Штамм @ 79-продуцент бактериоцина а79 Советский патент 1982 года по МПК C12N1/10 C12P1/02 C12N1/00 C12R1/23 

вый красный 40 мг, обезжиренное молоко до 1 л). Створаживание и пожелтение среды на 2-3 сутки.

Молоко створаживает на 4-5 сутки.

Физиологические и биохимические особенности.

Факультативный анаэроб.

Оптимальный рост при 32-27°С.

Желатину не разжижает.

Нитраты и нитриты не восстанавливает.

Каталазу не образует.

Среда Гибсона и Абд-эль-Малека. Ферментируют глюкозу без образования газа.

Ферментирует целлобиозу, галактозу, мальтозу, сахарозу, маннозу, лактозу и салицин с образованием кислоты. Не расщепляет рамнозу, крахмал, сорбит и маннит.

Молоко. Через 14 суток содержание кислот достигает 0,58%.

Антагонистические свойства. Образует бактериоцин А79 на 1,5% агаровой и жидкой среде МРС-1.

Получение бактериоцина А79 с помощью предлагаемого штамма.

Пример 1. Получение бактериоцина А79 на 1,5%-ной агаровой среде МРС-1.

Суточную культуру L. acidophilus 79 засевают уколом на чащку с 1,5%-ной агаровой средой МПС-1 и выращивают 3 суток при 37°С в вакуум-эксикаторах, в которых воздух заменен углекислым газом. Выращенную макроколонию стерилизуют парами хлороформа, после чего поверхность среды заливают вторым слоем 4 мл 0,8%ной агаровой среды МРС-1, расплавленной и охлажденной до 46°С, смешанной с 0,5 мл 4-часовой индикаторной культуры L. 1асtis АТСС 800. После застывания среды посевы выращивают при 37°С в течение 2 суток. Вокруг микроколонии L. acidophilus 79 наблюдается прозрачная, с не совсем четким краем зона подавления роста индикаторного штамма 19 мм в диаметре.

П р и м е р 2. Получение бактериоцина А79 на жидкой среде МРС-1. Культуру L. acidophilus 79 засевают на жидкую среду МРС-1 и выращивают при 32°С 2 суток. Для стерилизации к культуре добавляют 10% хлороформа, перемешивают и выдерживают при 37°С в течение 30 мин, после чего жидкость отделяют от хлороформа и центрифугируют. Из надосадочной жидкости готовят двухкратные серийные разведения. По 1 петле каждого разведения наносят на поверхность чашки с 1,5%-ной агаровой средой МРС-1, засеянной 4-часовой индикаторной культурой L. lactis АТСС 800. После выращивания при 37°С в течение 2-х суток производят учет. Титр бактериоцина А79 на жидкой среде МРС-1 1:4.

Спектр действия бактериоцина А79. Подавляет рост ряда культур: L. acidophilus, L. helveticus, L. jugurti, L. fermenti, L. buchneri, L. lactis, L. salivarins, L. delbmesku, L. leichmanuu, L. cellobiosus и

L. easel, a также L. brevis. He ингиёирует

рост культур L. plantarum и L. viridescens.

Бактериоцин A79 инактивируется трипсином, химотрипсином, пепсином и папаином,

не разрушается дезоксирибонуклеазой, рибонуклеазой и лизоцимом. При автоклавировании при 15 атм частично разрушается

через 30 мин. Бактериоцин А79 не реплицируется на индикаторном штамме L. lactis, АТСС 800 и хорошо диффундирует в агар. Не диффундирует через целлофан.

По чувствительности к бактериоцину А79 (бактериоцинотипирование)культуры

L. acidophilus, L. helveticus, L. jugurti, L. fermenti, L. buchneri, L. lactis, L. salivarius, L. delbmesku, L. leichmanuu, L. cellobiosus, L. casei, a также L, brevis, подразделяются на 2 бактериоцинотипа: 1) - чувствительный к бактериоцину А79 и 2) - устойчивый к бактериоцину А79.

При бактериоцинотипировании 587 культур лактобацилл разных видов получены следующие результаты. Из 187 культур L. acidophiius, -135 культур относились к 1 бактериоцинотипу и 52 ко 2; из 65 культур L. salivarius 5 относились к 1 бактериоцинотипу и 60 ко второму; из 16 культур L. jugurti 15 относились к 1 бактериоцинотипу и 1 - ко 2; из 4 культур L. helveticus, 1 относилась к 1 бактериоцинотипу и 3 - ко 2; из 84 культур L. fermenti 36 относились к 1 бактериоцинотипу и 48 - ко 2; из 13 культур L. buchneri 3 относились к 1 бактериоцинотипу и 10 - ко 2; из 43 L. brevis 29 относились к 1 и 14 - ко. 2 бактериоцинотипу; из 2 культур L. leichmanuu 1 относилась к 1 бактериоцинотину и 1 - ко 2; из 144 культур L. casei 18

относились к 1 бактериоцинотипу и 126- ко 2 бактериодннотипу; 1 культура L. delbmesku, 2 культуры L. lactis, и 2 культуры L. cellobiosus относились к 1 бактериоцинотипу.

24 культуры L. plantarum и L. viridescens были устойчивыми к бактериоцину А79.

По способности продуцировать бак1ериоцин А79 (бактериоциногенотипирование)

культуры лактобацилл указанных выше видов подразделяются на 2 бактериоциногенотипа: 1 - продуцирующий бактериоцин А79 и 2 - не продуцирующий бактериоцин А79.

Предлагаемый штамм L. acidophilus. 79 по сравнению с известными обладает преимуществом-продуцирует бактериоцин А79, который активен против других видов лактобацилл, что может быть использовано

для бактериоцинотипирования и бактериоциногенотипирования не только культур Х. acidophilus, L. helveticus, L. jugurti, L. fermenti, L. buchueri, L. lactis, salivarins, L. delbruechu, L. leichmanuu, L. cellobiosus,

L. casei, но и культур L. brevis. 5б

Формула изобретенияИсточники информации, Штамм Lactobacillus acidophillus 79 -

продуцент бактериоцина А79 (хранится в1. Авторское свидетельство СССР

музее культур ВНИИ генетики и селекции 5 по заявке № 2685277/28-13, кл. С 12D 9/22, промышленных микроорганизмов под 1978. № ЦМПМ В-1909).

877927

принятые во внимание при экспертизе