Способ получения гемолизина Советский патент 1982 года по МПК A61K38/02 

() СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЕМОЛИЗИНА

Изобретение относится к медицине, а именно к способам получения природных физиологически активных белков и пектидов, в частности к способу получения анемонотоксина, обладающего гемолитической активностью. Известен способ получения гемолизи на из актинии Stoichactis helianthus, включающий гомогенизацию цельных акти ний, экстракцию в дистиллированной воде, последующую очистку центрифугированием, гельфильтрацию на сефадексе Г-75 и ионообменную хроматографию на карбоксиметилцеллюлозе 1. Однако этот способ не обеспечивает выхода целевого продукта достаточной чистоты (содержится в качестве примеси три минорных белка ) и высокой удельной активности (8800 ГЕ/мг). Сырьевая база для получения гемолизина ограничена. Цель изобретения - повышение удель ной активности целевого продукта, его чистоты и расширение сырьевой базы. Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получения гемолизина из морских актиний, включающему их гомогенизацию, экстракцию дистиллированной водой, последующую очистку центрифугированием и ионообменной хроматогра(1)ией на КМ-целлюлозе, в качестве источника сырья используют актинию Horrostichantus duerdemi и после центрифугирования проводят очистку на политетрафторэтилене. Пример. 1 кг актиний Нотоstichantus duerdemi, свежевыловленных или хранящихся в замороженном состоянии при , гомогенизируют (1000 об/мин, 5 мин) при соотношении ткань: вода равном 1:3, экстрагируют в течение 12 ч при 4°С, затем центрифугируют при 20000 д в течёТйие 1 ч. Прозрачный раствор 1,5л (115 мг/мл белка по Лоури) концентрируют лио())илизацией до 0,5 и наносят на колонку (3,5 X 100 см) с политетрафторэтиленом (полихром 1), урав