ют из среды центрифугированием при 1000 об/мин, культуральную среду фильтруют через стерилизующие М1ик1ичорог, фильтры (размер пор 0,3 мкм).
Митогенную активность культуральных сред исследуют в тест-культурах свежих лимфоцитов. Лимфоциты тест-культур культивируют в исследуемой на активность среде, смешанной с равным объемом свежей питательной среды 199 и 10% термоинактивированной человеческой сыворотки, в присутствии антибиотиков и глютамина в указанной концентрации. Для инактивации остатков фитогемагглютипииа, содержащихся в исследуемых культуральных средах, в тест-культуры прибавляют 5%
синтез ДНК Н имп/мин в тест-культурах с митогенным фактором синтез ДНК. Н имп/мин в тест-культурах без митогенного фактора
Для получения сравнительных данныхрый не включает облучения клеток перед
параллельно проводят получение митоген-инкубацией.
ного фактора в культурах тех же лимфоид-20 В таблице приводится активность полуных клеток по известному способу, кото-ценного митогенного фактора.
Предлагаемый способ, доза облучения, Р
кроличьей аитисыворотки против фитогемагглютинина.
Синтез ДНК в тест-культурах исследуют по включению Н-тимидина, а радиоактивность клеток измеряют на спектрометре. Активность митогенного фактора выражают индексом стимуляции, который представляет собой отношение синтеза ДНК в тест-культурах с митогенным фактором к синтезу ДНК в тест-культурах без митогенного фактора, но содержащих 5% антисыворотки против фитогемагглютинииа и фитогемагглютинин в концентрации 10 мкг/мл (контроль на нейтрализацию фитогемагглютинина).
Таким образом, индекс стимуляции (ИС) равняется
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| Способ получения митогенного фактора | 1980 |
|
SU889001A1 |
| СПОСОБ РЕГИСТРАЦИИ ПРОЛИФЕРИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ЛИМФОЦИТОВ | 1991 |
|
RU2085948C1 |
| СПОСОБ КОНТРОЛЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ОБЛУЧЕНИЯ ДОНОРСКОЙ КРОВИ С ПОМОЩЬЮ РЕАКЦИИ АКТИВАЦИИ ЛИМФОЦИТОВ ФИТОГЕМАГГЛЮТИНИНОМ | 2015 |
|
RU2589281C1 |
| Способ оценки функционального состояния лимфоцитов | 1988 |
|
SU1635141A1 |
| Способ дифференциальной диагностики реактивного и ювенильного ревматоидного артрита у детей | 1989 |
|
SU1735783A1 |
| СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ ПАЦИЕНТОВ, ОБЛУЧЕННЫХ МАЛЫМИ ДОЗАМИ ИОНИЗИРУЮЩЕЙ РАДИАЦИИ | 2010 |
|
RU2430358C1 |
| СПОСОБ ИММУНОТЕРАПИИ ХРОНИЧЕСКОЙ ЧАСТО РЕЦИДИВИРУЮЩЕЙ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ | 2011 |
|
RU2485962C1 |
| СПОСОБ ОТБОРА ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ КОРРЕКЦИИ НАРУШЕНИЙ ИММУННОГО СТАТУСА ПРИ ОПУХОЛЕВОЙ БОЛЕЗНИ | 1992 |
|
RU2140081C1 |
| ИММУНОЦИТОХИМИЧЕСКИЙ СПОСОБ ОЦЕНКИ РЕАКЦИИ БЛАСТТРАНСФОРМАЦИИ ЛИМФОЦИТОВ (РБТЛ) ПРИ СТИМУЛЯЦИИ ИХ ФИТОГЕМАГГЛЮТИНИНОМ (ФГА) | 2012 |
|
RU2514039C2 |
| Способ определения областной трансформации лимфоцитов | 1990 |
|
SU1777085A1 |
Примечания. 1. Приведены средние арифметические и стандартные ошибки
средних 2. Число определений показателя везде 4.
Как видно из таблицы облучение клеток в рел{име 800 и 1600 Р приводит к увеличению активности фактора в 2-3 раза по сравнению с активностью фактора, полученного известным способом.
Получение высокоактивного фактора позволяет уменьшить затраты крови, идущей для получения фактора.
Формула изобретеиия
Способ получения митогенного фактора путем инкубации культуры лимфоцитов
человека с фитогемагглютинином с последующим отмыванием и культивированием лимфоцитов в питательной среде, отличающийся тем, что, с целью повышения активности целевого гфодукта, лимфоциты перед инкубацией облучают реитгеновскими лучами в дозе 800-1600 Р.
Источники информации, прииятые во внимание при экспертизе 1. Войтенок Н. Н. Проблемы гематологии, 1975, ЛСоЗ, с. 48.
