Способ приготовления препаратов зародышевых мешков Советский патент 1982 года по МПК A01G7/00 

СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ ЗАРОДЬШЕВЫХ

(54)

Изобретение относится к цитологии, преимущественно цитоэмбриологии растений, и может быть использовано для оценки состояния ;кенской генеративной сферы в работах по селекции-и генетике растений.

Известен способ приготовления препаратов зародышевых мешков из семяпочек, подвергнутых длительной мацерации 1.

Известен также способ ускоренного приготовления препара:тов зародышевых мешков, в котором извлечение, зародышевых мешков Производится из сохраняющих семяпочек, подвергнутых кратковременной мацерации различными веществами, извлечение проводится Йа стереоскопических микроскопах микрОигйамк 2.

Недостатком известного способа является то, что довольно много времени тратится-йа очистку зародышевых мешков от окружайщих тканей семяпочки.;Это обусловлено тем, что длительность обработки завязки и семяпочек ограничена необходимостью сохранения целостности последних, поскольку иначе их перемешение становится затруднительным. МЕШКОВ

И

-2 Л .

. ч:

Цель изобретения - ускорение процедуры приготовления зародышевых мешков при сохранении возможности дробного исследования материала (исследования малых выборок зародышевых мешков любог объекта).

Поставленная цель достигается тем, что семяпочки в мацерирующем растворе помещают в углубления на пластинах, которые имеют три отвесные стороны и наклонный желоб с четвертой стороной, причем дно углубления

10 и дно желоба закругленные и вьздерживают семяпочки до полной мацерации межклетных пластинок семяпочек.

В предлагаемом способе обработке семяпочек время мацерации резко увеличивается до

15 пределов, при которых межклетные пластинки полно1стью разрушаются и семяпочки теряют . целостность. Сохранение возможности дробного исследования материала достигается благодаря тому, что Соответствующие выборки семя20почек (из одной завязи, одного цветка, одного колоса и t.n.) помещаются для мацерации в пронумерованн1ь1е углубления на пласгкнках (оргстекла, форфора и т.п.), объем

которых примерно в два раза больше объема семяпочек. Эти углубления имеют закруглен,ное дно, С трех сторон стенки углубления отвесные,, а с четвертой - в виде наклонного ( 45°) желоба (с кругленным дном). Такая форма углубления необходима, чтобы силы поверхностного наТяження и адгезии не препятствовали полному отбору содержимого, который осуществляется пипеткой с капиллярным концом через наклонную его сторону. Диаметры капилляров пипетки и объемы углублений зависят от спецификации объектов.

Пластинки с углублениями во время мацерации помещают во влажную камеру, например чашку Петри, на дно которой наливают воду, а на крышку наклеивают влажную фильтровальную бумагу. По достижении предельно сильной мацерации тканей семяпочек мацирирующий недостаточный раствор отсасывают, а осадок поднимают со дна порцией воды при

помощи пипетки и переносят на предметное стекло на край лунки, которая также заполнена водой. Далее при необходимом увеличении стереоскопического микроскопа проводят отделение зародышевых мешков от остатков тканей семяпочек и сбор их в чистой зоне лунки предметного стекла. Перенос готовых мешков производят пипеткой с более тонким капилляром, а дальнейшие процедуры с ними .зависят от характера обработки, предшествовавшей мацерации, а также от того, какой метод избран для их последующего исследования.

Пример. Оценку эффективности и скорости приготовления препаратов зародышевых мешков кукурузы, люцерны посевной и борца круглолистного проводят двумя способами. В качестве фермента всюду используют цитазу. Полученные данные сведены в- таблицу. о го -

919636

о о

СП о

О

о

V-I

:) Л

ГЧ о

Л

и m р)

п .

X

Си

,

X

я 8 я

л rf э с

+ -I- +

К :

а

f9 U

еа

g

4) О.

я «

2 о. 5 а CQ

ii Как видно из таблицы, предлагаемый способ, обладая высокой аналитической способностью, значительно превосходит известный по скорости приготовления препаратов, качеству извлекаемых 3apd a meBbtx мешков и универсальности Применения. Формула изобретай и я Способ приготовления препаратов зародышевых мешков, включающий маце4 а1щю и диссек цию семяпочек, отличающийся тем, что, с целью ускорения процесса при сохранении возможности дробного исследования, семяпочки в мацернрующем растворе помещают . 9 .8 в углубления на пластинах, которые имеют три отвесные стороны н наклонный желоб . с четвертой, стороной, причем дао углубления и дно желоба закругленные и выдерживают до.максимальной мацерации межклетных пластинок семяпочек. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1.Хохлов С. С. и др. Выявление апомиктичных форм растений в6 флоре СССР. Саратов, 1978, «. 159. 2.Еналеева Н. X. Возможности и перспективы ферментативной мацерации в змбриЬлогических исследованиях покрытосемянных растений. Автореф. канд. дис. Кишинев, 1979 (прототип).