Способ детектирования аминокислотпРи ХРОМАТОгРАфичЕСКОМ АНАлизЕ Советский патент 1981 года по МПК G01N31/08 

(54) СПОСОВ ДЕТЕКТИРОВАНИЯ АМИНОКИСЛОТ ПРИ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМ АНАЛИЗЕ

предложенного состава термически более стабилен, чем нингидриновый реагент известного состава. Использование предлагаемого реагента позволяет поднять температуру детектирования до 160-165с, причем в этих условиях реакция завершается з более короткое время (см. таблицу), что обеспечивает малый вклад размывания в реакторе в общее размывание хроматографической зоны и позволяет повысить чувствительность.

Из таблицы видно, что температура реакции 160-165 0 является оптимальной, так как при дальнейшем пот вышении температуры возрастает термодеструкция окрашенного продукта. С другой стороны в области рН 4,85,2 температура термодеструкции максимальна, а нингидриновый реаген отличается наибольшей стабильностью

Исследовалась реакция с нингидрином аминокислоты валин (концен- трация ) и иминокислоты проли (концентрация 10 М).

Реакция осуществлялась в проточном реакторе из фторопластового капилляра с внутренним диаметром 0,8 мм, на выходе которого находилось гидродинамическое сопротивление - капилляр 0,3 мм, длиной 3,5 м, - что достаточно для создания в реакторе давления 3 атм. Время реакции задавалось скоростью подачи реагентов в смеситель (1 мл/мин для раствора аминокислоты и для нингидри нового реактива) и изменением длины реактора (10 сек при 33,5 см 1,5 мин при 302 см и 15 мин при 3-10 см). Прореагировавшая смесь на выходе из реактора охлаждалась и направлялась в детектор-спектрофотометр с длиной кюветы 1 см, где измерялась разница оптических плотностей продукта реакции и разбавленного вдвое нингидринового реагента на

0 длине волны 570 нм для валина и 440 нм для пролина.

Изобретение позволяет ускорить . время завершения нингидриновой реакции и повысить чувствительность хроматографии аминокислот.