Способ очистки L-пролина Советский патент 1982 года по МПК C07D209/18 A61K31/401 

Изобретение относится к новому способу очистки L-пролива, который широко применяется в органической химии, молекулярной биологии, экспериментальной медицине и пищевой промышленности. Известен способ очистки L-пролина от сопутствуквдих аминокислот селективньпи осаждением пролина в виде рейнеката, пикрата, роданилата с последующим расщеплением образовавшихся солей и перекристаллизацией L-прблина из спиртовоэфирного раствора. Выходы составляют 1-9,5% в пересчете на исходное количество желатина . Известен также способ выделения L-пролина из смеси с другими аминокислотами путем последующего дезами нирования, восстановительного расщепления, обессоливания на катионит и кристаллизации из этанола. Выход 60-70% хроматографически однородног L-пролина. Способ предназначен для выделения L-пролина из культураль.ной жидкости бактериального синтеза Недостатками обоих способов явля ется сложность проведения процесса и невысокий выход целевых продукто в Наиболее близким к предложенному является способ очистки L-пролина/ пригодного для применения в качестве пищевой добавки. Очистка пролина осуществляется в многостгщийном процессе при помощи хлорэндоновой кислоты - 1,4,5,6,7,7-гексахлорбицикло-(2,2,1)-5-гептен-2,3-дикарбоновой кислоты. Хлорэндоновая кислота образует с проливом нерастворимую в воде соль, что дает возможность отделить L-пролин от conyTCTBj KJiUHx органических соединений, в том числе и от других аминокислот. Полученную соль разлагают и выделяют целевой продукт перекристаллизацией из спирта. Выход - 76-82% f 3. L-пролин (фирма Ajinoiftotoj выпускается со следующими показателями качества, %: Основное 98-100 вещество Удельное вращение (d. 84,5-36,0 4, Хлориды и 0,02 аммиак Свинец и 0,001 железо

Однако известный способ не обес почивает достаточную чистоту конечкого продукта, продукт загрязнен хлоридными ионами, так как в процессе применяется соляная кислота.

Недостаткс1ми являются тг1кже многчэстадийность технологического процесса (5 стадий) и использование агрессивных и ядовитых реагентов: соляной кислоты, пиридина, хлорэндоновой кислоты.

Цель Изобретения - упрощение процесса, повышение степени чистоты и выхода целевого продукта.

Указанная цель достигается тем, что согласно способу очистки L-npoлина, Ь-прол1-н растворяют в смеси водьа и этилового спирта при весовых соотношениях L-пролин;вода:этиловый спирт 1:(О,2-1,7 :3-7), добавляют активированный уголь и выделяют L-пралин добавлением ацетона при весовом соотнесении водно-спиртового раствора L-пролина и ацетона 1:(0,6-1,5)при температуре 18-20С с последующим охлаждением.

Положительный эффект предложенного способа очистки L-пролина заклчается в упрощении процесса- (2 стадии вместо 5-ти) и повышении степени чистоты (меньшее содержание хлоридов и аммиака) и выхода (89% и 76-82% соответственно) целевого продукта.

Пример 1. В 350 МП растворителя, состоящего из 21 NVI воды и 329 мл этилового спирта, предварительно подогретого до 45°С, растворяют при перемешивании 100 г L-пролина (содержащего 2-6% органических и неорганических примесей). После растворения L-пролина добавляют 8 г активированного угля и выдерживают 10, мин при 45с. -Горячий раствор фильтруют, фильтрат охлаждают до. 18-20°С 20-30 .мин, после чего добавляют 20 мл ацетона, и выдерживают при 6 ч. Выпавший осадок отфильтровывают и получают 89,7 г (89,7%) L-пролина.

Чистота: содержание основного продукта - 99,5%. Хроматографически однородный продукт. Удельное вращение (ot) (, 5 1 н. НС1) - 51,5.

Содержание неорганических солей (хлоридов, сульфатов, железа, свинца, аммиачных солей) -.0,01-0,0005%

При мер 2. В 400 мл растворителя, состоящего из 24 мл воды и 376 мл этилового спирта, подогретого до 40 с, растворяют 100 г L-пролина, содержащего 2-4% органических и неорганических примесей. После растворения L-пролина добавляют 10 активированного угля и выдерживают 5 мин при 40С. Осветленный раствор отфильтровывают и охлаждают до ,1.f С

20 мин. Добавляют 380мл ацетона и выдерживают йри 20 ч. Выход L -пролина - 89,5 г (89,5%). .,

Чистота: содержание основного вещества - 99,0%. Хроматографически

5 однородный продукт. Удельное вращение (, 5 1н. НС1) - 51. Содер- жание неорганических солей (хлоридов, сульфатов, железа, свинца, аммиачных солей) - 0.01-0.0005%.

0 ...

Пример 3. В 100 мл растворителя, содержащего17,3 мл воцы и 82,7 мл этилового спирта, подог етого до , при перемешивании рас5 творяют 20 г L-пролина, содержащего органические и неорганические примеси (2-8%) ..После растворения L-пролина добавляют 0,5 г активированного угля и выдерживают 10 мин при температуре не более . Горячий раствор фильтруют, охлаждают 1Q мин --..до -18с и добавляют 100 мл ацетона. йлдерхсивают смесь при 10 ч. Оса-доК отфильтровывают. Выход - 17,3 г

5 (89%).

Чистота:содержание основного . вещества 99,7%. Хроматографически однородный продукт. Удельное враще.ние((,5 1 н.не) - 52,4. Со.держание неорганических солей (хлоридов, сульфатов, железа, свинца, солей аммония ) - 0,01 0,0005%.

I.

5 Технико-экономический эффект предложенного способа заключается в получении L-пролина высокой степени чистоты (содержание основного вещества - 99,5-100%, удельное вращение(а ) ,5 1н.НС1) - 49,5-52,5, содержание неорганических солей (хлоридов, сульфатов, железо, свинец, аммиачных солей) -0,010,0005%, Хроматографически однородный продукт, с выходом 89% при значительном упрощении процесса.

Формула изобретения

Способ очистки L-пролина, содержащего органические и неорганические примеси, отличающийс я тем, что, с целью упрощения.процесса и повышения степени чистоты

и выхода целевого продукта, L-пролин растворяют в смеси воды и этилового спирта при весовых соотношениях L-пролина, воды и этилового спирта 1:(О,2-1,7):(3-7), добавляют активированный уголь и выделяют L-ПE)aпин добавлением ацетона при весовом соотношении водно-спиртового раствора L-пролина и ацетона 1:СО,6-1,5) при температуре 18-20 С с посяедующим охлаждением.

5960163в

Источники информации,from protein hydrolysates. - Farmaпринятыв во. внимание при экспертизе cja Polska,(1970), 8,647.

1, Gajewska М. Review and evalua- 639862, кл. С 07 С 99/02, 30.12.78. tion of the most irapoftant methods of . 3, Патент США №3598838, isolating proline and hydroxyproline- кл.260-326.3, 1971 (прототип).

2. Авторское свидетельство СССР