Изобретение относится к химии конденсированных гетероциклических систем и конкретно касается нового соединения - 4-ацетил-3-бензил-2-метилтиоимидазо(4,5-в)индола формулы I
При изучении его биологической активности установлено, что оно обладает свойством защищать печень от отравления четыреххлористым углеродом. Указанное свойство позволяет предполагать возможность применения этого соединения для предотвращения и лечения у людей острых ингаляционных отравлений четыреххлористым углеродом.
Значительный рост использования для различных нужд технических жидкостей сопровождается ростом острых отравлений. Хлорированные углеводороды жирного ряда обладают специфическим цитотоксическим действием, а отравления ими нередко ведут к смертельному исходу. Особую опасность могут представлять хлорированные углеводороды в аварийных ситуациях, когда в силу их высокой летучести ингаляционным отравлением может подвергнуться большое количество людей.
У всех больных наблюдается тяжелое поражение печени, вплоть до жирового перерождения органа. Широкое применение четыреххлористого углерода в промышленности, сельском хозяйстве и военном деле делает актуальным поиск фармакологических средств, защищающих организм от воздействия четыреххлористого углерода.
Для стимуляции процессов регенерации печени применяются производные пуриновых и пиримидиновых оснований - рибоксин и оротат калия (аналог А) (1), однако их активность недостаточна.
Цель изобретения - новое соединение ряда имидазо (4,5-в)индола, более эффективно защищающее печень от отравления четыреххлористым углеродом.
Поставленная цель достигается химической структурой нового соединения формулы I, обладающего указанным свойством.
Заявляемое соединение представляет собой желтовато-белое кристаллическое вещество, нерастворимое в воде, легко растворимое в хлороформе.
Способ получения заявляемого соединения основан на известной реакции алкилирования гетероциклических тионов по атому серы в щелочной среде галоидными алкилами (2). Взаимодействие 4-ацетил-3-бензилимидазо (4,5-в)индол-2-тиона с йодистым метилом проводят в присутствии оснований - щелочей или карбонатов щелочных металлов в водной, водно-спиртовой среде или в диметилформамиде. Реакцию проводят при комнатной температуре (18-25оС).
Строение соединения I подтверждено данными элементного анализа и спектральными характеристиками, приведенными в примере 1. Тот факт, что метилирование осуществляется именно по атому серы, подтверждается отщеплением метилмеркаптана при нагревании заявляемого соединения с соляной кислотой.
П р и м е р 1. Перемешивают 1 г (2,982 ммоль) 4-ацетил-3-бензилимидазо(4,5-в)-индол-2-тиона, 1 г (7,24 ммоль) тонкоизмельченного безводного карбоната калия, 1 мл (16,06 ммоль) йодистого метила и 20 мл безводного диметилформамида при 20оС в течение 1 ч. Фильтруют, фильтрат выливают в 50 мл воды, выпавший осадок отфильтровывают, промывают водой и сушат. Получают 0,88 г соединения I (88% ), после перекристаллизации из спирта блестящие - белые кристаллы, т. пл. 172оС.
Вещество однородно по данным ТСХ. Адсорбент - силуфол uv-254, растворитель для нанесения - ацетон, элюент - этилацетат-гексан, 1 : 3, Rf 0,30.
Найдено, % : C 68,11; H 68,25; H 5,36, 5,17; N 12,64, 12,68; S 9,88, 9,67.
C19H17N3OS.
Вычислено, % : C 68,03; H 5,11; N 12,53; S 9,56.
ПМР-спектр (CДCl3), 200 МГц, δ , м. д. : 2,56 с (3Н, СН3), 2,68 с (3Н, СН3СО), 5,76 с (2Н, СН2), 6,90-7,54 м (8Н, Ar), 7,80 g (1Н, Н5).
Масс-спектр 100оС, m/z (1): 335 (100)М+, 293 (40)М+-СОСН2, 278 (6)М+-СН2СО-СН3, 244 (10)М+-СН2С6Н5, 202 (100)М+-СОСН2-СН2С6Н5, 186 (4)М+-СН2С6Н5-СNS.
УФ-спектр в спирте, λ макс. , нм (lg E): 248 (4,00), 293 (4,16).
П р и м е р 2. Смешивают 1 н (2,982 ммоль) 4-ацетил-3-бензилимидазо(4,5-в)индол-2-тиона с 4,3 мл 1 н. раствора едкого натра, прибавляют 1,36 мл (21,8 ммоль) йодистого метила и еще 4,3 мл 1 н. раствора едкого натра и встряхивают 2 ч при 20оС. Осадок отфильтровывают, промывают водой (3 х 5 мл) и сушат над фосфорным ангидридом в вакууме. Получают 0,74 (74% ) соединения I, идентичного веществу, полученному в примере 1.
Изучение биологической активности заявляемого соединения.
Опыты выполнены на белых крысах-самцах массой 170-200 г. Четыреххлористый углерод вводили подкожно ежедневно в 50% -ном масляном растворе в течение 4 дней подряд в количестве 0,4 мл на 100 г массы. Одновременно с четыреххлористым углеродом вводили заявляемое соединение в дозе 25 мг/кг. Эффект препарата сравнивали с уже известными гепатопротекторами - производимыми пуриновых и пиримидиновых оснований - рибоксином и оротатом калия (аналог А) в дозе 100 мг/кг.
Из литературы известно, что клиническая картина отравления четыреххлористым углеродом развивается медленно. Основные симптомы интоксикации проявляются к концу вторых суток и через 4-7 сут, как правило, наблюдается летательный исход. У всех больных наблюдается тяжелое поражение печени, вплоть до жирового перерождения органа. Оценку защитного действия заявляемого соединения проводили, исследуя продолжительность гексеналового сна (ГС), концентрацию аланинаминотрансферазы (АлАТ), аспартатаминотрансферазы (АсАТ) и общего билирубина (ОБ) в сыворотке крови. Изменение активности ферментов переаминирования в сыворотке крови, увеличение количества билирубина свидетельствуют о повреждающем действии тетрахлорметана на клеточные мембраны. Нарушение процесса билирубинообразования, увеличение продолжительности гексеналового сна говорит о нарушении дезинтоксикационной функции печени.
Данные о биологической активности заявляемого соединения, в сравнении с уже известными гепатопротекторами, представлены в таблице.
Исследуемое соединение по совокупности показателей превосходит известные аналоги с гепатопротекторным действием при интоксикации четыреххлористым углеродом - рибоксин и оротат калия (А), а также аналог А. Полученные данные свидетельствуют, что применение заявляемого соединения снижает продолжительность гексеналового сна в 1,27 раза, концентрацию в сыворотке крови АлАТ - в 1,2 раза, АсАТ - в 1,23 раза, общего билирубина - в 2,0 раза по сравнению с контролем.
Острая токсичность определялась на белых нелинейных мышах-самцах после однократного введения внутрибрюшинно заявляемого соединения по известной методике (3). Найдено, что ЛД50 исследуемого препарата превышает 3980 мг/кг. Полученный результат свидетельствует о том, что заявляемое соединение можно отнести к малотоксичным веществам. Оно характеризуется большой фармакологической широтой. (56) Рычнев В. Е. , Фролов В. М. Стимуляторы регенерации в терапии вирусного гепатита и других заболеваний печени. Воронеж: Изд-во ВГУ, 1984, с. 22.
Иоффе И. С. , Томчин А. Б. , Жукова Е. Н. Семикарбазоны и тиосемикарбазоны гетероциклического ряда. III. Метильные производные 2-меркапто-1,3,4-тиазакарбазола. - Журн. общ. хим. - 1969 - Т. 39, вып. 3 - с. 640-645.
Прозоровский В. Б. , Прозоровская М. П. , Демченко В. М. Экспресс-метод определения средней эффективной дозы и ее ошибки // Фармакол. и токсикол. - 1978 - N 4 - с. 497-502.
Использование: в медицине для защиты печени от отравления четыреххлористым углеродом. Сущность изобретения: продукт 4-ацетил-3-бензил-2-метилтиоимидазо-(4,5 - в)индол ф-лы I. БФ C19H17N3OS, выход 88% , т. пл. 172 С. Реагент 1: соединение ф-лы II. Реагент 2: CH3J. Условия реакции: в присутствии оснований-щелочей или карбонатов щелочных металлов в водной, водно-спиртовой среде или в диметилформамиде при комнатной температуре. 1 табл. 
4-Ацетил-3-бензил-2-метилтиомидазо(4,5-b)индол формулы
защищающий печень от отравления четыреххлористым углеродом.
