10-БЕНЗИЛ-2- ГИДРОКСИ -4-ОКСО-4Н- ПИРИМИДО/1,2-А/-БЕНЗИМИДАЗОЛ, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ НЕЙРОЛЕПТИЧЕСКУЮ, ПРОТИВОСУДОРОЖНУЮ, ПРОТИВОГИПОКСИЧЕСКУЮ, АНАЛЬГЕТИЧЕСКУЮ И АНТИНОЦИЦЕПТИВНУЮ АКТИВНОСТИ Российский патент 1995 года по МПК C07D487/04 

Изобретение относится к синтезу новых биологически активных веществ, конкретно, нейролептически активного соединения формулы
I
Аналогом по действию является аминазин.

Цель изобретения расширение ассортимента нейролептических средств путем создания нового препарата, более эффективного и менее токсичного, чем аминазин, сочетающего нейротропную, противосудорожную, противогипоксическую, анальгетическую и антиноципептивную активности.

Изобретение иллюстрируется описаниями синтеза, исследования физико-химических и фармакологических свойств нового соединения.

10-Бензил-2-гидрокси-4-оксо-4Н-пиримидо[1,2-а] бензимидазол (соединение I) получали в среде малонового эфира по схеме
+H₅C₂OOCCH₂COOC₂H I
П р и м е р. 2,23 г (0,01 моль) 2-амино-1-бензилбензимидазола растворяют в 4,5 мл (0,03 моль) малонового эфира и нагревают в течение 3 ч при температуре кипения реакционной смеси. Затем смесь охлаждают, осадок отфильтровывают, сушат и перекристаллизовывают из диметилформамида. Выход: 2,3 г (80% ).

Полученное соединение I представляет собой бесцветное кристаллическое вещество с четкой температурой плавления, растворимое в водных щелочах и диметилформамиде при нагревании, не растворимое в воде и минеральных кислотах.

Строение синтезированного соединения подтверждено данными элементного анализа и ИК-спектроскопии, а индивидуальность и чистота методом тонкослойной хроматографии (табл. 1).

Острую токсичность соединения I определяли в опытах на серых мышах обоего пола весом 18-22 г по методу Б.М. Штабского. Вещество вводили внутрибрюшинно в виде водной суспензии, стабилизированной эмульгатором твин-80. Смертность животных устанавливали через 24 ч и оценивали по тесту среднесмертельной дозы ЛД₅₀. ЛД₅₀ соединения I составляет около 980 мг/кг. Таким образом синтезированное соединение почти в 10 раз менее токсично, чем аминазин, ЛД₅₀ которого 100 мг/кг.

Первичное исследование нейротропной активности синтезированного соединения проводили по следующим критериям: общему влиянию на поведение, двигательную активность, мышечную координацию, работоспособность в условиях предельной нагрузки и степени потенцирования действия барбитуратов.

Введение соединения I интактным животным (крысы и мыши) в дозе 100 мг/кг и выше вызывало вялость, снижение двигательной активности и ответной реакции на прикосновение, а при дозах, близких к ЛД₅₀ глубокий сон.

Тесту на мышечную координацию (сцепление) подвергали серых мышей обоего пола весом 18-22 г (по 10 животных в каждом опыте), которые за 1 ч до испытания получали соединение I в дозе 1/10 ЛД₅₀ (100 мг/кг), аминазин (5 мг/кг 1/20 ЛД₅₀) и физиологический раствор (контрольная группа). Мышей подвешивали за передние лапки к натянутой горизонтально металлической сетке. Контрольные мыши в течение первых 5 c сцеплялись за проволоку всеми четырьмя лапками. В опытах отмечали число животных, которые были не способны коснуться сетки по крайней мере одной из задних лапок. Соединение 1 вызывало нарушение мышечной координации у шести мышей из девяти, а аминазин у пяти.

Влияние исследуемого вещества на работоспособность в условиях предельной нагрузки испытывали по тесту "плавание". Опыты проводили на тех же животных, что и в предыдущем эксперименте. Мышей помещали в "плавательный бассейн" при температуре воды 20± 0,5^оС и регистрировали время плавания до момента погружения.

В результате проведенных исследований установили (табл. 2), что соединение I вызывает статистически достоверное (Р<0,05) снижение работоспособности в условиях предельной нагрузки на 48% (аминазин на 25%).

В серии опытов, проведенных на крысах Вистар весом 130-200 г, изучали влияние исследуемого соединения I на латентный период и продолжительность этаминал-натриевого сна. В каждом опыте использовали 7 животных. Подопытные крысы первой группы получали соединение I в дозе 100 мг/кг внутрибрюшинно в виде водно-солевой суспензии. Животные второй группы раствор аминазина в дозе 5 мг/кг (1/20 ЛД₅₀), так как в большей дозе препарат оказывает токсическое действие и вызывает судороги. Контрольные животные получали физиологический раствор в том же объеме. Через 30 мин крысам вводили внутрибрюшинно раствор этаминала-натрия в дозе 30 мг/кг и регистрировали латентный период действия барбитурата. О продолжительности этаминал-натриевого сна судили по времени, в течение которого крысы находились в боковом положении, т.е. с момента утраты рефлекса переворачивания.

Установлено (табл. 2), что соединение I вызывает статистически достоверное (Р< 0,05) сокращение латентного периода этаминал-натриевого сна на 76% (на 30 активнее аминазина), что свидетельствует о его непосредственном угнетающем влиянии на центральную нервную систему экспериментальных животных. Продолжительность этаминал-натриевого сна увеличилась на 40% (эффект аминазина равен 38%).

Таким образом, соединение I более активно, чем аминазин, потенцирует действие барбитурата, вызывает снижение двигательной активности и мышечной координации и понижает работоспособность в условиях предельной нагрузки.

Противосудорожное действие соединения I исследовали на модели клонико-тонических судорог, вызываемых стрихнином. Опыты проводили на серых мышах обоего пола весом 20-22 г (по 10 животных в каждой группе). Соединение I назначали внутрибрюшинно в дозе 100 мг/кг за 1 ч до испытания. Судороги воспроизводили подкожным введением летальной дозы стрихнина сульфата (3 мг/кг). В качестве препарата сравнения использовали фенобарбитал в дозе 20 мг/кг. Контрольные мыши получали физраствор. Оценку противосудорожного действия веществ проводили, учитывая латентный период наступления судорог, латентный период наступления смерти и общую продолжительность жизни экспериментальных животных.

Как видно из результатов опытов, приведенных в табл. 3, соединение I увеличивает латентный период наступления судорог на 31% относительно контроля, удлиняет латентный период наступления смерти (лишь половина животных погибает сразу) и достоверно (Р<0,05) увеличивает среднюю продолжительность жизни на 26%
Исследование противогипоксической активности соединения I проводили на модели гипоксической гипоксии с гиперкапнией (нормобарической). Гипоксию воспроизводили, помещая серых мышей (вес 18-22 г) в гермокамеру объемом 250 см³ при нормальном атмосферном давлении и температуре 20±2^оС. Вещество вводили в дозе 100 мг/кг внутрибрюшинно за 30 мин до опыта. В качестве препарата сравнения использовали известный противогипоксант оксибутират натрия в дозе 200 мг/кг. Контрольные животные получали физраствор. О наличии противогипоксической активности судили по увеличению времени выживания мышей в гермокамере до полной остановки дыхания.

Установлено (табл. 3), что соединение I увеличивает продолжительность жизни животных на 62% (на 18% активнее препарата сравнения).

Анальгетическое действие соединения I исследовали на модели "уксусных корчей", вызываемых внутрибрюшинной инъекцией 3%-ного раствора уксусной кислоты в дозе 300 мг/кг. Опыты проводили на серых мышах обоего пола весом 18-22 г по 7 в каждой группе. Исследуемое соединение и препарат сравнения анальгин вводили перорально в дозах 100 и 55 мг/кг соответственно за 30 мин до опыта. Мыши контрольной группы получали физраствор. В течение 20 мин после инъекции уксусной кислоты учитывали количество судорожных сокращений брюшных мышц (табл. 4), сопровождающихся вытягиванием задних конечностей и прогибанием спинки ("корчи").

Анальгетическую активность оценивали и анализировали с учетом антиноцицептивного действия соединения I на модели формалиновой болевой реакции (ФБР). Опыты проводили на мышах самцах весом 18-22 г, которым под кожу спинки вводили 25 мкл 0,5% -ного раствора формалина. Соединение I и анальгин вводили за 1 ч до нанесения болевого раздражителя перорально в тех же дозах. Оценку антиноцицептивной активности проводили, учитывая число облизываний мышами брюшка или спинки в течение первых пяти минут (1-я фаза ФБР) и 15-20 мин (2-я фаза). Контрольные животные получали физраствор.

Из результатов опытов, приведенных в табл. 4, видно, что испытуемое вещество статистически достоверно (P<0,05) снижает болевую реакцию на введение кислоты на 33% и формалиновую болевую реакцию в первой фазе на 69% что позволяет предположить наличие центрального механизма угнетения боли.

Таким образом установлено, что 10-бензил-2-гидрокси-4-оксо-4Н-пиримидо[1,2-a] бензимидазол (соединение I) в 10 раз менее токсичен, чем аминазин, на 30% активнее потенцирует действие этаминала-натрия, вызывает снижение мышечной координации и работоспособности в условиях предельной нагрузки и повышает выживаемость животных при кислородной недостаточности, т.е. по всей вероятности, оказывает седативный эффект. В отличие от аминазина, который потенцирует действие противосудорожных средств, но в отдельных случаях вызывает судорожные явления, 10-бензил-2-гидрокси-4-оксо-4Н-пиримидо[1,2-a]бензимидазол обладает значительным противосудорожным действием. Кроме того, предлагаемое соединение I проявляет анальгетическую активность в условиях "уксусной" болевой реакции, в генезе которой основную роль играют эндогенные кинины. образующиеся при понижении рН среды, и угнетает центральный компонент формирования боли.

Таким образом, важным преимуществом предлагаемого соединения 10-бензил-2-гидрокси-4-оксо-4Н-пиримидо[1,2-а]бен- зимидазола является комплексное действие, которое проявляется в выраженной нейролептической, противосудорожной, противогипоксической, анальгетической и антиноцицептивной активности при низкой токсичности, что могло бы значительно расширить область применения его в качестве нейролептика.

Использование: в качестве нейролептически активного соединения. Сущность изобретения: продукт 10-бензил-2-гидрокси-4-оксо-4H-пиримидо [1,2-а] бензимидазол ф-лы 1. БФ C₁₇H₁₃N₃O₂ выход 80% т.пл. 233-235°С. Реагент 1: 2-амино-1-бензилбензимидазол. Реагент 2: H₅C₂OOCCH₂COOC₂H₅. Условия реакции: в среде малонового эфира при нагревании. Структура формулы 1 указана в тексте описания. 4 табл.

10 Бензил 2 гидрокси 4 оксо 4Н пиримидо (1,2 а) бензимидазол формулы

проявляющий нейролептическую, противосудорожную, противогипоксическую, анальгетическую и антиноцицептивную активности.