Способ профилактики гриппа Советский патент 1980 года по МПК A61K39/12 

(54) СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ГРИППА h

I

Изобретение относится к области медицины, а именно к вирусологии и может быть применено для профилактики гриппа в предэпидемический период.

Известен способ профилактики гриппа с помощью вакцины 1.

Однако известный способ не обеспечивает высокого противогриппозного иммунитета .

Цель изобретения - повышение противогриппозного иммунитета.

Цель достигается тем, что вводят подкожно инактивированную вакцину, а затем интраназально живую вакцину.

Были проведены клинико-иммунологические наблюдения на 55 волонтерах в клинике экспериментальной патологии и терапии острых респираторных инфекций. Экспериментальная часть работы выполнена на 250 белых мышах и 50 морских свинках.

Для первой прививки используют адсорбированную гриппозную химическую (АГХ) вакцину, приготовленную из штамма вируса гриппа А (Виктория /3/75 (H3N2). Прививку делают подкожно, вводя волонтерам по 0,5 мл вакцины и животным по 0,25 мл.

Получаемая волонтерами доза вакцины содержит 2500 ГЕ.

С целью выбора оптимального метода ревакцинации введение живой вакцины осуществляют двумя путями: интраназаль5 но и перорально. Для интраназального введения используют вирус гриппа А (Ленинград /323/76/20 (H3N2) с инфекционной активностью 7,2 ед. ЭЙД 50/0,2 мл, для перорального - вирус гриппа А (Ленинград /323/76/10 (H3N2) с инфекционной ак10 тивностью 7,5 ед. ЭЙД 50/0,2 мл.

Для ревакцинации морских свинок используют штамм А (Хабаровск /76/5 (H3N2) (инфекционная активность - 7,2 ед. ЭЙД 50/0,2 мл). Аттенуация вирусов для живой гриппозной вакцины проводилась в процессе их последовательного пассирования в развивающихся куриных эмбрионах, инкубированных при 33°С.

Антигенную активность вакцин оценивают в РТГА по общепринятой методике с

20 ингибиторорезистентным вирусом гриппа А (Виктория /3/75 (H3N2). Определение нейраминидазных антител проводят с помощью реакции ингибиции нейраминидазной активности. О приживаемости вируса гриппа в верхних дыхательных путях у волонтеров судили по выделению его из смывов, взятых из носовой полости, через 72 ч после введения вируса. Для определения уровня секреторных антител используют реакцию нейтрализации на хориоаллантеисной оболочке ХАО. Напряженность поствакцинального иммунитета у экспериментальных животных и волонтеров оценивали по разному. Белым мышам на 21 день после ревакцинации вводили интраназально по 0,1 мл вируса гриппа А (Виктория /35/72/15), прошедшего предварительно 15 пассажей через организм мышей (инфекционная активность 8,2 ед. ЭЙД 50/0,2 мл). На 3 сут. после инфицирования у животных определяли концентрацию вируса в легких путем титрования суспензии легочной ткани на 10-дневных куриных эмбрионах. Часть животных наблюдали на выживаемость в течение 12 дней после инфицирования. Проверку защищенности вакцинированных добровольцев проводили через 5 мес. после иммунизации. Волонтерам вводили интраназально по 0,5 мл малоаттенуированного вируса гриппа А (Ленинград/323/76/10, инфекционная активность 7,5 ед. ЭЙД 50/0,2 мл). Резистентность у волонтеров к экспериментальной гриппозной инфекции оценивали по развитию общих клинических реакций. Все лица, участвовавшие в наблюдении, проходили клинико-лабораторное обследование. Наблюдения на мышах. Результаты оценки иммуногенности вакцин в различных схемах их применения показали 4-8 кратный прирост гемагглютинирующих антител в сыворотках животных всех четырех (1-4) опытных группах наблюдений. При этом введении живой вакцины не изменило уровня антител у мышей ранее привитых АГХ-вакциной. Наиболее выраженная защита наблюдалась у животных 1,2 и 3 групп. Об этом свидетельствует снижение репродукции вируса гриппа в легких на 1,5-3,0 ед. (по сравнению с контролем) и полное отсутствие гибели животных при их инфицировании. Различия по всем указанным показателям с контрольной группой статистическидостоверны (Р 0,05). Наблюдения на морских свинках. При однократной иммунизации морских свинок АГХ-вакциной отмечен 76,0% сероконверсий при среднем геометрическом титре антител 1:39,0. Ревакцинация живым вирусом А (Хабаровск /76/5 увеличивала частоту сероконверсий на 20,0% и стимулировала дополнительный бткратиый прирост уровня гемагглютинирующих антител. Иммунизация морских свинок живым вирусом вызывала накопление секреторных антител у 40% привитых животных при повышении титра антител в носовых секретах с 1,0 до 4,3 (средние показатели). Наблюдения на волонтерах. Проведенное клинико-инструментальное исследование волонтеров биохимическое, гематологическое, ЭКГ рентгенологическое показало безвредность испытуемых вакцин. Прививка 1,2 и 3 групп волонтеров АГХ-вакциной сопровождаласть практически полной ареактогенностью данного препарата. Обш.ие и местные реакции II-III степе„„ отсутствовали. У 5 волонтеров через 12 24 ч после прививки на месте инъекции вакцины появилась гиперемия кожи раз.мером 1x1 см. Признаки воспаления проходили через 24-48 часов. У 6 волонтеров в первые 3 дня после вакцинации имело место кратковременное повышение температуры тела до 37,1-37,3° и у 2 - катаральные явления в виде легкого ринита. Введение АГХ-вакцины не сопровождалось формированием повышенной чувствительности привитых к гистамину. Интраназальная ревакцинация первой Г ™ вирусом гриппа А (Ленинград/32/76/20) вызвала легкие клинические реакции у 4 привитых. У волонтеРо вакцинированных перорально вирусом гриппа А (Ленинград /323f76/10), равно как И у получивших плацебо, клинических реакций не было. Интраназальное введение того же вируса гриппа А (Ленинград /323/76/20) лицам контрольной группы вызвало клинические реакции у 46,6% волонтеров, т. е. у 7 из 15 человек, среди которых выраженHbfe клинические реакции II степени тяжести наблюдались, у 4 привитых (26,6%). Для характеристики иммуногенности вак цин были оценены показатели накопления антител в сыворотке крови (частота сероконверсий и кратность прироста антител после введения каждой вакцины). Для характеристики иммуногенности вакцин были оценены показатели накопления антител в сыворотке крови (частота сероконверсий и кратность прироста антител после введения каждой вакцины). При однократной прививке волонтерам АГХ-вакцины отмечено 55,0-64,0% сероконверсий при кратности прироста антител 4,0-6,5. Интраназальное введение живого вируса увеличивало частоту сероконверсий до 70,0% и стимулировало дополнительный подъем уровня антител. Так, у волонтеров первой группы кратность прироста антител увеличивалась с 4,8 до 7,5. Пероральная ревакцинация живым вирусом не изменяла иммунологических показателей, полученных после введения АГХ-вакцины. У волонтеров 4 группы после 2-кратной интраназальной прививки умеренно реактогенным вирусом группа А(Лениград /323/76/20) уровень гуморальных антител был идентичным показателем, полученным в группах и 2. Приживаемость вирусов гриппа А (Ленинград /323/76/20) и (Ленинград /323/76/10) была одинаковой у лиц опытных и контрольной групп 63,1 и 66,6% соответственно).

Введение живого вируса стимулировало образование секреторных антител в 6 из 14 волонтеров, привитых интраназально, и у 2 из 7 - привитых перорально.

Исследование сывороток 10 волонтеров на нейраминидазные антитела выявило нарастание последних у 2 из 5 волонтеров 1 группы и у 4 из 5 привитых II группы.

Интраназальное введение штамма вируса гриппа А (Ленинград /323/76/10) через 5 мес. после вакцинации вызвало у волонтеров контрольной группы клинические реакции в 57,1°/о (т. е. у 8 из 14 человек среди которых 21,4% составили выраженные клинические реакции И-III степени тяжести). Ни у одного из 10 волонтеров ранее привитых по разработанной схеме не отмечалось даже слабых клинических реакций (Р -0,05).

Предложенный способ сочетающий применение инактивированной и живой вакцин

обеспечивает мобилизацию различных механизмов иммунной защиты и повыщение противогриппозного иммунитета.

Способ может быть использован для профилактики гриппа у лиц «повыщенного риска заражения (медицинские работники, педагоги, работники общественного транспорта, торговли, сотрудники милиции и т. д.), которым приходится работать во время эпидемии в условиях продолжительного, многократного и интенсивного инфицирования вирулентным вирусом гриппа.

Формула изобретения

Способ профилактики гриппа с помощью вакцины, отличающийся тем, что, с целью повыщения противогриппозного иммунитета, вводят подкожно инактивированную вакцину, а затем интраназально живую вакцину.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Авторское свидетельство СССР Ко 546132, кл. А 61 К 39/18, 1975.