ИЗОТИУРОНИОАЗИНЫ, ПРОЯВЛЯЮЩИЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВУЮ АКТИВНОСТЬ Российский патент 1995 года по МПК C07D251/38 C07D239/58 A61K31/50 A61K31/505 A61K31/53 

Изобретение относится к органической химии, конкретно к новым изотиурониевым производным азинов общей формулы I
XSCl^- где X= a) б) в) n=2, 3 которые проявляют противоопухолевую (ПО) активность.

Известны различные производные пиримидина, пиридазина и 1,3,5-триазина [1] в том числе ближайшие структурные аналоги заявляемых соединений меркаптоазины формулы II
X(SH)n, где Х те же, что в формуле I;
n=2, 3.

Соединения II получаются действием на галогеназины (ХСl) гидросульфида натрия. Однако эти вещества не проявляют ПО активности.

Среди известных ПО препаратов к заявляемым веществам наиболее близок 6-меркаптопурин (Ш) единственный серосодержащий неалкилирующий препарат, применяющийся в клинической практике (принят за аналог по назначению и базовый объект) [2] Соединение III выпускается отечественной промышленностью.

_III
Недостатками 6-меркаптопурина являются следующие:
относительно высокая токсичность препарата (ЛД₅₀ 200 мг/кг для мышей при однократном внутрибрюшинном введении);
отсутствие активности препарата на ряде штаммов сарком (саркомы Иенсена, М-1).

Целью изобретения является создание ПО препаратов с пониженной токсичностью и повышенной активностью.

Поставленная цель достигается изотиурониоазинами общей формулы 1, которые получаются при действии тиомочевины на галогеназины при 20-60^оС в спиртовой среде.

XCl_n + S XSCl^-
Строение изотиурониоазинов I подтверждено данными элементного анализа, ИК- и ПМР-спектров, содержания хлора (титриметрический анализ).

В спектрах ИК соединений Iа, б наиболее характеристичны полосы валентных колебаний СН пиримидинов и пиридазинов (ν3150 см^-1), С=H₂амидиниевого фрагмента [ ν(NH₂) 3170-3310 см^-1, ν(С= ) 1625-1670 cм^-1]
В спектрах ПМР обнаруживаются сигналы протонов СН пиримидинового цикла Iа (δ10,1 м.д.), пиридазинового цикла Iб (δ9,82 м.д.), а также характерные для всех соединений Iа-в сигналы амидиниевых NH₂-групп (δ7,42-10,0 м.д.).

Новые изотиурониоазины Iа-в проявляют в экспериментах на мышах меньший уровень токсичности, чем аналог по назначению III (ЛД₅₀ 252-397 мг/кг против 200 мг/кг) (см. таблицу).

На штамме лейкемии Р-388 обнаружен умеренный антибластический эффект, близкий к аналогу [удлинение средней продолжительности жизни (УСПЖ) 110-130% против 125% для аналога III] Вместе с тем, в отличие от 6-меркаптопурина, для которого ПО действие на штаммах сарком Иенсена и М-1 не характерно, соединения Iа-в тормозят развитие опухолей на 22-70%
Значительно ингибирование соединениями Iа-в развития карциносаркомы Уокера и меланомы В-16 (41-63%).

Сопоставительный анализ с аналогами по строению и назначению показывает, что в настоящем техническом решении заявляются новые соединения, что соответствует критериям "новизна" и "существенные отличия".

П р и м е р 1. Общая методика получения изотиурониоазинов I. К раствору 10 ммоль соответствующих галогеназинов (2,4-дихлорпиримидина, 3,6-дихлорпиридазина, цианурхлорида) в 30 мл этанола прибавляли 20-30 ммоль тиомочевины и при перемешивании нагревают при 60^оС в течение 1 ч. После охлаждения выпавший белый осадок отфильтровывали и сушили. Выходы изотиурониоазинов 90-95% (см. табл. 1).

П р и м е р 2. Методики определения токсичности и антибластической активности. Оценку токсического действия производных изотиурония проводили после однократного внутрибрюшинного введения беспородным мышам-самкам (массой 18-20 г), а также путем оценки влияния многократных внутрибрюшинных введений на изменение массы тела животных получавших соединения по сравнению с изменением массы тела животных в контрольной группе.

При однократном внутрибрюшинном введении мышам доза, вызывающая гибель половины животных в группе (ЛД₅₀), для всех соединений находится в интервале 252-397 мг/кг (1-362,11-397 и 111-252 мг/кг) следовательно, изученные соединения являются малотоксичными. Все соединения, применяемые в терапевтических дозах, хорошо переносились опытным животными.

Изучение антибластической активности производных изотиурония проводили на беспородных крысах-самках с перевиваемыми под кожу саркомой Иенсена, саркомой М-1 и карциносаркомой Уокера (КСУ); на мышах-самках линии ВDF₁ с трансплантируемой под кожу меланомой В-16 и перевиваемой внутрибрюшинно лейкемией Р-388. При изучении использовано более 200 крыс и 220 мышей. Все соединений вводили в изотоническом растворе хлорида натрия внутрибрюшинно в дозах равных 1/4-1/6 от ЛД₅₀, ежедневно 1 раз в сутки (в течение 5-7 дней). В случае использования саркомы Иенсена, саркомы М-1 и меланомы В-16 лечение начинали на 5-й день после перевивки опухоли и через 24 ч после трансплантации КСУ и лейкемии Р-388. Через день после окончания лечения (12-14 день с момента перевивки опухоли) животных с солидными опухолями забивали, взвешивали, опухоли, иссекали, а также взвешивали и вычисляли процент торможения опухолевого роста (И_т,). В случае использования лейкемии Р-388 определяли увеличение средней продолжительности жизни (УСПЖ,) мышей, получавших соединения по сравнению с контрольными. Цифровой материал обрабатывали статистически по методу "Стьюдента-Фишера". Все полученные данные являются статистически значимыми (r от 0,95 до 0,99). Свойства, спектральные характеристики, токсичность и противоопухолевая активность приведена в табл. 1-3.

Заявляемые соединения Iа-в проявляют следующие технико-экономические преимущества перед аналогом по назначению III:
пониженная токсичность соединений I;
повышенная ПО активность соединений I на штаммах сарком Иенсена и М-1.

Использование: в медицине, так как продукт проявляет противоопухолевую активность. Сущность: новые химические вещества - изотиурониоазины формулы: где х = а) б) в) n = 2,3, БФ: х = а - C₆H₁₀N₈Cl₂S₂, n = 2; x = б, n = 2, C₈H₁₀N₆Cl₂S₂, x = b, n = 3 C₉H₁₂N₉Cl₃S₃. Реагент 1: Тиомочевина. Реагент 2: Галогеназины. Условия реакции: температура 20 - 60°С спиртовая среда. 3 табл.

Изотиурониоазины общей формулы




n 2,3,
проявляющие противоопухолевую активность.