СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТЬЮ Российский патент 1996 года по МПК A61K35/78 

Изобретение относится к области медицины (конкретно, к химико-фармацевтической промышленности и касается способа получения средства, обладающего противоопухолевой активностью
Известен способ получения противоопухолевого средства, который заключается в экстракции тонкоизмельченных корней Saphora japonica горячей водой, обработке щелочью, гидроокисью алюминия, экстракции бензолом, подкислении минеральной кислотой и экстракции хлороформом (Заявка Японии N 43-66068, А 61 К 27/14, 1978).

Однако данный способ обладает следующими недостатками: многостадийность, сложность в исполнении, использование токсичных экстрагентов.

Целью предлагаемого изобретения является упрощение способа.

Поставленная цель достигается путем экстракции растительного сырья, в качестве которого используют смесь коры и побегов облепихи крушиновидной в соотношении 2 8 при измельченности до 5-10 мм в батарее из шести диффузоров 40^o этиловым спиртом при соотношении сырье экстрагент 1 3, времени однократной экстракции 6 16 часов и отстаивания в течение 4 часов при температуре 6-8^oС.

Отличие предлагаемого способа от известного заключается в том, что экстрагируют смесь коры и побегов облепихи крушиновидной в соотношении 2 8 при измельченности до 5-10 мм в батарее из шести диффузоров 40^o этиловым спиртом при соотношении сырье экстрагент 1 3, времени однократной экстракции 8-16 часов и отстаивании в течение 4 часов при температуре 6-8^oC.

Отличительные признаки проявили в заявляемой совокупности новые свойства, что привело к достижению нового положительного эффекта у заявляемого решения. Впервые предложены в качестве сырья кора и побеги облепихи крушиновидной, экспериментально подобраны оптимальные условия для максимального извлечения и сохранения биологически активных веществ из коры и побегов облепихи крушиновидной.

Сущность изобретения заключается в следующем: процесс экстракции проводится в шести диффузорах. В каждый диффузор загружают в равных количествах смесь коры и побегов облепихи, измельченных до 5-10 мм в 5-6 приемов для более плотной укладки, причем кору и побеги берут в соотношении 2 8.

В первый диффузор при открытом спускном кране заливают экстрагент до появления его первых порций, затем кран закрывают и добавляют экстрагент "до зеркала" (соотношение сырье экстрагент в данном и последующих диффузорах составляет 1 3). Диффузор оставляют для настаивания в течение 8 часов, по истечении этого времени производят слив извлечения, которое направляется во второй диффузор. Недостающее "до зеркала" количество экстрагента во втором диффузоре получают путем пропускания необходимого количества 40^o этанола через первый диффузор. В первый диффузор заливают свежую порцию экстрагента "до зеркала", оба диффузора оставляют для настаивания в течение 16 часов. В дальнейшем экстрагирование проводят аналогично, по принципу противотока, при котором извлечение, полученное из второго диффузора заливается в третий, из третьего в четвертый и т.д. Все шесть порций свежего экстрагента подаются в первый диффузор. После ввода в работу всех диффузоров батареи отбор всех шести порций экстракта производится из головного шестого диффузора, выводя поочередно хвостовые диффузоры. Экспозиция настаивания на каждой ступени экстрагирования составляет 8 или 16 часов. Продолжительность экстрагирования в каждом дииффузоре составляет 72 часа, а общая продолжительность процесса 6 суток.

Полученный экстракт тщательно перемешивают, отбирают пробу для анализа. Очистку экстракта производят путем отстаивания при температуре 6-8^oС в течение 4 суток, после чего готовый экстракт фильтруют.

Полученный экстракт представляет собой прозрачную красновато-коричневую жидкость со своеобразным запахом. Содержание суммы алкалоидов (основных биологически активных веществ) составляет 0,3-0,4% содержание спирта 36-40%
Предлагаемый способ позволяет получить из одной весовой части смеси коры и побегов облепихи объемные части жидкого экстракта с содержанием алкалоидов 0,3-0,4% при выходе основных биологически активных веществ 87,24±-,22%
Пример конкретного выполнения способа.

Пример. 150,0 смеси коры и побегов облепихи (2 8), измельченных до частиц размером 5 мм, загружают поровну по 25 г в шесть диффузоров в 5-6 приемов для более плотной укладки. В первый диффузор при открытом спускном кране заливают 40^o этанол до появления его первых порций, затем кран закрывают и добавляют экстрагент "до зеркала" (75 мл). Диффузор оставляют для настаивания в течение 8 часов, по истечении этого времени проводят слив извлечения, которое направляют во второй диффузор. Недостающее "до зеркала" количество экстрагента во втором диффузоре получают пропусканием 37 мл 40^o этанола через первый диффузор. В первый диффузор заливают свежую порцию 40^o этанола в количестве 75 мл. Оба диффузора оставляют для настаивания в течение 16 часов. В дальнейшем экстрагирование проводят аналогично по принципу противотока, при котором извлечение, полученное из второго диффузора направляется в третий, из третьего в четвертый и т.д.

Все шесть порций свежего экстрагента по 75 мл подаются в первый диффузор. После ввода в работу всех диффузоров батареи отбор всех шести порций по 37-38 мл экстракта производится из головного шестого диффузора, вводя поочередно хвостовые диффузоры, экспозиция настаивания на каждой ступени экстрагирования составляет 8 или 16 часов. Полученный экстракт отстаивают при температуре 6-8^oC в течение 4 суток, затем фильтруют. Содержание суммы алкалоидов в экстракте 0,38±0,02% выход суммы алкалоидов 87,24±2,22%
Изучение влияния на развитие аденокарциномы Эрлиха экстракта из смеси коры и побегов, получение которого описано в примере, показало, что введение исследуемого средства мышам-самцам линии СВА в течение 7 суток в дозе 1,0 мл/кг приводит к значительной ингибиции развития опухоли. Объем клеток аденокарциномы Эрлиха после курсового введения экстракта коры и побегов уменьшился в 2,5 раза пo сравнению с группой мышей, не получавших средства, торможение роста опухоли при этом составило 59% (табл. 1). Гибели животных при использовании экстракта не наблюдалось. На модели перевиваемой аденокарциномы Эрлиха мышей показана наибольшая противоопухолевая эффективность экстракта, полученного предлагаемым способом. Торможение роста опухоли после курсового введения предлагаемого средства составляло 59% (P < 0,01), при этом не отмечено проявлений токсического действия экстракта, используемого в дозе 1,0 мл/кг. Данные таблицы 2 и показывают, что использование в качестве сырья смеси коры и побегов облепихи (2:8), реперколяции его 40^o этанолом в батарее из шести диффузоров (при соотношении сырье: экстрагент 1:3, сырье: готовый продукт 1:1,5), измельченности до 5-10 мм, времени однократной экстракции 8-16 часов и отстаивании в течении 4 часов при температуре 6-8^oC, является оптимальным, т.к. позволяет получить из 1 весовой части сырья 1,5 объемные части экстракта с содержанием суммы алкалоидов 0,38 ± 0,02% концентрация этанола 34,55 ± 2,84^o и достичь значительного выхода биологически активных веществ 87,24 ± 2, 22% Полученный описанным способом экстракт обладает выраженной противоопухолевой активностью и низкой токсичностью. ТТТ1 ТТТ2

Использование: изобретение относится к медицине, а именно к химико-фармацевтической промышленности и касается способа получения средства, обладающего противоопухолевой активностью. Целью изобретения является упрощение способа. Сущность изобретения заключается в экстракции измельченной коры и побегов облепихи крушиновидной, взятых в соотношении 2 : 8, 40%-ным этиловым спиртом в батарее из 6 диффузоров при соотношении сырье : экстрагент 1 : 3 и времени однократной экстракции 8-16 часов и отстаиванием экстракта в течение 4-х часов при 6-8^oС. Положительный эффект заключается в упрощении способа за счет сокращения числа стадий и исключения токсичных реагентов. 2 табл.

Способ получения средства, обладающего противоопухолевой активностью путем экстракции тонкоизмельченного растительного сырья, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, в качестве растительного сырья используют смесь коры и побегов облепихи крушиновидной, взятых в соотношении 2:8 соответственно, а экстракцию проводят в батарее из шести диффузоров 40°-ным этиловым спиртом при соотношении сырье экстрагент 1:3 и времени однократной экстракции 8-16 ч, полученный экстракт отстаивают в течение 4 ч при 6-8^oC.