Способ определения липидного сос-TABA биОлОгичЕСКиХ жидКОСТЕй Советский патент 1981 года по МПК G01N33/92 

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛИПИДНОГО СОСТАВА БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЕЙ За 1-2. ч до начала хромотографии в банки наливают систему растворителей для разделения липидов в одной (гексан, эфир, ледяная уксусная кислота в соотношении 80:20:1,5) и фосфолипидов в другой (хлороформ,, метанол, вода в соотношении 65:25:4).Высота жидкости в банке не должна прерышать 0,5-0,. Липидный экстракт из цитратной кр ви растворяют в 0,2 мл гексана и по 0,05 наносят на пластины, отступая 1,5-2 см от нижнего и боковых краев. Интервалы между пробами 2 см; Из одной и той же пробы экстракт наносят на 2 пластины: для разделения липидов на одной и фосфолипидов на другой. После .нанесения проб пластины помещают в банки с системой растворителей. Высота подъема растворителей по. адсорбенту 10. см. Время хромотографирования липидов 20-25 мин, фосфалипидов 40-45 м По окончании хромотографирования пластины подсушивают при комнатной температуре под вытяжкой до полного испарения с адсорбента растворит ля и опрыскивают 2%-ным спиртовым раствором фосфорномолибденовой кислоты по 5 мл красителя на одну плас тину. Затем пластины помещают в сушильный шкаф на 10 мин при 90-95 С для проявления окраски. После охлаждения проводят коли- чественный анализ липидов путем прямой денситометрии или элюирования краски из пятен с последующей фотометрией окрашенных элюатов. П р и. м е р 2. В начале используют цитратную кровь для постановки РОЭ, а потом в этой же крови определяют ЛИПИДНЫЙ и фосфолипидный спектры. .. Для этого капиллярную пипетку на РОЭ промывают лимоннокислым натрием, затем набирают этот оаствор до метки Р и выдувают его в видалевскую пробирку. Тем же капилляром берут из пальца обследуемого 2 раза кровь до метки R , смешивают с лимоннокислым натрием в соотношении 4:1. Набирают в капилляр эту смесь до метки О и определяют РОЭ. По окончании определения РОЭ из капилляра выдувают содержимое обратно в видалевскую пробирку, берут отсюда 0,125 мл лимоннокислой крови (соответствует 0,1 мл Цельной крови) определяют в .ней липидный и фосфолипидный состав по примеру 1, т.е. к 0,125 мл цитратной крови прибавляют 10 мл экстрагирующей метанол-этаноловой смеси и далее по примеру 1. Сравнительные показатели способов количественного анализа липидов крови представлены в таблице.

Показатели, моль/л