Способ получения гиалуроновой кислоты Советский патент 1982 года по МПК C08B37/08 A61K35/44 

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИАЛУТОНОВОЙ КИСЛОТЫ

1

Изобретение относится к бнохнмин, а именно к способам получения полисахаридов.

Известен способ получения гиалуроновой кислоты, заключающийся в том, что пуповину человека, отмытую от крови, обезвоживают Н обезжиривают ацетоном, затем измельчают на мясорубке.

Полученный порошок заливают водой, размешивают и центрифугируют. К надосадочной жидкости приливают ацетон, гиалурнновая кислота вьшадает в осадок, который собирают и сушат. Данная обработка Дает выход 6%-ной гналуроновой кислоты с относительной вязкостью 1%-ного раствора 3,0 1.

Недостатком указанного способа является малый выход вещества и его относнтельно низкая вязкость.

Цель нзобретения - повышение выхода целевого продукта и вязкости получаемых из него растворов.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получения гиалуроновой кислрты, заключающемуся в нзмельченин пуповины

человека, ее обезвоживании, обезжиривании, последующей обработке дастнллированной водой, центрифугировании и выделении целевого продукта, после обработки сырья .водой полученную- смесь выдерживают на холоде, гомогенизируют и гомогенат нагревают на кипящей водяной бане в течение 5-15 мин.

Способ осуществляется следующим образом.

Предварительно проводят обработку пуповины человека в следующей последовательности, пупочные канатики разрезают на кусочки длн ной 10-15 мм и промывают от крови 4 мни (промывают в течение не более 5 мин). Затем кусочки пуповины помещают в холод ный ацетон до приобретения ими твердой консистенции,после чего сушат под вакуумом до постоянного веса. Далее получают гиалуроновую кислоту по следующей методике. 2 г высушенных кусочков пуповищ) заливают 200 мл дистнллированной воды и оставляют на 10 ч в холодильннке до набухания пупочных канатиков. Пупочные канатнки гомогенизируют на гомогенизаторе (MPW-302) два 395 раза jfio Ш мин. Затем нагревают в кипящей водя1К й бане 10 мин. Далее охлаждают и центрифугируют 15 мин при 6000 об/мин. К надосадошой- жидкости прибавляют абсолютный ацетон в соотношении 1:4. После выладения осадка ацетон сливают, осадок промывают три раза абсолютным ацетоном по 30 мл и сушат под вакуумом до постоянного веса. Из 2 г пупочных канатиков получают 280 мг осадка. Этот осадок содержит не только гиалу роновую кислоту, но и белок, количество которого определяют по Лоури. Масса безбелкового осадка, т.е. гиалуроновой кислоты, составляет 205 мг. Таким образом, из 2000 м поповины получают 205 мг продукта, что составляет 10,2%. Предлагаемый способ получения гиалуроновой кислоты дает выход 10-11% и относитель ную вязкость 0,25% раствора, равную 3,0, т.е. выход продукта увеличивается по .сравнению с известным на 4-5%, а вязкость гиалуроноВОЙ кислоты, полученной предлагаемым способом, возрастает в 4 раза. Формула изобретения Способ получения гиалуроиовой кислоты, заключающийся в измельчении пуповины человека, ее обезвоживании, обезжиривании, .последующей обработке дистиллированной водой, центрифугировании и вьщелении целевого продукта, отличающийся teM, что, с целью повышений выхода целевого продукта и вязкости получаемых из него растворов, после обработки сырья водой, полученную смесь выдерживают на холоде, гомогенизируют и гомогенат нагревают на кипящей водяной бане в течение 5-15 мин. Источники информации, принятые во внимание при зкспертизе 1. Асатиани В. С. Ферментные методы анализа. М., Наука, 1969, с. 566.