1
Изобретение относится к медицине, 3 частности к получению диагностических препаратов, и может быть использовано в иммунологии и микробиологии.
Известен способ получения антительного диагностикума путем сенсибилизации эритроцитов иммунной сывороткой в присутствии связующего агента-Сг СК с последующей экспозицией и отмыванием эритроцитов РЗОднако известный способ не обеспечивает высокой чувствительности обнаружения специфических антигенов и требует использования концентрированных препаратов иммунных сывороток.
Целью изобретения является повышение чувствительности диагностикума.
Эта цель достигается тем, что способ получения антительного диагиостикума осуществляется путем сенсибилизации эритроцитов иммунной сывороткой в присутствии связующего агента с последующей экспозицией и отмыванием эритроцитов, в качестве связующего агента используют О ,-0 ,+ %-ный раствор амидола и сенсибилизацию эритроцитов проводят в течение 2030 мин при 50-55°С.
Смешивают 1 объем 20о-ной взвеси фиксированных эритроцитов,О,5 объема иммунной сыворотки (в соответствующем рабочем разведении) и 0,5 объема О,-0,44%-ного водного раствора амидола. Смесь выдерживают 20-30 мин при 50-55 С, затем эритроциты трижды отмывают не менее чем 20-кратным (по отношению к осадкам эритроцитов) объемом 0,85%-ного раствора МаСЙ, содержащего нормальную лошадиную или кроличью сыворотку (в разведении 1:150-200) или 0,06-0,08 желатины, рН 7,2.
Пример. Смешивают 2 мл взвеси эритроцитов, 1 мл иммунной брюшнотифозной сыворотки в разведении 1:iO и 1 мл свежеприготовленного водного 0,35:-ного раствора
амидола. Смесь встряхивают и выдержи вают 30 мин при 55С при периодичесчом встряхивании. Затем эритроциты трижды отмывают 0,85о-ным раствором NaCe, содержащим 0,06 желатины, рН 7,2 (по 8 мл на отмывание). К осадку отмытых сенсибилизированных эритроцитов добавляют 3 мл этого же растворителя и консервируют 0,1%-ным
890024
азидом натрия. Получают диаг-ностикум.
Предложенный диагностикум обладает высокой чувствительностью (см. S табл.),
Сравнительные данные по изучению чувствительности диагностикумов, изготовленных по предложенному способу и известному приведены в таблице.
П р и м е ч а н и е. 1. Сп.Аг. - Использование предложенного спосо ба обеспечивает высокую чувствительность обнаружения специфических возбудителей и антигенов и позволяет в 10-20 раз скоратить расход иммунной сыворотки. Спонтанная агглютинация эритроцитов. Минимальная выявляемая концентрация возбудителя (тыс. клеток/мл). Средний геометрический титр сыворотки, содер ; ащей поверхностный HBs-антиген гепатита В. Формула изобретения SS Способ получения антительного диагност икума путем сенсибилизации эритроцитов иммунной сывороткой в присутствии связующего агента с по5 8890024
следующей экспозицией и отмываниемИсточники информации,
эритроцитов, отличающийсяпринятые во внимание при экспертизе
тем, что, с целью повышения чувстви-1. Jandl J., Simmons R. The aggluтельности диагностикума, в качествеtination and sens tlsation of red
связующего агента используют 0,k-s cells by metallic cations Interaction
0,А4%-ный раствор амидола и сенсиби-beween multivalent metals and the red
лизацию эритроцитов проводят в тече-cell membrane. Brit. J. Haematol.,
ние 20-30 мин при 50-55°C. 1957, v. 3, fT 1 , 19.
