СЕРНОКИСЛАЯ СОЛЬ 2-N-МЕТИЛАМИНО-5-ХЛОРБЕНЗГИДРИЛМОЧЕВИНЫ, ПРОЯВЛЯЮЩАЯ ПРОТИВОСУДОРОЖНУЮ АКТИВНОСТЬ Российский патент 1995 года по МПК C07C275/24 A61K31/17 

Сернокислая соль 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрилмочевины, проявляющая противосудорожную активность.

Изобретение относится к новому химическому соединению, а именно к сернокислой соли 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрилмочевины, формулы I:
которое проявляет противосудорожную активность.

Известно, что производные мочевины обладают широким спектром биологической активности, в том числе и противосудорожной. Сама бензгидрилмочевина обладает выраженной противосудорожной активностью, сравнительно низкой острой токсичностью, но при длительном применении вызывает нежелательные побочные эффекты.

Известные соединения отличаются сравнительно низкой противосудорожной активностью.

О противосудорожных свойствах сернокислой соли 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрилмочевины сведения в литературе отсутствуют.

Целью изобретения является изыскание соединения с высокой противосудорожной активностью и низкой токсичностью в ряду бензгидрилмочевин.

Поставленная цель достигается соединением формулы I, которое получают реакцией бензгидролов с мочевиной в присутствии серной кислоты при нагревании, причем мочевину и серную кислоту d 1,84 предварительно выдерживают в течение 5-15 мин при 65-80^оС, к полученной смеси добавляют 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрол, затем расплав перемешивают 7 ч в отсутствие растворителя при следующих соотношениях реагентов: 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрол мочевина серная кислота 5: (35-55) (20-25) с выходом целевого продукта до 91%
В разработанном способе получения существенная роль отводится порядку загрузки реагентов. Например, если смешать все компоненты реакции сразу и нагревать до 80^оС, то вместе с целевым продуктом (25%) наблюдается образование 1-N-метил-4-фенилтетрагидрохиназолинона в количестве до 30% Это обстоятельство указывает на то, что такой порядок загрузки реагентов способствует протеканию реакции гетероциклизации образующейся промежуточной 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрилмочевины по реакционно-способной 2-N-метиламиногруппе в орто-положении ароматического ядра. Для того, чтобы исключить побочный процесс, в изобретении используют операцию предварительной выдержки в течение 5-15 мин мочевины и серной кислоты при нагревании с последующим введением 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрилмочевины. Очевидно, что для успешного синтеза целевой сернокислой соли 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрилмочевины необходим предварительный индукционный период активации мочевины серной кислотой, так как в отсутствии последней реакция не идет совсем.

Способ получения предусматривает проведение процесса конденсации 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрола с мочевиной в расплаве в отсутствие растворителей. Использование уксусной кислоты в качестве гомогенизирующей среды не приводит к образованию целевого продукта, вызывает ряд побочных процессов образование 2-N-метиламино-5-хлорбензгидролового эфира уксусной кислоты и N-ацетилирования. Контроль за индивидуальностью синтезированного вещества и анализ реакционной смеси производили на пластинах Силуфол-УФ-251, элюирующая смесь бензол этанол 8 2 детектирование под УФ-светом и обработкой пластин реактивом Эрлиха.

Для успешного синтеза целевого продукта является строгое соблюдение молярных соотношений реагентов и температуры проведения процесса.

Условия синтеза приведены в табл. 1. Как видно из данных табл. 1, снижение количества мочевины до 25 ммоль на 5 ммоль исходного гидрола наблюдается некоторое снижение выхода целевого продукта (76% пример 1). А увеличение же количества мочевины свыше 50 ммоль на 5 ммоль гидрола (пример 6) затрудняет проведение реакции из-за плохого смешения реагентов. Примеры 7-1 демонстpируют влияние количества серной кислоты на выход целевого продукта. Если расход серной кислоты составляет менее 20 ммоль на 5 ммоль гидрола (примеры 7-9), то выход сернокислой соли 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрола падает за счет недостаточности серной кислоты для солеобразовательного процесса. При увеличении количества серной кислоты свыше 25 ммоль на 5 ммоль гидрола также снижается выход целевого продукта из-за параллельного протекания побочных реакций (пример II). Примеры 12-16 показывают значимость температурного фактора для успешного синтеза целевого продукта. При температуре ниже 65^оС несколько снижается выход сернокислой соли 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрилмочевины (пример 12), увеличение температуры реакции свыше 80^оС (пример 16), приводит также к уменьшению выхода целевого продукта из-за протекания побочных процессов.

Структура и состав сернокислой соли 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрилмоче- вины доказаны на основании данных ИК-спектра, элементного и тонкослойно-хроматографического анализа.

П р и м е р. В трехгорлую колбу, снабженную термометром, обратным холодильником и мешалкой, загружают 3 г (50 ммоль) мочевины и 2,2 мл (20 ммоль) серной кислоты (d 1,84), нагревают до 70^оС и перемешивают смесь 10 мин. Затем при перемешивании загружают 1,45 г (5 ммоль) 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрола и реакционную смесь выдерживают при перемешивании 7 ч при 70^оС. После окончания реакции смесь выливают в 30 мл гексана, перемешивают 30 мин, образовавшийся белый осадок отфильтровывают, промывают 10 мл гексана и получают 2,07 г сернокислой соли 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрилмочевины, что составляет 91% в расчете на 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрол.

Т_пл. 160-162^оС. Найдено, С 46,40; Н 4,31; N 10,90 С₁₅Н₁₆СlN₃ ˙ H₂SO₄. Вычислено, С 46,45; Н 4,69; N 10,84 ИК-спектр ( ν вазелиновое масло, см^-1): 3220 (NH-СН₃), 3360 (NH_амида), 3420 (NH₂), 1650 (С=0).

Исследование острой суточной токсичности и противосудорожной активности сернокислой соли 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрилмочевины проведено в лаборатории скрининга лекарственных веществ НИИ фармакологии Томского научного центра АМН СССР.

Сернокислая соль 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрилмочевины (гос. регистрации N 10122790) исследована на противосудорожную активность по тесту максимального электрошока (МЭШ) и коразолового "титрования".

Опыты проведены на беспородных белых мышах обоего пола массой 18-25 г. Препарат вводили внутрь в виде взвеси, приготовленной на 1%-ной крахмальной слизи за 1,5-2 ч до воздействия судорожных агентов. Оценку противосудорожной активности при судорогах, вызываемых МЭШ, проводили по предупреждению тонической экстензии задних конечностей у мышей и повышению судорожного порога (СПК) по сравнению с контролем при коразоловом тесте с использованием расчетного метода непрямых разностей. Кроме того, для сравнительной оценки противосудорожного действия находили величину ЭД₅₀ (доза, вызывающая предупреждение тонической фазы судорог у 50% животных) по тесту МЭШ с использованием пробит-анализа по Литчфильду и Уилкоксону. Острую суточную токсичность определяли по Buchby и рассчитывали широту терапевтического действия (ШТД, ЛД₅₀/ЭД₅₀).

Экспериментальные данные острой суточной токсичности, противосудорожной активности и ШТД приведены в табл. 2, из которой видно, что исследованное соединение малотоксично (ЛД₅₀ > 2000 мг/кг), обладает выраженной противосудорожной активностью по тесту МЭШ и достоверно повышает СПК (в 1,5 раза) по сравнению с контролем. Величина ЭД₅₀ (по МЭШ) 103 мг/кг, ШТД 19,4.

По изученным показателям исследованное соединение имеет преимущества перед препаратом сравнения, применяемым в медицинской практике, N-бензиламидом β -хлорпропионовой кислоты (хлораконом). Так, по тесту МЭШ половинная эффективная доза, вызывающая предупреждение тонической фазы судорожного припадка, ниже в 2,3 раза, чем у хлоракона. Защитный индекс по коразоловому тесту и ШТД выше, чем у препарата сравнения.

Таким образом, соединение формулы I сернокислая соль 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрилмочевины является малотоксичным соединением, обладает более высокой противосудорожной активностью по скрининговым тестам по сравнению с применяемым препаратом хлораконом.

Использование: в медицине, так как продукт проявляет противосудорожную активность. Сущность: продукт - сернокислая соль 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрилмочевины формулы: БФ C₁₅H₁₆Cl₃₀·H₂SO₄. Реагент 1: 2-N-метиламино-5-хлорбенгидрол. Реагент 2: мочевина. Условия реакции: мочевину и серную кислоту выдерживают при 65 - 80°С, в смесь добавляют 2-N-метиламино-5- хлорбензгидрол при соотношении реагент 1 - реагент 2 - серная кислота, равном 5 : 7,5 - 20 : 20 - 25 (ммоль). 2 табл.

Сернокислая соль 2-N-метиламино-5-хлорбензгидрилмочевины формулы

проявляющая противосудорожную активность.