Синтетическая питательная среда для выращивания бруцелл Советский патент 1982 года по МПК C12N1/20 

(54) СИНТЕТИЧЕСКАЯ ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ БРУНЕЛЛ

Изобретение относится к микробиологи и может быть использовано в научноисследовательской работе, в частности ОЛЯ изучения питательных потребностей, обменных процессов у бруцелл, в генетических исслецованиях. Известна синтетическая питательная среда для выращивания бруцелл, содержащая агар, источник углерода - глюкозу, нитрат натрия, аминокислоты - Db -аланйн,Ь -глутаминовую кислоту, L -цистеин,Л).1 -метионин, Ц -лизин, L -гистидин, витамины - тиамин, никотиновую кислоту, рибо(|шавин, пиридоксин, минеральные соли калий фосфорнокислый однозамещенны, калий фосфорнокислый двузамещенный, соль М 1гния, сернокислый аммоний и воду IJ. Однако на известной среде растут бруцеллы лишь трех видов -Bi-uce fa m&2 .B roceEEa abortus ,BvuceEt« suis Целью изобретения является повышение ростовых свойств среды. Цель достигается тем, что синтетичес кая питательная среда для выращивания бруцелл, содержащая агар, И(::гочник углерода, аминокислоты, витамины, минеральные соли и воду, в качестве источника углерода содержит натрий пировинограднокислый, в качестве аминокислот - L -метионин и L -аспарагин, в качестве витаминов - никотиновую кислоту, кальций пантотенат и биотин, в качестве минеральных солей - калий фосфорнокислый однозамещенный, натрий хлористый, натрий сернистокислый и аммоний хлористый при следующем количественном соотношении компонентов, г/л Агар14,0-16,0 Натрий пировинограднокислый0,9-1,1 L-Метионин0,02-0,03 L-АспарагинО,О9-0,11 Никотиновая кислота 1,5-2,5.10 Кальций пантотенат1,5-2,5.10 Биотин0,5-1,5.10 Калий фосфорнокислый оанозамещенный2,5-2,9 Натрий хлористый7,3-7,7

Натрий сернистокиспый 0,09-0,11 Аммоний хлористый0,9-1,1

Готовят среду следующего состава, г/л: агар Дифко 15,0; хдорибтый натрий 7,5; фосфорнокислый калий оаноэамещенный 2,7; сернистокислый натрий ОД; хлористый аммоний 1,О; пировинограонокнс- лый натрий 1,О; Ц-метионин О,025; - -аспарагин 0,10, а также, мг: никотиновая кислота 0,2, пантогенат кальция 0,2; биотин О,ООО1 и воца пистиллированная - остальное. Срепу нагревают цо полного расплавления арага, аовоаят рН ао 6,8 и, стерилизуют на вопяной бане при ЗО мин. Готсдаую срецу рааливают в стерильные чашки Петри по ЗОмл После застывания и поцсушивания срецу ; используют в течение 7-15 дней при условии ее хранения в холодильнике.

Испытуемые культуры бруцелл выращивают на глюкозоглицериновом агаре Мартена, рН 6,8, при в течение 48 ч. На пластинки агара засевают взвесь бруцелл густотой 10 микробов по оптическому стандарту мутности ГИКС при помощи репликатора с диаметром штырьков 4 мм. |Пгсевная доза при этом

около 2.1 О. Посевы выдерживают в термостате при . Учет роста производят дважаы: через 5 и 1О сут визуально в крестах.

Всего изучено 32 штамма бруцелл, среди которых 4 -Brucetto meti-bevtsis, 6-BV .otoor-ius, 8 -Bnicetta suis , .romg«t eH , 1 - Br. heotpntoe, 2 - Bv-ovie , 1 - B -ucetEd c..

В таблице приведены данные роста бруцелл разных видов на питательной среде.

Результаты испытания ростовых качеств среды показывают, что на предлагаемой среде растут все испытанные штаммы бруцелл разных видов (см. таблицу).

Предлагаемая среда для возбудителя бруцеллeaaj cодержит 4eньшe число ингредиентов и в меньших количествах, чем известных видов.

Среда позволяет при одинаковых ростовых условиях научать-влияние различных дополнительных компонентов (мутагены, антибиотики и т.д.) на биологические свойства, в частности на питательные потребности, бруцелл разных видов.

9337О2.6

Проаопжение таблицы