СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО РАДИОПРОТЕКТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ Российский патент 1994 года по МПК A61K35/78 

Изобретение относится к экспериментальной и клинической медицине, а именно к радиобиологии, может быть использовано для лечения онкологических больных и больных облученных длительно и большими дозами, а также в химико-фармацевтической промышленности при производстве полиинов.

Известны различные способы получения полиинов. Общая методика выделения полиинов состоит в предварительном разделении смеси на нейтральную и кислую фракции. Кислую фракцию затем метилируют и отдельно разделяют путем многократной хроматографии на оксиде алюминия. В литературе обнаружены данные по радиопротекторной активности только одного наиболее близкого по физико-химическим свойствам природного соединения - эпигаллокатехина, который является полифенолом и выделен из чая. Выделенные полиины обладают противомикробной активностью, других активностей для полиинов в литературе не приведено. Большинство полученных полиинов являются токсичными веществами, кроме того, в литературе указано, что полиины содержатся только в корнях, данные о возможном применении полиинов в радиобиологии, отсутствуют.

Цель изобретения - повышение специфической активности.

Поставленная цель достигается тем, что высушенные и измельченные плоды маклюры оранжевой (Maclura aurantiaca) обрабатывают диэтиловым эфиром при соотношении сырья и экстрагента (1:20) - (1:25) в течение 3-4 сут, затем густой эфирный экстракт смешивают с оксидом алюминия и элюируют смесью петролейный эфир-хлороформ, с последующей отгонкой под вакуумом.

Объектом исследования являются плоды маклюры оранжевой (Maclura aurantiaca).

Маклюра оранжевая (Maclura aurantiaca). Родина растения - Северная Америка. В Европе культивируется в декоративных целях и для получения древесины. Листья используются как корм для шелкопряда. Из маклюры оранжевой выделен флавоноид осайин, который отличается высокой токсичностью, но в эксперименте замедляет рост опухолей. Полученные полиины из маклюры оранжевой - кристаллические вещества с температурой плавления 78^оС, окрашенные в желто-зеленый цвет, легко растворимы в спирте, эфире, мало - в воде. УФ-спектры имеют две полосы поглощения 237 и 327 нм, что указывает на принадлежность вещества к группе полиинов. В ИК-спектре имеют две полосы поглощения в области 2140 и 2231 см^-1, это характерно для валентных колебаний С≡С- группы. О наличие в молекуле транс-С-С-групп свидетельствуют полосы поглощения при 1601, 1633, 995 см^-1.

Оптимальным временем экстракции полиинов из маклюры оранжевой является 3-4-суточное настаивание в диэтиловой эфире при соотношении сырья и экстрагента (1:25) - (1:20), что представлено в таблице.

Как видно из данных таблицы, максимальный выход полиинов наблюдается при соотношении сырья и экстрагента (1:25) - (1:20) и времени экстракции 3-4 сут.

П р и м е р 1. Воздушно-сухое и измельченное сырье маклюры оранжевой (Maclura aurantiaca) 10 г подвергают экстракции 200 мл диэтилового эфира в течение 3 сут, фильтруют. Диэтиловый экстракт сгущают и смешивают с оксидом алюминия в соотношении 1:3 (экстракт : оксид алюминия). Затем переносят на колонку и элюируют вначале смесью петролейный эфир-хлороформ (2:8), а затем одним хлороформом. Объединенные извлечения упаривают, высушивают в вакууме и получают кристаллы желтого цвета.

Выход 0,29 г (2,9 %).

П р и м е р 2. 10 г воздушно-сухого и измельченного сырья маклюры оранжевой (Maclura aurantiaca) подвергают экстракции 250 мл диэтилового эфира в течение 4 сут. Затем экстракт отфильтровывают и диэтиловый экстракт сгущают и смешивают с оксидом алюминия в соотношении 1:3 (экстракт : оксид алюминия). Затем переносят на колонку и элюируют вначале смесью петролейный эфир-хлороформ (2: 8), а затем одним хлороформом. Объединенные извлечения упаривают, высушивают в вакууме и получают кристаллы желтого цвета.

Выход 0,3 г (3%).

Радиопротекторная активность нами была определена на мембранах и на лабораторных животных-крысах. Крысы были облучены дозой 7 Гр. Их вскармливали в дозе 4 мг/кн веса. Через 30 дней определили смертность крыс и она составляла 21%, в то же время смертность крыс, вскармливаемых эпигаллокатехином, составила 44% при контроле 100% гибели облученных крыс, которые не получали препараты. Полученные данные определения радиопротекторной активности на лабораторных животных сопоставимы с результатами на мембранах.

Радиозащитное действие изучалось на мембранном потенциале и фиксировалось по изменению электропроводности. Для эпигалокатехина действие увеличивалось на 20-30%, т.е. на 1-1,5 порядка.

Проницаемость мембран является необходимым условием для проявления радиозащитного эффекта. Протоноформное действие является специфичным, так как лежит в основе их защитной модификации. Снижая энергетический потенциал, эти вещества тормозят скорость пролиферации клетки, что снижает действие радиации в целом.

Радиозащитное действие полиинов проверялось на модели изменения мембранного потенциала.

На чертеже представлена зависимость электропроводности (радиозащиты) мембраны от концентрации полиинов.

Как видно из данных чертежа (полиины-протонофоры), зависимость электропроводности от концентрации носит квадратичный характер, т.е. радиопротекторная активность в присутствии полиинов возрастает на 3-4 порядка, в то же время радиозащитный эффект эпигаллокатехина увеличивается только на 1-1,5 порядка. Выделенные полиины стабильны и при хранении не изменяют своей активности, цвета и всех остальных характерных признаков.

Использование предлагаемого способа обеспечивает увеличение специфической активности в 2-2,5 раза в сравнении с эпигаллокатехином (эталонным препаратом), при испытании на токсичность на беспородных мышах было установлено, что эти соединения не являются токсичными в дозе 200 мг/кг веса.

Изобретение относится к медицине, а именно к химико-фармацевтической промышленности, и касается способа получения средства, обладающего радиопротекторной активностью. Целью изобретения является усиление специфической активности. Сущность изобретения заключается в экстракции измельченных плодов маклюры оранжевой диэтиловым эфиром при соотношении сырья и экстрагента 1: (20-25) в течение 3-4 сут, а упаренный концентрат очищают на оксиде алюминия при соотношении 1:3 и целевой продукт элюируют последовательно смесью петролейного эфира и хлороформа 2:8 и хлороформом, извлечение упаривают и высушивают. Положительный эффект заключается в усилении специфической активности в 2-2,2 раза по сравнению с прототипом. 1 ил., 1 табл.

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО РАДИОПРОТЕКТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ, путем экстракции растительного сырья органическим растворителем, упаривания экстракта и его очистки, отличающийся тем, что, с целью усиления специфической активности, в качестве растительного сырья используют измельченные плоды маклюры оранжевой (Maclure aurantica), экстракцию проводят диэтиловым эфиром при соотношении сырья и экстрагента 1 : 20 - 250 в течение 3 - 4 сут., а упаренный концентрат очищают на оксиде алюминия в соотношении 1 : 3 и целевой продукт элюируют последовательно смесью петролейный эфир:хлороформ 2 : 8 и хлороформом, извлечения упаривают и высушивают.