ПРОИЗВОДНЫЕ АДЕНОЗИНА Российский патент 1996 года по МПК C07H19/16 

Изобретение касается новых производных аденозина. Указанные соединения проявляют активность ингибиторов липолиза и могут найти применение в медицине.

Таким образом, в соответствии с настоящим изобретением предлагаются соединения формулы (I):
в которой R представляет циклопентильное кольцо, замещенное гидрокси-группой и, необязательно, замещенное С_1-6-алкильной группой; и их соли и сольваты.

Когда группа R содержит один или несколько асимметричных атомов углерода, настоящее изобретение включает все получающиеся в результате диастереоизомеры и их смеси.

Конкретные примеры группы R включают 2-гидроксициклопентил, 2-гидрокси-2-метилциклопентил и 3-гидроксициклопентил.

Когда группа R замещена C_1-6-алкильной группой, такой группой в предпочтительном варианте является С_1-3-алкильная (например, метильная) группа.

Подходящие приемлемые с физиологической точки зрения соли соединений общей формулы (I) включают кислотно-аддитивные соли, получаемые из неорганических или органических кислот, такие как сульфаты, фосфаты, бензоаты, камфорсульфонаты, паратолуолсульфонаты, метансульфонаты, сульфаматы, аскорбаты, тартраты, цитраты, малеаты, салицилаты, фумараты, сукцинаты, лактаты, глютараты, глютаконаты, ацетаты или трикарбаллилаты. Сольватами могут быть, например, гидраты.

Особенно предпочтительным классом соединений формулы (I) является класс, в котором R представляет 2-гидроксициклопентильную или 2-гидрокси-2-метилциклопентильную группу.

Предпочтительными соединениями в соответствии с настоящим изобретением являются; N-[(1S, транс)-2-гидроксициклопентил]аденозин; N-[(1R, транс)-2-гидроксициклопентил] аденозин; и их смеси: N-(цис-2-гидроксициклопентил)аденозин; N-(2 β-гидрокси-2-метилциклопентил)аденозин и приемлемые с физиологической точки зрения их соли и сольваты.

Особенно предпочтительными соединениями в соответствии с настоящим изобретением являются: N-[(1S, транс)-2-гидроксициклопентил]аденозин и N-[(1R, транс)-2-гидроксициклопентил] аденозин и их смеси, а из них еще более предпочтительным является N-[1S, транс)-2-гидроксициклопентил]аденозин и его приемлемые с физиологической точки зрения соли и сольваты.

Испытания на животных показали, что предлагаемые соединения являются ингибиторами липолизы, то есть они снижают концентрации свободных жирных кислот в плазме. Испытания, проведенные на крысах, которых держали в голоде в течение 24 ч, а затем давали им орально предлагаемые соединения в дозе 1 мг/кг, показали, что соединения примеров 1,2,3 и 5 уже, спустя 1 ч после назначения, все понижали концентрацию неэтерифицированных жирных кислот более чем на 50%
Что касается токсикологии, соединения обычно не токсичны в дозах, при которых они проявляют терапевтическую эффективность.

Так, например, соединение примера 1 не вызвало никаких явных признаков токсичности при назначении собакам орально в дозе вплоть до не менее 3 мг/кг.

Была подтверждена их способностью снижать концентрацию неэтерифицированных жирных кислот (НЭЖК) у голодающих крыс, которым соединение вводили орально.

Наряду с их анти-липолитическим действием предлагаемые соединения могут независимо воздействовать на сердечную функцию, уменьшая частоту ударов сердца в минуту и проводимость. Таким образом, предлагаемые соединения можно использовать при терапии ряда сердечно-сосудистых расстройств, например, сердечной аритмии, в частности после инфаркта миокарда и ангины. Эти соединения могут также ингибировать высвобождение ренина и, таким образом, их можно использовать при лечении гипертонии и сердечной недостаточности. Эти соединения могут быть использованы в качестве CNS-агентов (например, в качестве снотворных, седативных, аналептических и/или противосудорожных агентов).

Ввиду этого предлагаются соединения формулы (I) или их приемлемые с физиологической точки зрения соли или сольваты, пригодные для использования при лечении человека или животного, страдающих от заболеваний, требующих снижения концентрации свободных жирных кислот в плазме и/или снижения частоты сердцебиений и проводимости.

Предлагаемые соединения могут применяться в виде фармацевтической композиции, которая содержит в качестве активных ингредиентов по крайней мере одно соединение формулы (I) или его приемлемую с физиологической точки зрения соль или сольват вместе с приемлемым с фармацевтической точки зрения носителем и/или наполнителем. Такие композиции могут быть составлены при помощи известных приемов с использованием одного или нескольких приемлемых с физиологической точки зрения носителей и/или наполнителей.

Композиции могут быть составлены для орального, защечного, парэнтерального или ректального применения или в форме, пригодной для применения при помощи ингаляции или вдувания. Оральное применение предпочтительно.

Доза предлагаемых соединений для применения к человеку (весом приблизительно 70 кг) составляет от 2 мг до 2 г, в предпочтительном варианте от 10 мг до 1 г, активного ингредиента на единичную дозу, которую можно применять, например, 1-4 раза в день. Может оказаться необходимым внести известные изменения в дозировку в зависимости от возраста и состояния пациента. Дозировка будет также зависеть от способа применения.

Соединения формулы (I) или его приемлемые с физиологической точки зрения соли или сольваты могут применяться для получения медицинских препаратов для лечения человека или животного, страдающих от заболеваний, требующих снижения концентрации свободных жирных кислот в плазме и/или снижения частоты сокращений сердца и проводимости.

Соединения формулы (I) и приемлемые с физиологической точки зрения их соли или сольваты могут быть получены при помощи процедур, описанных ниже. В приводимом ниже описании группа R является группой, которая была определена для соединений формулы (I), если не указано противное.

В соответствии с первой общей процедурой (А) соединение формулы (I) может быть получено в результате взаимодействия соединения формулы (II):
(II) в которой L представляет удаляемую группу, такую как атом галогена (например, атом хлора), или группу триметилсилилокси; или его защищенного производного с соединением формулы RNH₂, или его солью, или его защищенным производным при щелочных условиях, с последующим, если необходимо, удалением всех защищающих групп, как это описано, например, в процедуре (D). Соединения формул (II) и RNH₂ могут быть защищены, например, так, как это описано ниже, так, соединение формулы (II) может быть защищено, например, как изопропилиденовое, трибензоильное или триацетильное производное, а соединение формулы RNH₂ может быть защищено, например, как N-бензильное производное.

Эту реакцию можно осуществлять либо в присутствии растворителя, либо без него; в первом случае можно использовать такой растворитель, как спирт (например, низший алканол, такой как пропан-2-ол или трет. бутанол), простой эфир (например, тетрагидрофуран или диоксан), замещенный амид (например, диметилформамид), галоидированный углеводород (например, хлороформ) или ацетонитрил в предпочтительном варианте при повышенной температуре (например, до температуры дефлегмации растворителя) в присутствии соответствующего акцептора кислоты, например, неорганических оснований, таких как карбонат натрия или калия или органических оснований, таких как триэтиламин, диизопропилэтиламин или пиридин, или окислов алкилена, таких как окись этилена или окись пропилена.

Соединения формул (II) и RNH₂ и их защищенные производные являются известными соединениями или могут быть получены при помощи известных приемов, например, как это описано ниже.

В соответствии с еще одной общей процедурой (В) соединение формулы (I) может быть получено в результате перегруппировки соединения формулы (III):
(III) или его защищенного производного при помощи нагревания в присутствии основания, такого как гидрат окиси щелочного металла (например, гидроокиси натрия) или карбоната щелочного металла (например, карбоната натрия) и в предпочтительном варианте в растворителе, таком как водный раствор спирта (например, этанола), далее в тех случаях, когда это необходимо, осуществляют удаление защищающих групп. Эту реакцию можно осуществить при температуре от 50 до 100^оС.

Соединение формулы (III) и его защищенные производные могут быть получены в результате взаимодействия соединения формулы (IV):
(IV) или его защищенного производного с сильным основанием, таким как реагент Гриньяра (например, хлоридом изопропилмагния) с последующим взаимодействием с алкилирующим агентом, способным ввести необходимую группу R, такую как подходящий галоидгидрин или эпоксид. Так, например, когда R является 2-гидроксициклопентильной группой, таким соединением может быть циклопентеноксид.

Соединения формулы (IV) и их защищенные производные являются либо известными соединениями, либо могут быть получены при помощи известных приемов.

В соответствии с еще одной общей процедурой (С), соединение формулы (I) может быть получено при помощи гидрирования соединения формулы (V):
(V) в которой Х представляет атом водорода, а R^' представляет циклопентильное кольцо, замещенное гидрокси-группой и, необязательно, замещенное С_1-6-алкильной группой; или Х представляет атом хлора, а R^"представляет группу R, как она была определена ранее; или его защищенного производного с последующим, если это необходимо, удалением защищающих групп. Когда Х представляет атом хлора, гидрирование осуществляют в присутствии уловителя кислоты, такого как ацетат натрия.

Гидрирование в соответствии с общей процедурой (С) может быть осуществлено с использованием известных приемов, например, с использованием водорода в присутствии благородного металла в качестве катализатора (например, палладия, никеля Рэни, платины или родия). Катализатор может содержаться на носителе, например на древесном угле или окиси алюминия, или в качестве альтернативы это может быть гомогенный катализатор, такой как хлорид трис(трифенилфосфин)родия. Гидрирование в общем случае осуществляют в растворителе, таком как спирт (например, метанол или этанол), простой эфир (например, тетрагидрофуран или диоксан), сложный эфир (например, этилацетат) или вода, или в смеси растворителей (например, в смеси двух или более упомянутых) при температуре в области от -20 до +100^оС и при давлении от 1 до 10 атм.

Соединения формулы (V), в которой Х представляет атом водорода, и их защищенные производные могут быть получены, например, в результате взаимодействия соединения формулы (II) или его защищенного производного с соединением формулы R' NH₂, в которой R' уже был определен ранее, или его соли с использованием условий, описанных в процедуре (А).

Соединения формулы (V), в которой Х представляет атом хлора, могут быть получены, например, при помощи процедуры, аналогичной процедуре (А), например, в результате взаимодействия 2,6-дихлорпурин- β-D-рибозида или его защищенного производного с соединением формулы RNH₂ или его солью, или защищенным производным, используя условия, описанные в процедуре (А).

В описанных выше превращениях может оказаться необходимым или желательным защищать любые чувствительные группы в соединении, о котором идет речь, чтобы избежать нежелательных побочных реакций. Например, может оказаться необходимым защитить гидроксильные группы в соединении формул (II), (III), (IV) или (V) или атом азота в соединении формулы RNH₂.

Примеры соответствующих защищающих групп включают ацил (например, гидрокарбилкарбонильные группы, такие как ацетил, бензоил, пивалоил или октаноил); алкил (например, метил, трет. -бутил и метоксиметил); аралкил (например, бензил, дифенилметил, трифенилметил и пара-метоксифенилдифенилметил); силил (например, триалкилсилил, такой как третичн.-бутилдиметилсилил). Кроме того, две примыкающие гидроксильные группы могут быть защищены алкилиденовой (например, изопропилиденовой) группой или дисилоксанильной (например, 1,1,3,3-тетраизопропилдисилокс-1,3-диильной) группой. Особенно предпочтительными защищенными производными соединений формул (II), (III), (IV) и (V) являются производные изопропилидена, трацетила, трибензоила и три-трет.-бутилдиметилсилила.

Примеры соответствующих N-защищающих групп для соединения формулы RNH₂ включают арилметил (например, бензил); ацил (например, ацетил) и силил (например, триметилсилил).

Так, в соответствии с еще одной общей процедурой (D) соединение формулы (I) может быть получено при помощи удаления любых защищающих групп из защищенного производного соединения формулы (I). Снятие защиты может быть осуществлено с использованием известных приемов [1]
Так, например, ацильные ОН-защищающие группы могут быть удалены с использованием метанола в присутствии основания, такого как карбонат калия, трет. -бутиламин или аммиак. Изопропилиденовая группа может быть удалена при помощи катализируемого кислотой гидролиза (например, с использованием трифторуксусной или серной кислоты). Трет. -бутилдиметилсилильные группы могут быть удалены при помощи щелочного гидролиза (например, с использованием гидрата окиси натрия в этаноле).

N-бензильная группа может быть удалена при помощи гидролиза в присутствии катализатора (например, палладия на древесном угле), например, как это описано в процедуре (С). N-ацильная группа (например, ацетильная группа) или триметилсилильная группа может быть удалена при кислотных или щелочных условиях (например, с использованием разбавленной хлористоводородной кислоты или гидрата окиси натрия).

Специальные диастереоизомеры соединения формулы (I) могут быть получены при помощи известных приемов, например, в результате синтеза из подходящего асимметричного исходного материала с использованием любой из процедур, описанных выше, или, где это уместно, при помощи разделения смеси изомеров соединения формулы (I) с использованием известных средств, например, при помощи фракционной кристаллизации или хроматографии.

В общих процедурах, описанных выше, соединение формулы (I) может быть получено в форме соли, в предпочтительном варианте в форме приемлемой с физиологической точки зрения соли. Токсичные соли могут представлять ценность в качестве промежуточных соединений при получении приемлемых с физиологической точки зрения солей соединений формулы (I). Там, где это желательно, такие соли могут быть превращены в соответствующие свободные основания с использованием известных приемов.

Приемлемые с физиологической точки зрения соли соединений формулы (I) могут быть получены в результате взаимодействия соединения формулы (I) с подходящей кислотой или основанием в присутствии соответствующего растворителя, такого как ацетонитрил, ацетон, хлороформ, этилацетат или спирт (например, метанол, этанол или изопропанол).

Приемлемые с физиологической точки зрения соли могут быть также получены из других солей, включающих другие, приемлемые с фармацевтической точки зрения соли соединений формулы (I), используя известные приемы.

Настоящее изобретение ниже иллюстрируется при помощи следующих промежуточных соединений и примеров. Температуры приведены в ^оС. Органические экстракты сушат над безводным сульфатом натрия. Тонкослойную хроматографию (т.с. х.) осуществляют на двуокиси кремния. Хроматографию с использованием колонок осуществляют на двуокиси кремния (Мерк 7734), а двуокись кремния, на которой адсорбируется реакционная смесь, также имеет тип Мерк 7734. Мгновенную хроматографию на колонке (FCC) осуществляют на двуокиси кремния (Меркс 9385). Флоризил имеет размер частиц 60-100 меш (0,32-0,149 мм). Используются следующие сокращения: Система А дихлорметан: этанол: 0,88 раствор аммиака; Система В этил ацетат метанол; ДЭА-N,N-диизопропилэтиламин; ТГФ тетрагидрофуран. ¹Н-Я.М.Р.-спектры получали в области 250 МГц для разбавленных растворов в диметилсульфооксиде.

Промежуточное соединение I.

(Фенилметиловый) сложный эфир 3-аза-2-оксабицикло[2.2.1]гептан-3-карбоновой кислоты.

Азодикарбонамид (5,0 г) перемешивали с раствором гидрата окиси калия (7,0 г) в воде (12 мл) при температуре 4^оС. После перемешивания в ледяной ванне в течение 1 ч смесь разбавляли льдом/водой (30 мл) и раствор фильтровали. Фильтрат разбавляли холодным (2^оС) этанолом (100 мл), и полученное в результате твердое вещество отделяли фильтрацией, промывали этанолом, метанолом и простым эфиром, чтобы получить азодикарбоксилат калия (6,9 г). Затем его смешивали с (фенилметиловым) сложным эфиром 3-аза-2-оксабицикло[2.2.1] гепт-5-ен-3-карбоновой кислоты (0,82 г) в сухом пиридине (60 мл) и при перемешивании при комнатной температуре добавляли уксусную кислоту (2,02 г). Через 1 ч добавляли еще одну порцию ледяной уксусной кислоты (2,02 г) и реакционную смесь перемешивали в течение 15,5 ч. Смесь выпаривали до сухого состояния при пониженном давлении. Кроме того, добавляли уксусную кислоту, чтобы удалить оставшийся желтый цвет соединения, предшествующего диимиду. Остаток разделения между 0,5 М раствором лимонной кислоты (75 мл) и этил ацетатом (75 мл), а органическую фазу отделяли, сушили и концентрировали под вакуумом. Остаток подвергали очистке при помощи FCC, элюируя этил ацетатом: циклогексаном (1:2), получая названное соединение (0,69 г) в виде масла.

Т.с.х. (циклогексан:этил ацетат, 2:1) Rf 0,25.

Промежуточное соединение 2.

(Фенилметиловый) сложный эфир N-(цис-3-гидроксициклопентил)-карбаминовой кислоты.

Раствор (фенилметил) сложного эфира 3-аза-2-оксабицикло[2.2.1]гептан-3-карбоновой кислоты (0,5 г) в ледяной уксусной кислоте (0,5 мл) добавляли в перемешиваемую суспензию порошкообразного цинка (0,35 г) в смеси уксусной кислоты и воды (1:1, 4 мл), эту смесь перемешивали при 60^оС в течение 7,5 ч. Добавляли дополнительное количество цинкового порошка (0,14 г) и уксусную кислоту (1 мл), перемешивание продолжали еще в течение 16,5 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь фильтровали и избыток цинка промывали 2М раствором хлористоводородной кислоты (20 мл). Соединенные фильтрат и промывочные жидкости нейтрализовали 8%-ным карбонатом натрия и экстрагировали в этил ацетате (3х30 мл). Соединенные органические экстракты промывали соляным раствором (30 мл), сушили и концентрировали под вакуумом. После очистки при помощи FCC, элюируя этилацетатом:циклогексаном (1:1), получали масло (120 мг), которое отверждалось при выдерживании; его подвергали рекристаллизации из циклогексана, получая соединение, указанное в заголовке примера (70 мг), температура точки плавления 62-63^оС.

Промежуточное соединение 3.

(Фенилметиловый) сложный эфир транс-N-[3-(формилокси)циклопентил]карбаминовой кислоты.

Диэтил азодикарбоксилат (1,78 г) по каплям добавляли в перемешиваемый раствор (фенилметилового) сложного эфира N-(цис-3-гидроксициклопентил)карбаминовой кислоты (1,19 г), трифенилфосфина (2,68 г) и муравьиной кислоты (0,47 г) в ТГФ (65 мл) в атмосфере азота при комнатной температуре. Полученный в результате раствор перемешивали в течение 2 ч и концентрировали, чтобы получить остаток, который перемешивали в простом эфире (20 мл) при температуре примерно -10^оС в атмосфере азота в течение 1 ч. Смесь разбавляли циклогексаном (20 мл), а твердый материал фильтровали и промывали простым эфиром циклогексаном (1:1; 3 x приблизительно 20 мл). Соединенные фильтрат и промывочные жидкости концентрировали, а полученный остаток подвергали очистке при помощи FCC, элюируя этил ацетатом циклогексаном (2:3), получая соединение, указаннoе в заголовке примера (1,18 г). Температура точки плавления 45-48^оС.

Промежуточное соединение 4.

Хлоргидрат транс-3-аминоциклопентанола.

Раствор (фенилметилового) сложного эфира транс N-[3-(формилокси)циклопентил] карбаминовой кислоты (1,1 г) в этаноле (40 мл) перемешивали с карбонатом калия (0,25 г) при комнатной температуре в течение 1 ч. Эту смесь затем фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученное в результате полутвердое вещество растворяли в этил ацетате (50 мл), фильтровали, а фильтрат концентрировали под вакуумом, чтобы получить твердое вещество, которое подвергали гидрированию в этаноле (50 мл) с 5%-ным палладием на углероде (200 мг) в качестве катализатора при давлении в одну атмосферу в течение 20 ч. Затем катализатор заменяли на свежий 5%-ный палладий на углероде (200 мг) и процесс гидрирования продолжали еще 20 ч. Реакционную смесь фильтровали, а фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток подвергали очистке при помощи FCC, элюируя системой А (40:10:1), чтобы получить масло (0,26 г), которое разбавляли этанолом (40 мл), подкисляли 3М раствором в этаноле хлористого водорода и концентрировали под вакуумом, получая названное в заголовке соединение (0,34 г).

Т.с.х. (система А, 40:10:1) Rf 0,1.

Промежуточное соединение 5. 1,6-дигидро-1-(транс-2-оксициклопентил)-6-амино-9-[[2,3,5-трис-0-(1,1-димети лэтдиметилсилил] β-D-рибофуранозил]-9Н-пурин.

Хлорид изопропилмагния (2,0 М раствор в ТГФ; 1,23 мл) добавляли в охлажденный раствор 2' 3' 5' -трис-0-[(1,1-диметилэтил)диметилсилил]аденозина в сухом ТГФ (20 мл). После перемешивания в течение 15 мин добавляли раствор циклопентеноксида (0,206 г) в сухом ТГФ (5 мл) и раствор нагревали до дефлегмации на 3 дня. Добавляли этил ацетат (50 мл) и воду (50 мл), и фазы разделяли. Органическую фазу промывали водой (50 мл), сушили и выпаривали при пониженном давлении. В результате очистки остатка при помощи хроматографической колонны, элюируя системой А (800:40:1), получали соединение, названное в заголовке в виде пены (0,56 г).

Т.с.х. (система А, 800:40:1), Rf 0,54.

Промежуточное соединение 6.

N-[(1S, транс)-2-оксициклопентил]-2',3'-0-[1-метилэтилиден]-аденозин.

Смесь 6-хлор-9-[2' 3' -0-(1-метилэтилиден)- β-D-рибофуранозил]пурина (25,0 г), хлоргидрата (1S, транс)-2-аминоциклопентанола (12,64 г), ДЭА (29,67 г) и хлороформа (250 мл) перемешивали и нагревали до температуры дефлегмации в атмосфере азота на 20 ч. Полученный в результате раствор охлаждали до примерно 20^оС и промывали 1М водным раствором лимонной кислоты (2х150 мл). Соединенные водные слои экстрагировали хлороформом (2х100 мл). Соединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении, чтобы получить пену. Изопропил ацетат (750 мл) добавляли в пену, полученный в результате раствор концентрировали до объема 500 мл при пониженном давлении, получая шлам, который охлаждали до 5^оС. Твердое вещество изолировали фильтрацией, промывали изопропил ацетатом (2х50 мл) и сушили под вакуумом при 40^оС, получая соединение, названное в заголовке (24,8 г), температура точки плавления 177-178^оС.

Промежуточное соединение 7.

2' 3' 5' -три-0-ацетил-N-[(1S, транс)-2-оксициклопентил]аденозин.

Смесь 2' 3' 5' -три-0-ацетил-6-хлорпурин-β -D-рибозида (1,06 г), (1S, транс)-2-аминоциклопентанол хлоргидрата (0,41 г) и бикарбоната натрия (0,50 г) в изопропаноле (12 мл) нагревали до температуры дефлегмации на 4 ч. Смесь выпаривали, и остаток подвергали очистке при помощи хроматографической колонны, элюируя системой В (50:1), получали соединение, названное в заголовке (0,71 г) в виде стекла.

Т.с.х. (система В, 50:1) Rf 0,21.

Промежуточное соединение 8.

N-[(1S, транс)-2-гидроксициклопентил]-N-(фенилметил)аденозин.

Смесь 6-хлорпурин- β-D-рибозида (688 мг), (1S, транс)-2-[(фенилметил)амино]циклопентанола (516 мг) и ДЭА (0,67 г) в изопропаноле (20 мл) перемешивали и нагревали до температуры дефлегмации в атмосфере азота 7 дней. Смесь затем адсорбировали на двуокиси кремния и очищали с использованием хроматографической колонны, элюируя cистемой А (75:8:1), чтобы получить пену ( 0,86 г ), которую повторно подвергли очистке на хроматографической колонне, элюируя этил ацетатом этанолом (4:1), получая масло (700 мг). Его растворяли в этил ацетате (10 мл), и полученный в результате раствор сливали в циклогексан (30 мл), получали соединение, названное в заголовке (597 мг) в виде твердого вещества.

Т.с.х. (система А, 75:8:1), Rf 0,21.

Промежуточное соединение 9.

N-(цис-2-гидроксициклопент-4-енил)аденозин.

Смесь 6-хлорпурин- β-D-рибозида (2,01 г), хлоргидрата цис-2-оксициклопент-4-ениламина (1,42 г), ДЭА (3,19 г) и изопропанола (100 мл) нагревали до температуры дефлегмации на 22 ч. Полученный в результате раствор адсорбировали на двуокиси кремния и подвергали очистке с использованием хроматографической колонны, элюируя системой В (5:1), получали соединение, названное в заголовке (1,7 г) в виде пены.

Т.с.х. (система А, 50:8:1), Rf 0,11.

Результаты анализа. Найдено: С 49,5, Н 5,6, N 18,9.

С₁₅Н₁₉N₅O₅·0,9 Н₂О требует С 49,3, Н 5,7, N 19,2%
Промежуточное соединение 10.

2-хлор-N-[(1S, транс)-2-гидроксициклопентил]аденозин.

Смесь 2,6-дихлор-9-(2'3'5' -три-0-бензоил-β- D-рибофуранозил)-9Н-пурина (1,68 г), хлоргидрата (1S, транс)-2-аминоциклопентанола (380 мг) и ДЭА (1,4 мл) в изопропаноле (25 мл) перемешивали и нагревали до температуры дефлегмации на 5,5 ч в атмосфере азота. Смесь концентрировали под вакуумом, раствор остатка в метаноле (25 мл) обрабатывали водным раствором аммиака (2 мл). Полученную в результате смесь перемешивали в течение 16 ч, а затем концентрировали под вакуумом. Остаток подвергали очистке на хроматографической колонне, элюируя системой А (75:8:1), получая пену (570 мг). Ее растворяли в этил ацетате (10 мл), и полученный в результате раствор сливали в циклогексан (80 мл), получали твердое вещество. Твердое вещество и маточный раствор кристаллизации соединяли, концентрировали под вакуумом, а остаток растворяли в метаноловом растворе аммиака (10 мл). Раствор выдерживали в течение 4 дней, а затем концентрировали под вакуумом, получая масло (570 мг), которое подвергали очистке на хроматографической колонне, элюируя системой А (50:8: 1), получали соединение, названное в заголовке (212 мг). Т.с.х. (система А, 50:8:1), Rf 0,16.

Результаты анализа. Найдено: C 45,9, H 5,55, N 16,7. C₁₅H₂₀ClN₃O₅^.0,5 C₂H₆O · 0,6H₂O требует С 45,85, Н 5,7, N 16,7%
П р и м е р 1. N-[(1S, транс)-2-гидроксициклопентил]аденозин.

Смесь 6-хлорпурин- β-D-рибозида (2,87 г) и хлоргидрата (1S, транс)-2-аминоциклопентанола (1,38 г) нагревали до температуры дефлегмации в изопропаноле (100 мл), содержащем ДЭА (3,87 г), на 18 ч. В охлажденный раствор добавляли силикагель (20 г) и суспензию выпаривали при пониженном давлении. Высушенный носитель добавляли в колонну из силикагеля (250 г) и элюировали системой В (9: 1). Соответствующие элюаты собирали и выпаривали при пониженном давлении, получая белый порошок. После кристаллизации из этил ацетата и метанола получали соединение, названное в заголовке в виде белого порошка (2,3 г), температура плавления 163-164^оС.

Т.с.х. (система В, 9:1), Rf 0,23.

П р и м е р 2. N-[(1R, транс)-2-гидроксициклопентил]аденозин.

Смесь 6-хлорпурин-β -D-рибозида (2,87 г) и хлоргидрата (1R, транс)-2-аминоциклопентанола (1,38 г) нагревали до температуры дефлегмации в изопропаноле (100 мл), содержащем ДЭА (3,87 г),на 18 ч. При охлаждении порошок осаждали, его отделяли фильтрацией, промывали пропан-2-олом (50 мл) и сушили под вакуумом, получали соединение, названное в заголовке (2,35 г), температура точки плавления 235-236^оС.

Т.с.х. (система В, 9:1), Rf 0,23.

П р и м е р 3. N-(2β -гидрокси-2-метилциклопентил)аденозин.

Смесь 6-хлорпурин-β -D-рибозида (1,0 г) и хлоргидрата транс-2-амино-1-метилциклопентанола (0,55 г) в изопропаноле (50 мл), содержащем ДЭА (1,35 г), нагревали до температуры дефлегмации на 24 ч. Суспензию адсорбировали на двуокиси кремния и подвергали очистке при помощи хроматографической колонны, элюируя системой В (9:1), получая порошок. После кристаллизации из изопропил ацетата и метанола получали названное соединение (0,75 г).

Т.с.х. (система В, 9:1), Rf 0,35.

Результаты анализа. Найдено: С 50,9, Н 6,6, N 18,0; С ₁₆Н₂₃N₅O₅·0,1C₅H₁₀O₂· 0,75 H₂O требует С 51,1, Н, 6,5, N 18,05%
П р и м е р 4. N-(цис-3-гидроксициклопентил)аденозин.

6-хлорпурин- β-D-рибозид (1,0 г), цис-3-аминоциклопентанол (0,48 г) и ДЭА (0,96 г) перемешивали при температуре дефлегмации в изопропаноле (50 мл) в течение 30 ч. Раствору давали возможность охладиться до комнатной температуры и концентрировали под вакуумом. После очистки при помощи FCC, элюируя системой А (50:10:1), получали целевое соединение (0,9 г) в виде пены.

Т.с.х. (система А, 50:10:1), Rf 0,4.

Результаты анализа. Найдено: С 50,3, Н 6,3, N 18,9. С₁₅Н₂₁N₅O₅·0,5H₂O· 0,2C₄H₈O₂ требует С 50,1, Н 6,2, N 19,0%
П р и м е р 5. N-(цис-2-гидроксициклопентил)аденозин.

Смесь N-(цис-2-гидроксициклопент-4-енил)аденозина (1,6 г), 5% палладия на древесном угле (0,3 г) и этанола (80 мл) перемешивали в присутствии водорода в течение 20 ч. Полученную в результате смесь фильтровали, а фильтрат выпаривали. Остаток растворяли в метаноле (50 мл) раствор выпаривали, получая целевое соединение (1,2 г) в виде пены.

Т.с.х. (система А, 30:8:1), Rf 0,30.

Результаты анализа. Найдено: C 49,6, Н 6,15, N 19,1.

С₁₅Н₂₁N₅O₅· 0,3CH₄O·0,5H₂O требует С 49,6, Н 6,3, N 18,9%
П р и м е р 6. N-(транс-2-гидроксициклопентил)аденозин.

Смесь 6-хлорпурин- β-D-рибозида (1,15 г), тоанс-2-аминоциклопентанола (0,41 г), триэтиламина (0,41 г), и изопропанола (50 мл) нагревали до температуры дефлегмации на 20 ч. Добавляли дополнительные количества транс-2-аминоциклопентанола (0,08 г) и триэтиламина (0,08 г), нагревание продолжали еще 4 ч. Полученную в результате смесь адсорбировали на двуокиси кремния и подвергали очистке при помощи хроматографической колонны, элюируя системой А (30: 8:1), чтобы получить твердое вещество (0,48 г). Это вещество подвергали очистке на хроматографической колонне, элюируя системой В (12:1), получали пену, которую растирали с простым эфиром, получая требуемое соединение (0,31 г) в виде смеси 2:1 диастереоизомеров.

Т.с.х. (система В, 12:1), Rf 0,35.

Результаты анализа. Найдено: С 50,8, Н 6,25, N 18,8. C₁₅H₂₁N₅O₅·0,17 (С₂Н₅)₂Оx 0,5Н₂О требует С 50,5, Н 6,4, N 18,8%
П р и м е р 7. N-(транс-3-гидроксициклопентил)аденозин.

6-хлорпурин-β -D-рибозид (0,63 г), хлоргидрат транс-3-аминоциклопентанола (0,3 г) и ДЭА (0,63 г) перемешивали при температуре дефлегмации в изопропаноле (30 мл) в течение 3,5 дней. Реакционной смеси давали возможность охладиться до комнатной температуры, при этом выпадал осадок, который растворяли добавлением метанола. Раствор адсорбировали на двуокиси кремния (Мерк 9385) и подвергали очистке при помощи ОХ, элюируя системой В (3:1), чтобы получить порошок. После окончательной очистки при помощи хроматографической колонны на двуокиси кремния (Мерк 7734), элюируя системой В (3:1), получали названное соединение (44 мг), температура плавления 208-210^оС, в виде смеси 52:48 диастереоизомеров.

¹Н-Я. М. Р. δ 1,4-2,2 (6Н, мультиплет), 3,5-3,78 (2Н, мультиплет), 3,99 (1Н, мультиплет), 4,1-4,2 (1Н, мультиплет), 4,2-4,3 (1Н, мультиплет), 4,55 (1Н, дублет), 4,62 (1Н, мультиплет), 4,8 (1Н, широкий мультиплет), 5,22 (1Н, дублет), 5,42-5,52 (2Н, мультиплет), 5,9 (1Н, дублет), 7,82 (1Н, широкий дублет), 8,2 (1Н, широкий синглет), 8,83 (1Н, синглет).

П р и м е р 8. Соль фумаровой кислоты N-[(1S, транс)-2-гидроксициклопентил]аденозина (1:1).

Фумаровую кислоту (1,2 г) добавляли в дефлегмирующий раствор N-[(1S, транс)-2-гидроксициклопентил]аденозина (7,03 г) в изопропаноле (105 мл). Полученный в результате горячий раствор фильтровали, а фильтрат охлаждали и давали возможность кристаллизоваться. Через 2 ч при 20^оС кристаллический продукт изолировали фильтрацией, промывали изопропанолом (10 мл) и сушили под вакуумом при 50^оС в течение 20 ч, получая требуемое соединение (6,5 г), температура плавления 179-180^оС. Хроматографическое поведение этой соли напоминает поведение аутентичной пробы свободного основания.

П р и м е р 9. Соль N-[(1S, транс)-2-гидроксициклопентил аденозина и (1S)-(+)-10-камфорсульфокислоты.

Смесь N-[(1S, транс)-2-гидроксициклопентил]аденозина (3,51 г) и (1S)-(+)-10-камфорсульфокислоты (2,44 г) в изопропаноле (35 мл) нагревали до дефлегмации в атмосфере азота до тех пор, пока не получали прозрачный раствор. Раствор разбавляли изопропил ацетатом (50 мл), и смесь охлаждали до примерно 25^оС при перемешивании. Полученное в результате кристаллическое твердое вещество изолировали фильтрацией, промывали изопропанолом: изопропил ацетатом (1: 2, 2x15 мл) и сушили под вакуумом при 40^оС, получая названное соединение (5,31 г), температура плавления 150-152^оС.

Результаты анализа. Найдено: C 51,25; H 6,7; N 11,9; S 5,3; C₂₅H₃₇N₅O₉S требует С 51,4, Н 6,4, N, 12,0, S, 5,5%
П р и м е р 10. N-[(1S, транс)-2-гидроксициклопентил]аденозин.

Смесь 6-хлор-9-[2',3'-0-(1-метилэтилиден)- β-D-рибофуранозил]пурина (8,0 г), хлоргидрата (1S, транс)-2-аминоциклопентанола (4,0 г), ДЭА (12,7 мл), хлороформа (70 мл) и изопропанола (10 мл) перемешивали и нагревали до дефлегмации в атмосфере азота в течение 18 ч. Затем раствор охлаждали до 25^оС и промывали 1М раствором лимонной кислоты (2х80 мл); водные слои последовательно подвергали обратному экстрагированию хлороформом (2х40 мл). Соединенные растворы в хлороформе экстрагировали 1М раствором cерной кислоты ( 50 мл+25 мл ), а кислотные экстракты последовательно промывали хлороформом ( 40 мл ). Соединенные растворы в серной кислоте выдерживали при 20^оС в течение 2 ч. Карбонат калия (50 г) добавляли в кислотный раствор, и смесь экстрагировали изопропанолом (2х50 мл). Изопропаноловые экстракты соединяли и концентрировали при пониженном давлении, получая масло, которое разбавляли метанолом (50 мл) и снова концентрировали. Остаток растворяли в метаноле (20 мл) при дефлегмировании и добавляли этилацетат (80 мл). Раствор фильтровали и перемешивали, чтобы инициировать кристаллизацию. Через 4 ч кристаллический твердый продукт выделяли фильтрацией, промывали этил ацетатом (20 мл) и сушили под вакуумом при 40^оС, получили названное соединение (4,81 г), температура плавления 162-163^оС. Его хроматографическое поведение напоминает поведение аутентичного материала.

П р и м е р 11. N-[(1S, транс)-2-гидроксициклопентил]аденозин.

Суспензию 6-хлорпурин- β-D-рибозида (30,0 г), хлоргидрата (1S, транс)-2-аминоциклопентанола (15,0 г) и безводного карбоната натрия (30,0 г) в трет.-бутаноле (300 мл) перемешивали при дефлегмации в атмосфере азота в течение 21 ч. Суспензии давали возможность охладиться до 72^оС, фильтровали, а собранное твердое вещество промывали горячим (75^оС) третичн.-бутанолом (2х60 мл). Соединенные фильтрат и промывочные жидкости концентрировали под вакуумом, получая пену. Не растворяли в метаноле (55 мл) при дефлегмации, а затем по каплям добавляли этил ацетат (550 мл) в течение 0,5 ч, поддерживая при этом дефлегмацию (примерно 65^оС). Полученную в результате суспензию перемешивали в атмосфере азота 1,5 ч и охлаждали до 25^оС; затем ее выдерживали при 20-25^оС 1,5 ч. Твердое вещество отделяли фильтрацией, промывали системой В (10:1, 2x60 мл) и сушили под вакуумом при 50^оС, получали целевое соединение (31,50 г). Его хроматографическое поведение напоминает поведение аутентичного материала.

Результаты анализа. Найдено: С 51, Н 6,0, N 19,8; C₁₅H₂₁N₅O₅требует С 51,3, Н 6,0, N 19,9%
П р и м е р 12. N-(транс-2-гидроксициклопентил)аденозин.

Раствор 1,6-дигидро-1-(транс-2-гидроциклопентил)-6-имино-9-[[2,3,5-трис-0-[1,1-димет илэтβ-D-рибофуранозил] -9Н-пурина (0,3 г) в этаноле (20 мл), содержащем 2N раствор гидрата окиси натрия (5 мл), нагревали до дефлегмации на 5 ч. Полученную в результате суспензию адсорбировали на двуокиси кремния и подвергали очистке при помощи хроматографической колонны, элюируя системой В (9: 1), получая порошок. Его подвергали кристаллизации из смеси этил ацетат-метанол, получили требуемое соединение (0,11 г) в форме смеси 65:35 1R:1S диастереоизомеров.

Т.с.х. (система В, 9:1), Rf 0,26.

Результаты анализа. Найдено: С 49,5, Н 6,1, N 19,6; С₁₅Н₂₁N₅O₅ · 0,6H₂O требует С 49,7, Н 6,2, N 19,3%
ВЭЖХ: Колонна: Сферисорб -С8 5 μм (25 см х 4,6 мм). Подвижная фаза: 10% ацетонитрил в буфере фосфата триэтиламмония (рН 3,5). Скорость потока 1 мл/мин. Время удержания: (1R, транс) 10,2 мин (65%), (1S, транс) 8,4 мин (35%).

П р и м е р 13. (1S, транс)-N-(2-гидроксициклопентил)аденозин.

Раствор (1S, транс)-2-хлор-N-(2-гидроксициклопентил) аденозина (102 мг) и ацетата натрия (108 мг) в воде (3,2 мл) и этаноле (8,2 мл) подвергали гидрогенизации над 10%-ным палладием на древесном угле (50%-ный водный раствор, 100 мг ) 21 ч. Смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали, чтобы получить твердое вещество, которое растворяли в горячем метаноле (4 мл). Полученный в результате раствор фильтровали, в горячий раствор добавляли этилацетат (2 мл), осаждали целевое соединение (64 мг). Т.с.х. (система В, 9:1), Rf 0,24.

ВЭЖХ: колонна: Сферисорб -С8 5 μм (25 см х 4,6 мм). Подвижная фаза: 25% ацетонитрил в буфере, фосфате триэтиламмония (рН 3,5). Скорость потока 1 мл/мин. Время удержания 9,6 мин (которое равно времени для аутентичного материала).

П р и м е р 14. N-[(1S, транс)-2-гидроксициклопентил]аденозин.

N-[(1S, транс)-2-гидроксициклопетил] -2'3' -0-[1-метилэтилиден]аденозин (24,0 г) растворяли в смеси трифторуксусной кислоты (14,2 мл) и воды (120 мл) при температуре примерно 20^оС, смесь перемешивали в атмосфере азота в течение 3,5 ч. Добавляли безводный карбонат калия (28,0 г), и раствор экстрагировали дихлорметаном (48 мл). Добавляли еще карбонат калия (68 г), и водный слой экстрагировали изопропанолом (2х48 мл). Соединенные изопропанольные экстракты промывали насыщенным водным карбонатом калия (24 мл), и две водные фазы последовательно экстрагировали дополнительным изопропанолом (48 мл). Соединенные изопропаноловые экстракты концентрировали при пониженном давлении в масло. В масло добавляли метанол (120 мл) и растворитель удаляли при пониженном давлении, а затем под высоким вакуумом, получая полутвердое вещество. Его растворяли в горячем этил ацетате (120 мл), и горячий раствор осветляли фильтрацией. В фильтрат добавляли затравку и перемешивали при температуре примерно 20^оС 5 ч. Твердый продукт выделяли фильтрацией, промывали системой В (8:1, 50 мл), сушили под вакуумом, получая соединение, названное в заголовке (17,3 г), температура плавления 159-162^оС. Его хроматографическое поведение напоминает поведение аутентичного материала.

П р и м е р 15. N-[(1S, транс)-2-гидроксициклопентил]аденозин.

Раствор 2',3',5 -три-0-ацетил-N-[(1S, транс)-2-гидроксициклопентил]аденозина (0,34 г) в метаноле (7 мл), содержащем третичн.-бутиламин (3 мл), выдерживали при 23^оС 16 ч. Раствор выпаривали до сухого состояния, а остаточный трет.-бутиламин удаляли азеотропно с метанолом, получая стекло. В результате кристаллизации пробы этого стекла (0,19 г) из смеси этанола и этил ацетата (1: 20) получали соединение, названное в заголовке (0,15 г), температура плавления 160-163^оС. Его хроматографическое поведение напоминает поведение аутентичного материала.

П р и м е р 16. N-[(1S, транс)-2-гидроксициклопентил]аденозин.

Раствор N-[(1S, транс)-2-гидроксициклопентил] -N-(фенилметил)аденозина (0,2 г) в этаноле (50 мл) подвергали гидрированию при атмосферном давлении и температуре 45^оС, используя 10% -ный палладий на древесном угле (0,1 г) в качестве катализатора. Через 18 ч смесь фильтровали и фильтрат выпаривали. Остаток подвергали кристаллизации из смеси этил ацетат и метанол, получая соединение, названное в заголовке (0,075 г), температура плавления 162-163^оС. Его хроматографическое поведение напоминает поведение аутентичного материала.

Использование: в медицине в качестве ингибиторов липолиза. Сущность: продукт - соединение ф-лы 1, где R - циклопентальное кольцо, замещенное гидрокси-группой, и, необязательно, замещенное C₁-C₆-алкильной группой, или их соли или сольваты. Продукт получают гидрированием соответствующего защищенного амина ф-лы 1. 5 з. п. ф-лы. Структура соединения ф-лы 1:

1. Производные аденозина общей формулы I

где R циклопентильное кольцо, замещенное гидроксигруппой и необязательно замещенное C₁-C₆-алкильной группой,
или его соли или сольваты. 2. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что R - 2-гидроксициклопентильная, 2-гидрокси-2-метилциклопентильная или 3-гидроксициклопентильная группа. 3. Соединение по п.3, отличающееся тем, что R 2-гидроксициклопентильная или 2-гидрокси-2-метилциклопентильная группа. 4. Соединение по п.1, отличающееся тем, что оно представляет N [1S, транс)-2-гидроксициклопентил] аденозин, или его физиологически приемлемую соль, или сольват. 5. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что оно представляет N-[1S, транс-2-гидроксициклопентил] аденозин, или N-(1R, транс)-2-гидроксициклопентил] аденозин, или их смесь, или их физиологически приемлемую соль, или сольват. 6. Соединение по п.1, отличающееся тем, что оно представляет N-(цис-2-гидроксициклопентил)аденозин, или N-(2β -гидрокси-2-метилциклопентил)аденозин, или его физиологически приемлемую соль, или сольват.