Способ получения витамина В12 Советский патент 1954 года по МПК A61K31/714 

Предметом кзсбретемия является способ получения витамина Bi:- из отходов промьпиленпостп антибиотиков.

Г1редла|-аемый способ позволяет иолучат кристаллический витамин В12 в виде чистого химического ироду кта с выходом выше 50% от количества витамина в исходном продукте.

Сыр1,ем для иолучения витам1П1а BiL по предлагаемому способу являются отходы аитибиотической иромып.1леппости в виде мицелия илесиевых грибов иJтaммoв 2. 58 и 99. содержаилих от 500 до ВООО и более микрограмм витамина на 1 кг сухих веихеств .мицелия, а также отработаниые культуральиые жидкости от указаппых и таммов грибов.

Для выиолиеиия сгюсоба мицел1и 1 разбавляется 2,5-кратным количесгвом воды, нейтрализуется соляной кислотой до рН-6 (при использовапин мицелия № 99 нейтрализация не требуется), затем иагревается при перемешиваиип до температуры 80-

90 и после выдерживания при этой температуре в течение 30 мин. в горячем виде фильтруется. Отфильтрованный мицелий отбрасывается, а ерильтрат поступает на адсорбцию.

Из полученного фильтрата, а также отработанных культуральны.х сред витамин Ви- адсорбцируется активироваины.м норошкообразным древесным углем, взятым в каппчестве от 0,5 до ) в зависимости от содержания витампиа и состава культзфальиых сред.

Затем уголь отфи.тьтровывается, промывается холодгюй водой и поступает па десорбцию.

Десорбция витамина Bii с угля производится 10-кратным от веса влажного угля количеством 65%иого горячего сппрта, и получениьп элюат упаривается иод вакуумом при температуре не выше 40-50 до 1/6 объема, бтогпаниый спирт поступает на регенерацию, а сгущепный экстракт на повторные адсорбции, десорбцию сипртом и сгущение элюата.

Сгущенный элюат для дальнейшей очистки обрабатывается хлоро(jjcpMOM и затем прибавлеииед смеси фенола н хлороформа переводится в фенол-хлороформную смесь.

Полученная фенол-хлороформная смесь промывается водой и упаривается в вакууме при температуре около 20 до удаления осиовиой ча.сти хлороформа, после чего к сгущеииОМу раствору немедленно добавляется 7-кратный объем серного э(|)нра н вода. Витамин нзв.шкается в водный раствор взбалтыванием, после чего водный слой отделяется.

Водный раствор витамина Bi-- .тлл удаления остатков фенола промывается равными объе.мами серного эфира, после чего сгущается под пакуумом нри температуре не 1ГоПие 30-35до 1/5 объема.

Сгун1,ен11ый водньн раствор сптгь мина очищается от примесей путем пропускания через колонку с гидроOKi-rcbK) а.иомииия, после чего oncjiaнии очистки с переводом витамина Bi2 в феиол-хлорофн)рмпу1о смесь повторяются.

Конечная очистка нроизводится путем двукратного осаждения витамина Bi2 из водно-ацетоновогО раствора с получением кристаллическоп; нродукта.

Выход продукта составляет 50% и вьние от количества внтамн)1а Bi; в сходном сырье.

Пред м е т и з о б р е т е и и я

1.Снособ получения витамина В:; из отходов нромышленности анти6noTiiKOB, о тлн чающийся тем, что в качестве сырья используется мицелий плесневых грибов щтаммов 2, 58 и 99.

2.Прием выполнения снособа /ю н. 1, о т л н ч а ю щ и и с я совокупиым н гтоследователгзпым применением адсорбции выделещюго из мицелия витамина Bis на уго.ль, десорбцнп его спиртом, перевода в фенолхлороформную смесь, хро.мотографирования на колонке с гидроокисью алюминия, очистки ацетоном и осаждения из водно-ацетонового раствора для получения кристаллического продукта.