Способ определения биологической активности гормонов задней доли гипофиза Советский патент 1979 года по МПК C12K1/00 

1

Изобретение относится к области медицины, а именно к лекарственным препаратам,

Известен способ определения биологической активности гормонов задней доли гипофиза с использованием экспериментальных животных I. Однако известный способ является сложным (большое количество операций) и не обеспечивает высокой точности результатов, так как они зависят в значительной мере от индивидуальнойчувствительности организма подопытных животных.

Цель изобретения - упрощение способа .

Эта цель достигается тем, что исследуемый гормон смешивают с тесткультурой Bacillus subtiiis, смесь выдерживают при температуре 35-40 С в течение 5-15 мин, затем высевают на питательную среду и по величине антимикробной активности определяют биологическую активность гормона.

Пример . Проводят лабораторные испытания предлагаемого способа

стандартизации гормонов задней доли гипофиза. Ставят четыре опыта, в каждом из которых к 1 мл окситоцина (5 ед. стандартного образца) добавляют по 1 мл суспензии бактериальной тест-культуры сенной палочки (Bacillus subtiiis) выращенной на питательной.среде - мясо-пёптонном агаре (рН - 7,2) и оттитрованной по оптическому стандарту мутности. Смеси помещают в термостат и выдерживают при температуре 37 С в течение 1, 5, 10 и 15 мин. После этого осуществляют мерный высев смесей на чашки с питательной средой - мясо-пептонным агаром. Оценку биологической активности гормонов производят по их антимикробному эффекту следующим образом: через 24 ч ЭКСПОЗИЦИИ чашек в термостате при визуально определяют наличие проросших колоний тест-культуры- сенной, палочки.

25Результаты опытов приведены в таблице .

1 5

10 15

Разреженный рост

Как видно из таблицы, для оксйтоцина микробная нагрузка составляет 10 микробных единиц.. При этом при конт&кте бактериальной тест-культуры с окситоцином в течение 1 мин наблюдается сплопной рост колоний, 5 мин насчитывают 600-700 колоний, 10 мин 0-3 колоний, 15 мин - отсутствие колоний. Таким образом, оптимальное время контакта для этой микробной нагрузки (10 клеток) 10-15 мин. Для микробной нагрузки 10 клеток антимикробный эффект окситоцина выявляет ся через 5-10 мин контакта культуры с гормонсм.

Аналогичным способом определяют активность других гормонов згодней доли гипофиза - вазопрессина и питуитрина. Микробная нагрузка для них составляет 10 -Ю микробных единиц.

Использование предлагаемого способа определения биологической ак-. тивности гормонов задней доли гипофиза позволяет повысить точность стадартизации за счет использования тест-культуры, выращенной из одной бактериальной клотки, что дает возможность ИСКЛЮЧИТЬ разброс данных из-за различной чувствительности орО О

гаНизма подопытных животных к гормонам. Определение биологической-активности гормонов зёщней доли гипофиза по предлагаемому способу по сравнению с известным проще, так как способ имеет меньшее количество операций и позволяет исключить использование подопытных лабораторных животных.

Формула изобретения

Способ определения биологической активности гормонов задней доли гипофиза, отличающийс я тем, что, с целью упрощения способа, исследуемый гормон смешивают с тесткультурой Bacillus subtilis , смесь выдерживают при температуре 35-40 С в течение 5-15 мин, затем высевают на питательную среду и по величине антимикробной активности определяют биологическую активность гормона.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Авторское свидетельство СССР 331795, кл. А 61 К 17/06, 1974.