2-метоксиэтанол, 2-зтоксиэтанол, дйокс и диметилформамид. Предпочтительно используют спиртовый раствор сульфокислоты, водньи раствор сульфокислоты и серной кислоты в смеси с равным объемом органического растворителя, смешивающег ся с водой. Сульфонат обычно осаждают добав лением органического растворителя, выбранного из ГРУППЫ; содержащей бензол, толуол, диэтиловый эфир, Д1 иэопропиловый эфир ацетон, метил эгилкетоНр -метилизобутилкетон S, этил ацетат, метилацетат, тетрагидрофуран, хлороформ. Двойную соль сульфокислоты и се ной кислоты осаждают при добавлении низшего кетона или алканола, полностью смешивающегося с водой Известно, что SAM представляет с бой продукт исключительной важности для большого количества биологических реакций ферментативного трансметилированияОднако большой проблемой, связан ной с этим веществом, является его исключительная нестойкость при температуре окружающей среды или выше этой температуры. Кроме того, способ его получения труден и малоосуществим в промышленных масшт.абах. Известны исследования, направле ные на стабилизацию SAM до такой с пени, чтобы сделать возможным его п менение в областях биологии для то го чтобы можно бьто получать соли, стойкие при нормальной температуре и в условиях влажности о В результа те получены хпорид и сульфат SAM, но они нашли применение только в качестве реагентов в биохимии и тол ко, в течение короткого времени, так как даже в сухом состоянии их стой кость ограничена во времени при ни ких температурах Кроме того, способы их получения полезны для получения этого вещества в малых количествах, но не для их получения в промышленных масштабах 1, Согласно изобретению нов-ые соли SAM оказались необычайно стойкими по времени при температурах до 45°с и их можно получать по новому способу, легко проводимому экономически в годно в промышленных масштабах и дающему высокие выходы. Содержание SAM во всех кислотах данного изобретения остается неизменным даже через 360 дней при 45°С в сухом состоянии. Две наиболее стойкие соли SAM - хлорид и сульфат изменяют содержание SAM через 30 дней при 45 С в сухом состоянии соответственно на 20 к 50%; через .60 дней хлорид полностьк5 разлагается, а сульфат содержит только 5% начального 5Ш, Способ получения новых солей согласно предлагаемому изобретению включает в основном следующие стадии : А,, Получают раствор, обогащенный SPMf экстрагированием из природных веществ, содержащих его, или в результате ферментативного синтеза из аденозинтрифосфата (АТФ) и метионин а „ Б, Осаждают SAM, присутствующий в отфильтрованном водном растворе, насыщенным водным раствором пикролоновой кислоты или растворами этой же кислоты в органических растворителях, смешивающихся с водой, например в метиловом, этиловом, пропиловом, изопропиловом, н-бутилдвом или изобутиловом спиртах, или в ацетоне, метилэтилкетоне, метилизобутилкетоне, этилацетате, те.трагидроФуране, 2-метоксиэтанапе, 2-этоксиэтаноле, диоксане или диметилформамиде, В, Растворяют отфильтрованный осадок в растворе одной из упомянутой кислот в спирте, например в метансмче, этаноле, 1-пропаноле, 2-пропаноле, 1-бутаноле, 2 бутаноле, Бтор-бутаноле или 2-метоксиэтаноле или 2--этоксиэтацоле. Г. Добавляют раствор органического растворителя, смешивающегося с применяемым спиртом, например бензола, толуола, диэтилового эфира, диизопропилозого эфира, ацетона, метилэтилкетона, метилизобутилкетона, этил- или метилацетата, тетрагидрофурана или хлорофорг а Д, Отделяют органический растворитель и снова растворяют осадок в растворе кислоты, применяемой на стадии В, Б одном из. растворителей, применяемых также на стадии В, и обрабатывают раствор обесцвечивающим у гл ем л д., Добавляют к pcicTBOpy органического растворителяJ способного осагкдать чистую соль, SAM в хорошо кристаллическом и легко фильтруемом состоянии, выбранного из растворителей,, указанных на стадии Г, Первые две стадии способа получения двойных солей с серной кислотой идентичны, Последующие стадии можно осуществлять следующим образом: Ж, Растворяют отфильтрованный осадок в смесир содержащий равные объемные гасти растнорителя, частично сменшБающегося с водой, например кетона , метили зоб тилкетона, н-бутанола или изобутанола, и водного раствора равной концентрацки (Б г-эквивалентах) о.гкс-й из упокянугой сульфокислоты и серной кислоты а 3с Отделяют органический слой и добавляют к водному раствору кетог или спиртовый растворитель, полночстью растворимый в воде. И. Снова растворяют осадок в 10-20%-ном растворе кислоты, применяемоЯ на сталии ж в одном из спиртовых растворителей, применяемых на стадии в, и обрабатывают раствор обесцвечивающим древесным углем. К, Добавляют органический растворитель, способный осаждать чистый SAM в хорошо кристаллизуемом и легко фильтруемом состоянии. В соответствии с одним из вариантов двoйныie соли получают путем подвергания простой соли/ полученной в конце стадии В, следующим стадиям Л, Снова растворяют осадок в водном равтворе (одинаковой нормальности) серной кислоты и кислоты, применяемой на ранней стадии В, и обрабатывают раствор обесцвечивающим дре весным углем. М. Добавляют органический растворитель, способный осаждать чистую соль SAM в хорошо кристаллизуемом и легко фильтруемом состоянии. Стадию А способа можно проводить разными путями, одинаково эффективными для получения концентрированного раствора SAM. В примерах приведены способы получения новых солей данного изоб- . ретения. Пример 1. К 90 кг дрожжей, обогащенных SAM (6,88 г на 1 кг) , в соответствии с методом Шлейка,добавляют 11 л этилацетата и 11 л воды при температуре окружающей среды, .После энергичного перемешивания в течение 30 мин добавляют 50 л 0,35 н серной кислоты, непрерывно перемеши вая еще в течение 1,5 ч. После фильтрования и промывания водой получают 140 л раствора, содержащего 4,40 г/л SAM, что соответствует 99,5% его количества в исходном материале. К полученному раствору при перемешивании добавляют раствор . 2,3 кг пикролоновой кислоты в 25 л метилэтилкетона. После выдецисн вания в течение ночи осадок отделяют центрифугированием и промывают водой. Осадок растворяют при перемёцшвании при температуре окружающей ср ды в 6,2 л 1 н, раствора метансуль- фокислоты в метаноле. После отфильт ровывания следов нерастворимого материала к раствору добавляют 50 л :ацетона. После полного осаждения осадка верхний слой раствора декантируют, а нерастворимый остаток промывают небольшим количеством аце тона J Осадок растворяют в 25 л 0,25 н. раствора метансульфокислоты в метаноле, добавляют обесцвечивакяций дре |Весный yroj.b и раствор фильтруют. К фильтрату добавляют 125 л метилизобутилкетона. Получают 1089 г кристаллического и легко фильтруемого осадка, растворимого в более 20% воды с образованием бесцветного раствора. Соль слабо растворима в обычных органических растворителях. Результаты тонкослойной хроматографии показали, что продукт не содержит примесей. Аналитические данные приведены в табл.1 и соответствуют соединению общей формулы /Новое соединение идентифицируют по ферментативному способу, основанному на ферментативном метилировании никотинамида и гуанидиноуксусной кислоты с помощью SAM. При полном повторении данной методики, но с применением н-додекансульфокислоты и 1-н-октадекансульфокислоты получают соли фсчэмул S5 3 °5S- S4S603S 5 23N60sS-4C QHjgOjS, аналитические данные которых приведены в табл.2. Пример 2. 1,15кг пикралоковой кислоты, растворенной в 10 л изобутилового спирта, добавляют к 70 л раствора, получаемого после лизиса дрожжевых клеток, при этом применяют исходные материалы и способ, описанные в примере 1. После выдерживания в течение ночи образующийся оссщок отделяют центри)у гиров анием, Осадок растворяют при температуре окружающей среды при перемешивании в 3,1 л 1 н. раствора этансульфокислоты в этаноле. После фильтрования от небольшого количества нерастворилих веществ к раствору добавляют 25 л диэтилового эфира. После отстаивания смесь фильтруют и осадок прогнивают небольшим количеством эфира. Осадок растворяют в 12,5 л 0,25 н. раствора этансульфокислоты в этаноле, добавляют обесдвечивающий Руголь и смесь фильтруют. К фильтрату добавляют 63 л бензола. 585 г соли осг1ждают, фильтруют и высушивают. Полученное соединение растворимо в воде более, чем на 20%, и слабо растворимо в обычных органических растворителях. Как показали результаты тонкослойной хроматографии соединение не содержит какихлибо примесей. Аналитические данные, показанные в табл.1, соответствуют продукту формулы C jHgjN SOg- . Новое соединение идентифицировано также по ферментативному способу, описанному в примере 1. При повторении методики данного способа, но при использовании 2бромэтансульфокислоты и 2 хлорэтансульф9кислоты получают солк формул Ss-ss eS a sSOjC Аналитические данные для этих солей приведены в табл Пример 3, 1,15 кг пикролон вой кислоты растворенной в 12 л н-бутанола, добавляют к 70 л раствора, образующегося при лизисе дрсж Ж0ВЫХ клетокf полученного по способ лизиса с применением такого же сырь как в примере 1, После отстаивания в течение ночи осадок отделяют центрифугированием. Осадок растворяют при температуре окружающей среды пр перемешивании вЗ,1л1Но раствора 0|-10-камфорсульфокислоты в 1-пропан|эле. Затем добавляют 25 л бензола в Вешавший осадок растворяют в 12,5 л 0,25 н. раствора камфорсерной кислЬты в 1-пропаноле и после добавления угля и фильтрования к фильтрату добавляют 63 л ацетона Получают 928 г соли. Соединение растворимо в воде более, чем на 20%, и слабо растворимо в обычных oj)raHH4ecKHx растворителях. Результаты тонкослойной хроматографии показали, что соединени е не содержи каких-либо примесей. Аналитические данные табл, сост ветствуют формулам продуктов 4С,.5. Новое соединение идентифицировано также по ферментативному методу, описанному в примере 1, При аналогичном повторении методики способа, но с применением о-З-камфор-Ю-серной кислоты получают соль формулы аналитические данные которой даны в табл.1 Пример 4, Очистка специфического фермента 50 мл сефарозы (полисахарида, производимого фирмой Pharmacia Fine Chemicafs KB Уписала, Швеция) спекают и суспендируют в воле, а затем обрабатывают бромистым цианом по известному способу для связывания в ществ, содержащих аминогруппы, в матрицы, содержащие полисахаридный гель о К полученному гелю добавляют избыток L-лизина, После реакции продукт несколько раз промывают дис тиллированной водой, буферной смесь при рН 8,5 и буферной смесью с рН 4р5, Затем гель используют для наби ки колонки диаметром 1,5 см и высотой 30 см Через колонку пропускаюо буферную смесь из 0,05 М триэтаноламина и 0,01 М серной кислоты (рН BfO) до достижения полного равно™ веси я.е В колонку помещают 2 мл дрож л евого экстракта, полученного звукйвой обработкой или гомогенизацией .с помощью сухого льда и, возможно, пОсле обогащенияспецифическим ферментом Колонку затем элюируют той же буферной смесью, которую используют для достижения равновесия, а затем проводят распределение белков в злюате с помощью ультрафиолетовой спектрометрии. Одновременно определяют активность сиктетазы в разных фракциях по способу Дж, А, Стекола/ Methods in EuzyinoPogy, т. 6, с 566 (1963), Фракции, обладающие активностью сиктетазы, собирают. Полученный раствор обладает активностью, превышающей активность неочищенного экстракта более, чем в 20 раз. Фермент можно далее концентрировать в этом растворе путем осаждения солями, органическими растворителями или в соответствии с известныг.да способами концентрирования белковых расТ воров. ; Получение SAM. 30 мл спеченного геля сефарозы активируют бромистым цианом или любым другим известным способом связывания белков в матрицы полисахаридного геля, К активированному гелю добавляют 4 t-m раствора специфического фермента, очищенного по указанному способу и содержащего примерно 100 мг белка. Суспензию активированного геля и раствор фермента п€;ремешивают при в течение 18 ч о Смолу промывают водой. Эти промывные воды содержат примерно 70% общей ферментативной активности от начальной активности раствора специфического фермента В результате инкубации сафарозы, полученной по упомянутому способу определения активности синтетазы, наблюдается, что примерно 20% всей активности связывается с полисахаридом. Полученную сефарозу используют для набивки колонки диаметром 1,5 см и высотой 20 см. Через колонку пропускают раствор, содержащий 0,675.М триэтаноламин, О ,,150 М сульфат магния, 0,05 М АТФ, 0,05 М м-метионин и 0,01 М КСе со скоростью 5 мл/ч при 25-27°С. Элюат из колонки анализируют на содержание SAM. Результат анализа показал, что выход составляет 30%, Получение п-хлорбензолсульфоната, 103 мл элюата, содержащего 6 г/л SAM, подкисляют серной кислотой до рН 3 и к полученному раствору добавляют при перемешивании раствор 2-3 г пикролоновой кислоты в 25 мл метилэтилкетона После отстаивания в течение ночи осадок отфильтровывают и промывают водой. Осадок снова растворяют в 6,2 ьш 1 н„ раствора п-хлорбензолсульфокислоты 3 2-метоксиэтаноле, Зате1 1 добавляют 50 мл тоггуола. Гя пав1аий осадок растворяют в 12,5 мл 0,25 Но раствора п-хлорбензолсульфокислоты в 2-метоксиэтаноле,а поспе добавления угля и фильтрсэвания k фильтрату добавляют 60 мл хлороформа, Получают 1,43 г соли. Соединение растворимо в воде более, чем на 20%, и слабо растворимо в обычных органических растворителях. Тонкослойная хроматография показала, что соль не содержит каких-либо примесе Аналитические данные, приведенные в табл.1, соответствуют соединению формулы oCgHgCeOgS Новое соединение идентифицируется также по ферментативному способу описанному в примере 1« При аналогичном повторении методики данного способа, но с использованием п-ацетилбензолсульфокислоты, о-бензслдисульфокислоты, 4-бифенилсульфокислоты, 2-мезитиленсуль фокислоты и 5-сульфосалициловой кислоты получают соответственно соли следующих формулгс н N О в x5egHgq,5,C,5H2,N 05S-3S2H,oO,,,Ng ,,«5055-1,.,. , аналитические данные кото приведены в табл.1, Пример 5, Осадок, полученный после добавления пикролоновой кислоты к 70 л раствора, как описано в примере 1, растворяют при температуре окружающей среды при перемешивании в 3,1 л 1 н. раствора 1,2 -этандисульфокислоты в метаноле. Затем добавляют 25 л ацетона, йлпавший осадок растворяют в 12,5 л 0,25 н. раствора 1,2-этандисульфокислоты в метаноле, а после добавления угля и фильтрования к фильтра ту добавляют 60 л метилизобутилкето на. Получают 546 г соли. Соединение растворимо более, чем на 20% в воде и слабо растворимо в обычных органических растворителях. Результаты тонкослойной хроматографии показали что соединение не содержит каких-ли бо примесей.Аналитические данные, показанные в табл. 1, соответствуют продукту формулы C yH23N605S-2C2H OgS2. Новое соединение идентифицируется также по ферментативному способу описанному в примере 1. Пример 6. Осадок, полученный после доЭавлекия пикролоновой кислоты к 70 л раствора, описанного в примере 1, растворяют при темпера туре окружающей среды и при перемеиш ваниИ в 3,1 л 1 н, раствора 2-оксиЗ.тансульфокислоты в этаноле. Затем добавляют 25 л метилизобутилкетона. Выпавший осадок растворяют в 12,5 л 0,25 н. раствора 2-оксиэтансульфокислоты в этаноле и после добавления угля и фильтрования к фильтрату добавляют 80 л тетрагидрофурана. Получают 632 г соли. Соединение растворимо в воде более, чем на 20%f и слабо растворимо в обычных органических растворителях. Результаты тонкослойной хроматографии показали, что соединение не содержит каких-либо примесей. Аналитические данные, показанные в табл. 1 соответствуют продукту общей формулы 4C2HgO S c.sH. Новое соединение идентифицируется также по ферментативному способу, описанному в примере 1. При аналогичном повторении методики способа, но с применением 3-оксипропансульфокислоты получают соединение формулы С15 2ъ б05 - Сз 8°4 аналитические данные которого приведены в табл. 1 Пример 7. Осадок, полученный после добавления пикролоновой кислоты к 70 л раствора, как описано в примере 1, растворяют при температуре окружающей среды и при перемешивании в 3,1 л 1 н. раствора 1-нафталиисульфокислоты в метаноле. Затем добавляют 25 л метилэтилкетона. Выпавший ос.адок растворяют в 12,5 л 0,25 н. раствора 1-нафталинсульфокислотьл в метаноле и после добавления угля и фильтрования фильтрат добавляют к 70 л метилэтилкетона. Получают 717 г соли. Соединение растворимо 3 воде более, чем на 20%, и слабо растворимо в обычных органических растворителях. Результаты тонкослойной хроматографии показывают отсутствие каких-ли.бо примесей. Аналитические данные, показанные Е табл.1, соответствуют продукту формулы С 5- 23 б-5 Новое соединение идентифицируется также по ферментативному способу, описанному в примере 1, Пример 8, Осадок, полученный после добавления пикролоновой кислоты к 70 л раствора, как описано в примере 1, растворяют при температуре окружающей среды и при перемешивании в 3,1- л- 1 н. раствора Я-нафталинсульфокислоты в 2-пропаколе. Добавляют 25 л диизопропилового эфира. Выпавший осадок растворяют 3 12,5 л 0,25 н. раствора 2-нафталинсульфокислоты в метаноле и после добавления угля и фильтрования к фильтрату добавляют 70 л этилацетата. Получают 710 г соли. Соединение растворимо в воде более, чем на 20%,
и слабо растворимо в обычных opreiнических растворителях Результаты тонко ;лойной хроматографии для этбго соединения показали отсутствие каких-либо примесей„
Аналитические данные, приведенны в табл.1, соответствуют соединению формулы .H,g3NgO S -
Новое соединение идентифицируется также по ферментативному методу описанному в примере 1.
Пример 9, Осадок, полученный после добавления пикролоново кислоты к 70 л раствора, как пока.Эанр в примере 1, растворяют при температуре окружающей среды и при реремеЕпивании в 3,1 л 1 н. раствора 15ензолсульфокислоты в 2-бутаноле, Затем добавляют 25 л диизопропилового эфира. Выпавший осадок растворяют в 12,5 л Of25 Не раствора бенЗолсульфокислоты в метаноле и посlie добавления угля и фильтрования к фильтрату добавляют 65 л этилацетата.
Получают 612 г соли. Соединение растворимо в воде более, чем на 20.% р и слабо растворимо в обычных органических растворителях Результаты тонкослойной хроматографии для Этого соединения показали, что ссе™ динение не содержит каких-либо примесей.
Аналитические данные, показанные В табл., соответствуют продукту
формулы CgHgOgS
Новые соединения идентифицируются также по ферментативному способу описанному в примере 1,
Пример Ю, Осадок f полученный добавлением пккролоновой кислоты к 103 мл раствора как показан в примере 4, растворяют при температуре окружающей среды и при перемешивании в 6,2 мл 1 Но раствора хондроитинсерной кислоты в метаноле
Затем добавляют 50 м.п а1 ;етонао Выпавший осадок растворяют в 25 кп Of25 н, раствора хондроитиксерной кислоты в метаноле и после добавления угля и фильтрования к ф;::льтрату добавляют 125 мл метилизобутилкетоыа.
Получают 3,27 г соли. Соединение растворимо в воде более, чем на 20%., и слабо растворимо в обычнык органических растворителях Результаты тонкослойнойхроматографии показ-али отсутствие каких-либо пркмэсей о
Аналитические данные, показанные в соответствуют прояукту
формулы
-4C,H,,NO.,SНовое соединение идентифицируется .также по ферментативному способу, описанному в примере 1,.
Пример 11 Осадок, полученный после добавления пикролоновой кислоты к 103 мл раствора, как по.каэано в примере 4, растворяют при температуре окру хающей среды и при перемешивании в мл 1 н, раствора цистеиновой кислоты в 2-этоксиэтаноле. Затем добавляют 50 мл диметилацетата йлпавший осадок раст- воряют 3 25 мл 0,25 н, раствора цистеиновой кислоты в 2-этоксиэтаноле, а после добавления угля и фильтрования к фильтрату добавляют 125 мл метил ацетата. Получают 1,53 г соли, Соединение растворимо в воде более, чем на 20%, и только слабо растворимо в обычных органических растворителяХе Результаты тонкослойной хроматографии поксчзали отсутствие каких-либо примесей.
Аналитические данные, приведенные .в табл„1, соответствуют продукту формулы
.,
C.
Новое соединение идентифицируется также по ферментативному способу, описанному в примере 1,
Пример 12, Получение двойной соли с серной кислотой и г.1етансульфокислотой,
103 мл элюата, содержащего 6 г/л полученного по методу примера 4, подкисляют серной кислотой до рН 3, и к этой смеси добавляют при перемешивании раствор 2,3 г пикролоновой кислоты в 25 кл метилэтилкетона (растворитель А),
После отстаивания в течение ночи осадок отфильтровывают и промывают водой Осадок снова растворяют в 5 18 мл 0,1 н„ расТЕОра серной кислоты и метансульфокислоты и в 18 мл матилэтилкетона (растворитель А).
После перемешивания и отстаивания органический слой отдел.яют, а ЁОДный слой взбалтывают с: небольшим количеством метилэтилкётона до удаления последних слел:ов пикролоновой . кислоты. После от.иеления водного слоя ;г.,ибавляют обесцвечившощий уголь и фильтруют. Получают 16,5 мл водного бесцветного раствора, содержащелго 33,8 мл SAM, что соответству ет 90% SAM;, содержащегося в неполном растворе в Анализ с применением тонкослойной хроматографии показал, что раствор содержит только SAM, 16j,5 мл раствора вг ливают в 1СО мл ацетона (растворитель Б), После перемешизания и отстаивания жилкосхь отделяют декантацией., Оса.цок растворяют в г раствора мэтансульфокислоты 3 метаноле (растворитель В),
После добавления обесцвечивающего угля и фильтрования раствор выЩ1ва;ох в 25 ул этилового эфира (растiEOpHTejiij Г) Смесь фильтруют после отстаязания и получают .ХОРОШО кристаллизуемую соль (if 2 г ) следующего состава S ,
Аналитические данные этой соли показаны в табл, 2„ При аналогичном повторении указанной методики, но с применением сульфокислот и растворителей, указанных в табл. 2, получают двойные соли, приведенные в табл. 2 с их аналитическими свойствами. При аналогичном повторении указанной методикиf но с применением 3,3 г 15%-ного раствора метансульфо кислоты в метаноле на последующей стадии осаждения 25 мл диэтилового. эфира (растворитель Г) получают 1,05. г солй следующего состава 3AW -HSO -HSO,аналитические данные которых указаны в табл.3. При повторении указанной методи ки, но с применением сульфокислот растворителей, указанных в табл. 3 получают двойные соли, приведенные в табл. 3 с их аналитическими свой ствами. Пример 13. Получение, двой ных солей SAM с серной кислотой и 2-оксиэтансульфокислотой, Соль, полученную после первого осаждения SAM 2-оксиэтансульфокисло той (см.пример 6), снова растворяют в 20 л раствора 0,1 н. серной кислоты и 0,1 н. 2-оксиэтансульфокислоты в метаноле (растворитель А), Смесь фильтруют после добавлени обесцвечивающего угля и к фильтрату добавляют 100 л метилизобутилкетона (растворитель Б). Смесь фильтруют после отстаивания и получают 587 г соли следующего состава: SAM -HSO -ЗСзН О В с аналитическими данными, приведенными в табл.4. При повторении указанной методики, но с использованием 10 л раствора 0,1 н. серной кислоты и 0,1 н. раствора 2-оксиэтансульфокислоты.в метаноле (растворитель А) последующее осаждение метилизобутилкетоном (растворитель Б) приводит к получению 505 г соли следующего состава HSOj- HjSO -CgHgO S аналитические данные которой приведены в таЬл. 5. При повторении упомянутой методики, но с использованием простой соли SAM, содержащей анионы, указанные в табл. 5, и с использованием растворителей, приведенных в этой же таблице, получают двойные соли, указанные в табл. 5 с их аналитическими свойствами. При повторении этой методики, но с использованием 3,3 г 15%-ного раствора п-толуолсульфокислоты в метаноле при последующей стадии осаждения 25 мл этилового эфира получают 1,18 г соли: SAM -HS04-2CH5CgH S03H, Обладающей свойствами, указанными для продукта примера 1. Таблица 1
.,, S.
S-, И127«б0.7 Ss
С87«75 б017 5
S,.7S5
з 4з б°1755Вг
С Н N. о.,
23 43 6 «I 5
55 7«б°2.5
.
С.4 бОг12у
10,51 10,72 20,30 20,45 50,3 50,96 188
5,55 5,61 10,91 10,70 26,37 26,68 98
4,72 4,84 9,50 9,22 22,75 22,99 85
9,82 10,01 18,62 19,06 47,12 67,55 175
7,35 7,28 13,68 13,88 34,67 34,58 127
8,58 16,31 16,39 40,89 40,84 151
5,97 6.,33 11,53 12,06 29,52 30,06
5,14 5,11 9,81 9,75 24,02 24,30 89
8,91 9,30 17,25 17,73 43,82 44,19 163
15 я-Ацетилбензолсуль7,75 ,6%3 о-Бенэоли-. дисульфо11,10 4-Бифенил7.49 сульфонатС N О S 2-Мезитилен8.50 сульфонат 4 5-Сульфо7,99 салицилатС Н S 1,2-Этандисульфо10,31 натС р«, 3-Оксипропан8,79 СуЛЬфОНаТ 27 ff 6°2i 5 12,50 Цистеат с Н Н,О„, S 27 6 25 5 Хондроитин5р83S.«.a7N. сульфат Бенэолсуль9,34 фонат С Н, N, O,S ЗЭ 4-Г 6 -(4 4 п-Хлорбензолсульфо3,10 Сз эй бОп94се Нат 1-Нафталинсульфонат C,.., 8,03 2-Нафталинf ° С «Ф7 б - 4 4 7,83
676169
16
Продолжение табл. 1 7,9012,01 12,05 37,3137,54138 1,0816,76 16,90 52,7552,64194 7,6311,52 11,64 36,5036,25134 8,4112,67 12,82 40,1139,94147 7,9712,01 12,17 37,6837,90140 0,7820,03 20,55 50,$851,22.189 8,7516,55 16,70 41,3241,61153 3,0214,68 14,90 36,9237,12137 6,26 6,84 7,17 17,2117,8666 9,6214,22 14,67 45,1845,69169 8,6012,72 13,12 40,5340,87151 8,20 12,03 12,52 38,73 39,00144 8,20 11,95 12,52 38,5239,00144 25 Формула изобретения 1, Способ получения сульфонатов 8-аденозил-Ь-метионина общей формулы5АМ-{Н250д)х- RCSOjH),, где SAM - S аденоэил-Ь-метионин; , 1, 2; п 1, 2; , 1,5, 2, 3, 4, причем, если х О, п 1, 2, у 1, 5, 2, 3, 4; X 1, п 1,2, у 2; X 2, п 2, у 1, R - радикал сульфокислоты, выбранной из группы, содержащей метансульфокислоту, этансульфокислоту 1-н-додекансульфокислоту, 1-н-октадекансульфокислоту, 2-хлорэтансульфокислоту, 2-бромэтансульфокислоту, 2-оксиэтансульфокислоту 3-оксипропансульфокислоту, d-6,d-lO-камфор сульфокислоту, С ,d-C,d-3-бpc 4кaмфo -10-cyльфoкиcлoтy, цистеиновую, бенэолсульфокислоту, п-хлорбенэолсульфокислоту, 2-метилбензапсульфокислоту, 4-дифенилсульфокислоту, 1-нафталинсульфокислоту, 2-нафталин сульфокислоту, 5-сульфосапициловую, п-ацетилбензолсульфокислоту, 1,2-этандисульфокислот у, о-бензолдисульфокислоту, хондроитинсерную кис лоту, отличающийся тем, что к водному концентрированному раствору SAM добавляют насыщенный раст вор пикролоновой кислоты в воде или органическом растворителе, раствори мом в воде, полученный пикролонат п вергают взаимодействию с раствором сульфокислоты RSOjH, где R имеет Ь каэанные значения, или со смесью серной и упомянутой сульфокислоты с 9 лоследующим оса кленнем целевого продукта растворителем, смешивающимся с растворителем, используемым на стадии Образования сульфоната, 2.Способ по п.1, о т л и ч а ющ и и с я тем, что органический растворитель выбирают из группы, содержащей низшие одноатомные спирты, ацетон, метилэтилкетон, метилиэобутилкетон, этилацета1Т, тетрагидрофуран, 2-метоксиэтанол, 2-этоксиэтанол, диоксан, диметилформамид, 3.Способ по П.1, отлича ющ и и с я тем, что используют спиртовый раствор сульфокислоты. 4.Способ по П.1, отличающийся тем, что используют водный раствор сульфокислоты и серной кислоты в смеси с равным объемом органического растворителя, смешивающегося с водой, 5.Способ по П.1, отличающийся тем, что сульфонат осаждают добавлением органического растворителя, выбранного из группы, содержащей бензол, толуол, диэтиловый Эфир, диизопропиловый эфир, ацетон, метилэтилкетон, метилизобутилкетон, этилсщетат, метилацетат, тетрагидрофуран, хлороформ. 6.Способ по П.1, отличающийся тем, что двойную соль сульфокислоты и серной кислоты осаждают при добавлении низшего кетона или алканола, полностью смешивающегося с водой. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Ленинджер А. Биохимия, , 1974, с. 626.
