вновь ставят в термостат (+37°С). Через 5, 60 и 120 мин инкубирования делают мазкиотнечатки, которые после фиксации и окраски по Романовскому-Гимза просматривают в микроскопе с подсчетом и подразделением форменных элементов белой крови по их функционально-морфологическому признаку. Данные представлены в табл. 1.

Как видно из табл. 1, ис.ходная картина, белой крови (после 5 мин инкубации) характеризуется следующими количественными показателями: лимфоцитов - 22%, среди которых 2% составляли многоядерные лимфоциты, выявляющиеся только после инкубации крови на агаре; сегментоядерных лейкоцитов - 72°/о, из которых 3% нежизнеспособных и 9% клеток, начавщих трансформироваться из лимфоцитов; эозинофилов - ЗУо и моноцитов - 2%. По истечению 120 мин инкубации состав контрольной части крови характеризуется следующими показателями: лимфоцитов - 21%, из которых 7 - многоядерные клетки; сегментоядерных лейкоцитов - 65%, но из них 46,1% (.31 клетка) были уже нежизнеснособными; эозинофилов - 2%, базофилов - 1% и моноцитов - 12% (выявлен скрытый моноцитоз). Таким образом, инкубирование крови на мясо-нептонном агаре, способствует изменению картины крови в сторону активации клеток, участвующих в иммунологических реакциях, - лимфоцитов и моноцитов, что выражается в появлении многоядерных клеток и в изменении количественного состава моноцитов.

Культивирование крови на мясо-пептонном агаре после ее инкубации с аллергенами показало, что клетки белой крови реагируют на стрептококковый и стафилококковый аллергены различным образом. В обоих случаях отмечается значительное снижение числа лимфоцитов после 120-мин инкубации на агаре по сравнению с контролем. Выявляется определенное снижение числа жизнеспособных сегментоядерных лейкоцитов и увеличение числа данных клеток, закончивших свое существование (нежизнеспособных). Лимфоциты крови при контакте со стафилококковым аллергеном реагируют после 60-мин инкубации появлением повышенного числа многоядерных клеток и увеличением в 2 раза эозинофильных клеток. Контакт крови со стрептококковым аллергеном приводит к возрастанию почти в 2 раза числа моноцитарных клеток по сравнению с контролем и пробой со стафилококковым аллергеном и уменьшению числа жизнеспособных лейкоцитов через 60 мин после начала культивирования. Таким образом, культивирование крови, сенсибилизированной аллергенами, на мясо-пептонном агаре позволяет на фоне выявляемой измененной картины белой части крови установить специфическое реагирование данных клеток на аллергены, сенсибилизировавшие организм. Различие в действии стрептококкового и стафилококкового алергена заключается в различии образования моноцитарных, эозипофильных и многоялеоных лимфоцитов и может свидетельствовать о длительной сенсибилизации клеток к стрептококковому аллергену и формировании ее к стафилококковому аллергену.

Пример 2. Пробу крови больного с хронической вялотекущей пневмонией, осложненной астматоидным компонентом, у которого были отмечены слабовыраженные кожные реакции на стрептококковый (0,9 X 0,8 см и стафилококковый (1,1 X 1,0см) аллергены, аналогично примеру 1, инкубируют с указанными аллергенами. Подсчет форменных элементов белой крови после инкубации ее на мясо-пептонном агаре, производства мазков-отпечатков и просмотра их в микроскопе выявил результаты, которые представлены в табл. 2.

Из табл. 2 видно, что контакт крови со стрептококковым аллергеном приводит к появлению значительного числа многоядерных лимфоцитов, резкому падению числа жизнеспособных сегментоядерных лейкоцитов и, соответственно, увеличению числа нежизнеспособных клеток данного типа лейкоцитов и наконец, увеличению числа моноцитарных клеток. Характеристика влияния стрептококкового аллергена на лейкоциты свидетельствует о специфическом его действии на функциональную способность лимфоцитов, проявляющуюся в утрате свойства трансформироваться в сегментоядерные лейкоциты, появлении значительного числа клеток моноцитарного ряда и многоядерных лимфоцитов.

Предлагаемый способ позволяет значительно повысить разрешающую способность диагностики иммунно-патологических состояний организма, вызванных различными инфекционными агентами.

Способ позволяет более точно диагностировать степень и специфичность действия исследуемого аллергена на клетки белой крови, что способствует улучшению качества проводимого лечения.

я я

В

с

0

«

н

„660668

910

Формула изобретениявания и по изменению физиолого-морфолоСпособ диагностики специфической сен-цессе и по окончании культивирования диагсибилизацни организма путем отбора про-носцируют иммунно-аллергическое состояние

бы крови, культивирования ее с аллергеноморганизма, с последуюпиш приготовлением мазков, огличшощийся тем, что, с целью повышенияИсточники информации, принятые во внидостоверности диагностики, пробу крови смание при экспертизе

аллергеном культивируют на питательном1. Современная практическая аллерголоагаре, готовят мазки-отпечатки через 3-5,гия. Под ред. Адо .Д.. Д. и Польнера А. Л.

50-60, 110-120 мин от начала культивиро-М., 1963, с. 98-99.

гического состояния клеток в мазках в про