Способ заполнения капиллярных кювет градиентными гелями и устройство для его реализации Советский патент 1982 года по МПК G01N27/26 

-1

Изобретение относится к технике электрофореза, точнее к способу заполнения капиллярных кювет градиентныАш гелями и устройству для осуществления способа, и может быть использовано в биологин н медицине.

Извести способ заполнения капилляров градиентными гелями путем засасьшания раствора в капилляр. При этом используется устройство, состоящее из смесителя и трубки, на выходе которой устанавливается заполняемый раствором капилляр. Объем и крутизна градиента определяются соотношением скоростей засасывания в капилляр и выте- . кания раствора из смесителя {t.

Однако способ и используемое устройство не позволяют производить одновременное заполнение нескольких кювет.

Наиболее близким Техническим решением является способ заполнения капиллярных кювет градиентными гелями путем подачи раствора геля с возрастающей плотностью в нижнюю часть приемной камеры, сообщающейся с вертикально установленными в ней кюветами. При этом используется устройство,,.

содержащее приемную камеру с (расположен-, ным в ней держателем кювет, образующим внутреннюю полость приемной камеры, и смеситель, соединенньш с нижней частью приемной камеры (2,

Однако способ и используемое устройство отличаются недостаточно хорошей воспроиз- водимоаш дтты геля и формы градиента в. нем, особенно при приготовлёйии гелей с

10 крутым градиентом плотносТй. Недостатки вызываются неуравновёшёяностыб гищхктатиЧеского давления раствора геля в полости приемной камеры и капиллярных кюветах, вследствие которого посл« отключения смеси)j теля происходит медленный переток раствора геля из полости приемной камеры в .: капиш1Я1Шые кюветы. Так как время полимеризации раствора геля соизмеримо с временем выравнивания уровией раствора в ука20 занных сосудах, то наложение двух этих процессов приводит к указанным недостаткам. Воспройзводамость заполнения кювет ухудшается также от того, что для заполнения кювет на ту или другу и длину каждый, роз прнходится перестраивать режим работы смесителя и регулировать о&ьем закачиваемого в приемную камеру раствора. llejibt изобретения - повышение воспроизводимости параметров геля. Цель дост1р-ается тем, что согласно способу заполнения капипляриьш кювет градиентиыми гелями путем подачи раствора геля с возрастающей плотностью в нижнюю часть приемной камеры, сообщающейся с вертикально установленными в ней кюветами, подачу раствора геля проводят при уравновешенном гидростатическом давлении раствора геля в капиллярных кюветах и приемной KaMiepe, при этом измеряют велич1р1у устано вившегося давления в конце подачи раствор геля и поддерживают ее постоянной до окон чания его полимеризации. Для реализации способа используют устр ство для заполнения капиллярных кювет градиентными гелями, содержащее приемну камеру с- расположенными в ней держателем кювет, образующим внутреннюю полость приемной камеры, и смеситель, соединенный С нижней частью приемной камеры, в которое дополнительно введен элемент, герметизирующий в верхней части приемную камеру, и капиллярные кюветы, регулируемая пневмОемкость и редуктор давления с мано метром, соединенные с внутренней полостью приемной камеры в ее верхней части при этом объем регулируемой пневмоемкости рассчитывают по формуле где V - объем регулируемой Пневмоемкост Vp - обьем раствора геля, закачиваемог в приемную камеру; V - объем воздуха в приемной камере соединительных трубках и маномет ре; L - длина капиллярной кюветы; I - длина геля. С помощью герметизирующего элемента уравновешивается гидростатическое давление раствора теля в приемной ка:мере и капиллярных кюветах и исключается его переток между ними. Регулируемая пйевмоемкость позволяет заполнять капиллярные кюветы На различную длину без изменения каждый раз объема геля. Поступающего из смесителя. Манометр и редуктор давления позволяют поддерживать установившееся в конце подачи раствора геля давление постоянным до окончания полимеризации раствора геля, предотвращая Искажение границы геля в (капилляриой кювете и уменьшение его длины вследствие усадки геля в приемной камере. На чертеже схематично показано устройство дпя заполнения капиллярных кювет градиентными гелями. Устройство состоит из приемной камеры 1, с крь1Шкой 2 и прокладкой 3, которые вместе составляют герметизирующий элемент, капиллярных кювет 4, держателя кювет 5, регулируемой пневмоемкости 6, пневматически связанной с внутренней полостью приёмной камеры в ее верхней части, кранов 7, 8, смесителя 9, манометра 10 и редуктора давления П.. Способ заполнения кювет градиентными Гелями осуществляют С помощью устройства следующим образом. В приемную камеру 1, сняв крышку 2 и прокладку 3, устанавливают капиллярные кюветы 4, фиксируя их в вертикальном положении держателем кювет 5, после чего . камера и кюветы герметизируются в верхней части с помощью крышки 2 и прокладки 3. В соответствии с требуемой длиной геля в кюветах 4 устанавливается объем регулируемой пневмоемкости 6. Закрывается Кран 7, кран 8 оставляется открытым. После этого включается подача раствора геля от смесителя 9.После окончания подачи раствора кран 8 закрывается, открывается кран 7 и с помощью редуктора давления 11 по манометру 10 устанавливается давление, соответствующее давлению в приемной камере 1 и связанной с ней регулируемой пневмоемкЬсти 6 в момент окончания подачи раствора геля, после чего открывается кран 8, приемная камера 1 и регулируемая пневмоемкость 6 оказывается связанными с редуктором давления И, с помощью которого давление в системе поддерживается неизменным до окончания полимеризации геля.. Применение данного способа и устройства позволит повысить воспроизводимость лабораторных экспериментов, что значительно сократит время их проведения вследствие уменьшения количества контрольных опытов. Возможность получения коротких гелей с крутым градиентом, которая обеспечивается по данному . способу, позволит существенно уменьшить количество Исходного материала для электрофоретического анализа. , Формула изобретения 1. Способ заполнения капиллярных кювет градиентными гелями .путем : подачи раствора геля с возрастающей плотностью в нижнюю часть приемной камеры, сообщающейся с вертикально установленными в ней кюветами, о т л и ч а ю щ и и с я