1,1'-ДИГЛИЦИДИЛ-3,3'-ДИЭТИЛБИС-(1,2,4-ТРИАЗОЛ-5-ОН-4-ИЛ)-МЕТАН, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВУЮ АКТИВНОСТЬ, И 3,3'-ДИЭТИЛБИС-(1,2,4-ТРИАЗОЛ-5-ОН-4-ИЛ)-МЕТАН В КАЧЕСТВЕ ПРОМЕЖУТОЧНОГО СОЕДИНЕНИЯ В СИНТЕЗЕ 1,1'-ДИГЛИЦИДИЛ-3,3'-ДИЭТИЛБИС-(1,2,4-ТРИАЗОЛ-5-ОН-4-ИЛ)-МЕТАНА Советский патент 1997 года по МПК C07D249/08 A61K31/41 

Изобретение относится к химии триазолов, конкретно к новому диглицидильному производному 3,3'-диэтилбис-(1,2,4-триазол-5-он-4-ил) метана формулы I (соединение I)

проявляющему противоопухолевую (п/о) активность, и промежуточному соединению и его синтезе 3,3'-диэтилбис-(1,2,4-триазол-5-он-4-ил) метану формулы II (соединение II),

Цель изобретения создание новых производных 1,2,4-триазола, обладающих повышенной противоопухолевой активностью и низкой токсичностью по сравнению со структурным аналогом подобного действия 1,2,4-триглицидилуразолом (соединение III) и базовым объектом тиотэфом.

Поставленная цель достигается синтезом 1,1'-диглицидильного производного 3,3'-диэтилбис-(1,2,4-триазол-5-он-4-ил) метана формулы 1, проявляющего высокую противоопухолевую активность при низкой токсичности из 3,3'-диэтилбис-(1,2,4-триазол-5-он-4-ил)метана.

Следующие примеры иллюстрируют изобретение.

Пример 1. 3,3'-диэтилбис-(1,2,4-триазол-5-он-4-ил) метан (II). В колбу емкостью 0,5 л загружают 144 г (2,4 моль) мочевины и 145 мл (2,9 моль) 97% -ного гидразингидрата, нагревают смесь при кипении и барботаже аргоном или азотом 1,5-2 ч. Из полученного раствора при 60-70^oC удаляют в вакууме избыток гидразингидрата. К остатку при комнатной температуре добавляют 200 мл воды и при перемешивании прибавляют по каплям 257 мл (приблизительно 2 моль) пропионового ангидрида в течение 1 ч. Продолжают перемешивание 1 ч, затем 1 ч при 80^oC. Загружают в охлажденную реакционную смесь раствора 160 г (приблизительно 4 моль) едкого натра в 200 мл воды и нагревают при 90-100^oC 4 ч. К образовавшемуся раствору добавляют древесный уголь и в горячем виде фильтруют. К охлажденному фильтрату порциями при перемешивании прибавляют концентрированную соляную кислоту до pH приблизительно 7. Выпавший осадок отфильтровывают. Смешивают его с 14,25 г (0,475 моль) параформа и 127 мл концентрированной соляной кислоты и кипятят реакционную смесь 1 ч, выпавший мелкокристаллический белый осадок 3,3' диэтилбис-(1,2,4-триазол-5-он-4-ил) метана, отфильтровывают, промывают спиртом и эфиром и сушат. Выход 80 г (28% ). После двухкратной перекристаллизации из воды получают 47,2 г продукта с т. пл. 297-298^oC.

Найдено, C 47,8; H 5,0: N 35,7.

C₉H₁₂N₆O₂.

Вычислено, C 47,4; H 5,1; N 35,6.

Спектр ПМР ДМСО d₆, внутренний стандарт ГМДС, δ м. д. 0,93 т (CH -CH); 2,26 кв (CH- CH), 5,34 с (CH -N), 11,59 с (NH).

ИК-спектр (в вазелиновом масле), n, см^-1 1680 c (C=O), 1590 ср (C=N), 3070 сл, 3180 пл (NH).

Пример 2. 1,1'-Диглицидил-3,3'-диэтилбис-(1,2,4-триазол-5-он-4-ил)метан. К суспензии 47 г (0,197 моль) 3,3'-диэтилбис-(1,2,4-триазол-5-он-4-ил) метана в 310 мл (3,95 моль) эпихлоргидрина прибавляют 0,65 г (3,9 моль) тетраэтиламмонийхлорида и нагревают реакционную смесь при 90^oC и перемешивании 5 ч. Спустя 1-1,5 ч от начала нагревания образуется раствор, который охлаждают до 40^oC и порциями добавляют в течение 1 ч 17,5 г (0,435 моль) едкого натра. Продолжают перемешивание при 40^oC 6 ч. Образовавшийся осадок отфильтровывают и фильтрат упаривают в вакууме. К смолообразному остатку (выход количественный) добавляют 10 мл изопропанола и охлаждают в холодильнике до кристаллизации. Полученный осадок отфильтровывают изопропанолом, эфиром и сушат. Выход 29,5 г (43%), т. пл. 119-121^oC (из этанола), R_f 0,58 (на "силуфоле" (ЧССР) в системе хлороформ:метанол 10:1).

Найдено, C 51,3; H 6,0; N 23,9.

C₁₅H₂₀N₆O₄.

Вычислено, C 51,4; H 6,3; N 24,0.

Спектр ПМР (CDCl₃, внутренний стандарт ТМС), d, м. д. 1,20 т (CH₃-CH₂), 2,57 кв (CH₂-CH₃), 2,47, 2,70 м (CH₂-O), 3,17 м (CH-O), 3,43-4,20 м (CH₂-N), 5,60 с (CH₂N).

ИК-спектр (в капле до кристаллизации n, см^-1 1580 с (C=N), 1700 с (C=O), 3055 сл (CHэп2

Противоопухолевую активность 1,1'-диклицидил-3,3'-диэтилбис-(1,2,4-триазол-5-он-4-ил)метана изучали в опытах на нелинейных крысах обоего поля (масса тела 110 120 г) с трансплантируемыми опухолями саркомой Иенсена, саркомой М-1 и карциносаркомой Уокера и мышах линий C₅₇BL₆ и BDF₁ обоего пола (масса тела 22-24 г) с перевитыми внутрибрюшинно лейкемией Р-388 и лейкемией L₁₂₁₀. Соединения вводили животным в изотоническом растворе хлорида натрия внутрибрюшинно, многократно (один раз в сутки ежедневно в течение 5-7 дней), начиная с пятого дня после перевивки опухолей и через 24 ч после инокуляции лейкемией. Через день после последней инъекции животных с солидными опухолями забивали, взвешивали, опухоли иссекали и также взвешивали и путем сравнения изменения массы опухолей (в опытной и контрольной группах) вычисляли индекс торможения роста опухоли (I_т,) по формуле

где M_к и M_o -средние массы опухолей в контрольной и опытной группах соответственно.

продолжительность жизни мышей с лейкемиями Р-388 и L₁₂₁₀ определяли по формуле

где M_o и M_к -средняя продолжительность жизни животных в опытной и контрольной группах соответственно.

Оценку токсического действия 1,1'-диглицидил-3,3'-диэтилбис-(1,2,4-триазол-5-он-4-ил)метана производили после однократного внутрибрюшинного введения (однократная летальная доза ЛД₁₀₀), а также путем оценки влияния многократных введений на изменение массы тела подопытных животных по сравнению с изменением массы тела животных в контрольной группе (коэффициент роста, К_р,) по формуле

где A_o и B_o -средние массы тел животных в начале этапа в опытной и контрольной группах соответственно;
A_к и B_к -средние массы тел животных (без учета массы опухоли) в конце опыта в опытной и контрольной группах соответственно.

Данные по п/о активности соединения I приведены в табл. 1.

Как видно из табл. 1, при ежедневном введении мышам и крысам в переносимых дозах соединение I проявляет высокую противоопухолевую активность в отношении саркомы Иенсена (I_т94), саркомы М-1 (I_т 72%), карциносаркомы Уокера (I_т92 ), умеренное антибластическое действие на развитие лейкемий Р-388 (I_т 40%) и L₁₂₁₀ (I_т 50%).

По сравнению с аналогом по действию соединение I в целом проявляет более высокий уровень противоопухолевой активности, что видно из сравнительных данных табл. 2. Так, на штамме саркомы Иенсена I_т для соединения I составляет 94 против 59% для аналога, на штамме саркомы М-1 72 против 20% карциносаркомы Уокера 92 против 60% несколько уступая в активности лишь при лейкемии Р-388 (увеличение продолжительности жизни 40 против 60%).

1,2,4-Триглицидилуразол имеет, кроме того, значительно более высокий уровень токсичности (более чем в 10 раз), что видно из сравнения значений ЛД₁₀₀ соединения I и аналога (на мышах 880 против 80 мг/кг, на крысах 640 против 60 мг/кг), ЛД₅₀ (на мышах 500 против 35 мг/кг, на крысах 350 против 25 мг/кг) и МПД (на мышах 300 против 25, на крысах 200 против 15 мг/кг) (см. табл. 3)
По сравнению с тиотэфом (применяемый в практике п/о препарат) соединение I обладает значительно меньше (более чем в 30 раз) токсичностью (ЛД₁₀₀ для мышей 880 против 30 мг/кг, для крыс 640 против 20 мг/кг, ЛД₅₀ для мышей 500 против 18,2 мг/кг, для крыс 350 против 8,4 мг/кг, МПД для крыс 200 против 2,5 мг/Кг (см. табл. 3), а также более высокий противоопухолевой активностью на штамме саркомы М-1 (72 против 62%) и близкой активностью на штаммах саркомы Иенсена (94 против 99%) и карциносаркомы Уокера (92 против 99%). Во всех случаях применения соединения I отмечаются небольшие (положительные или отрицательные) значения коэффициентов роста животных (К_р), свидетельствующие о хорошей переносимости вещества.

Изобретение касается производных триазола, в частности 1,1'-диглицидил-3,3'-диэтилбис (1,2,4-триазол-5-он-4-ил) метана, обладающего противоопухолевой активностью, и полупродукта для его синтеза - 3'3-диэтилбис-(1,2,4-триазол-5-он-4-ил) метана, что может быть использовано для лечения онкологических заболеваний. Цель - создание новых активных веществ указанного класса.

а) Синтез полупродукта ведут из мочевины и гидразингидрата с последующим ацилированием пропионовым ангидрином и циклизацией полученного семикарбазона в водной щелочи в 3-этилтриазол-5-он, который обрабатывает параформом в кислой среде.

б) Полученный полупродукт алкилируют эпихлоргидрином. Выход, %, т. пл., ^oC; брутто-ф-ла: а) 28, 297 -298, C₉H₁₂N₆0₂; б) 43, 119-121; C₁₅H₂₀N₆O₄. Новое вещество имеет более низкий уровень токсичности (менее чем в 10 раз по сравнению с 1,2,4-триглицидилуразолом), что позволяет использовать вещество в дозах до 100 мг/кг и достигать торможения роста саркомы Иенсена на 94%, карциносаркомы Уокера на 92% и саркомы М-1 на 72% против 59, 60 и 20% соответственно. 2 с. п. ф-лы, 3 табл.

1. 1,1'-Диглицидил-3,3'-диэтилбис-(1,2,4-триазол-5-он-4-ил)метан формулы

проявляющий противоопухолевую активность. 2. 3,3'-Диэтилбис-(1,2,4-триазол-5-он-4-ил)-метан формулы

в качестве промежуточного соединения в синтезе 1,1'-диглицидил-3,3'-диэтилбис-(1,2,4-триазол-5-он-4-ил)метана.