ПРОТИВОЛЕЙКОЗНЫЙ ЛЕКАРСТВЕННЫЙ ПРЕПАРАТ Российский патент 1996 года по МПК A61K31/505 A61K9/127 

Изобретение относится к лекарственному препарату на основе биологически активных веществ и может быть использовано в медицинской практике для лечения онкологических заболеваний, в частности при лечении лейкозов.

Известен ряд препаратов различных классов (антибиотики, антиметаболиты и т.д.), находящих применение при лечении онкологических заболеваний.

Общим недостатком всех типов цитостатических препаратов является их высокая токсичность, короткий период существования в организме, развитие резистентности к препаратам, недостаточная избирательность действия и т.д.

Наиболее близким из известных к предлагаемому препарату является цитостатик из класса антиметаболитов цитозин-β-D-арабинозид (цитарабин), применяемый для лечения острых лейкозов по различным схемам [1]
Недостатками препарата являются:
необходимость внутривенного введения (орально препарат неактивен);
быстрая дезактивация его в организме путем дезаминирования, с периодом "жизни" 5 15 мин в зависимости от дозы;
поддержание эффективной концентрации цитарабина в кровеносном русле требует ежедневного и продолжительного введения препарата и нахождения больного в стационаре "под капельницей".

Цитарабин обычно применяют в виде водного раствора, приготовляемого "ех tempore".

Целью изобретения является повышение терапевтической эффективности цитарабина при лечении лейкоза.

Поставленная цель достигается получением липосомальной формы цитарабина, имеющей следующий состав, мас.

Цитарабин 0,8 0,9
Лецитин 8,0 9,0
Холестерин 1,2 1,4
Сахароза 5,0 5,4
Витамин Е 0,004 0,008
Вода Остальное
и эффективность встраивания цитарабина в липосомы 30^oC45% и средний объемно-численный диаметр липосом 450±150 нм.

Лекарственный препарат выпускают в виде стерильного лиофилизированного порошка во флаконах или ампулах, к которому перед применением добавляют стерильную апирогенную воду и встряхивают до образования однородной дисперсии липосом молочно-белого цвета с желтоватым оттенком.

Способ приготовления липосомальной формы цитарабина (ЛФЦ) заключается в следующем:
смешение в определенных количествах спиртового раствора фосфатидилхолина, хлороформенного раствора холестерина и витамина Е;
формирование пленки липидов на стенках круглодонной колбы путем упаривания органических растворителей в вакууме при температуре не выше 40^oC;
диспергирование липидной пленки водным раствором цитарабина путем встряхивания колбы в течение 15 мин;
многократное (10 раз) замораживание липосомальной дисперсии в жидком азоте и оттаивание в горячей воде;
добавление к полученным липосомам криопротектора сахарозы;
розлив полученной липосомальной дисперсии по 1 мл в пенициллиновые флаконы или ампулы;
лиофильная сушка липосом в пенициллиновых флаконах или ампулах;
укупорка пенициллиновых флаконов пробками и металлическими колпачками и запаивание ампул;
стерилизации липосом облучением в жидком азоте при общей дозе 1,5 Мрад.

Поскольку эффективность действия препарата определяется эффективностью встраивания цитарабина внутрь липосом, указанные соотношения цитарабина и липидов являются оптимальными для обеспечения процента встраивания равного 30 45
Эффективность встраивания (или процент включения) цитарабина определяют по формуле:

где Э_в эффективность включения цитарабина в липосомы в процентах;
C концентрация невключенного цитарабина;
С_исх исходная концентрация цитарабина в смеси до получения липосом.

Соотношение лецитин: холестерин определяется двумя факторами:
1) уменьшение количества холестерина приводит к уменьшению устойчивости липосом к действию плазмы и их быстрому разрушению;
2) увеличение количества холестерина приводит к уменьшению процента встраивания и к увеличению размеров липосом и ускоренному выделению их из кровеносного русла.

Количество сахарозы оптимально для обеспечения сохранного липосом в процессе лиофильной сушки.

Витамин Е используется как антиоксидант для обеспечения сохранности препарата в процессе радиационной стерилизации.

Пример 1. Методом "замораживания-оттаивания" получены липосомы состава, мас.

Цитарабин 0,8
Лецитин 8,0
Холестерин 1,4
Сахароза 5,0
Витамин Е 0,004
Вода Остальное.

После лиофилизации, стерилизации и регидратации получены липосомы со средним объемно-численным диаметром 570±30 нм и процентом встраивания 32±2% (по данным ВЭЖХ). Противолейкозная активность ЛФЦ была изучена на мышах гибридах BDF₁ с перевитым лейкозом L-1210.

Препараты применяли через 24 ч после перевивки штамма ежедневно, внутрибрюшинно, в течение 5 дн.

В таблице приведены данные по действию цитарабина в липосомальной и обычной формах на развитие лейкоза L-1210.

Пример 2. По схеме, аналогичной примеру 1, получены липосомы состава, мас.

Цитарабин 0,9
Лецитин 9,0
Холестерин 1,2
Сахароза 5,4
Витамин Е 0,008
Вода Остальное
с диаметром 470±20 нм и процентом встраивания 42±3,0 (по данным ВЭЖХ).

Увеличение продолжительности жизни мышей при введении ЛФЦ по схеме примера 1 составляет 156,0±8,0%
Пример 3. По схеме, аналогичной примеру 1 получены липосомы состава, мас.

Цитарабин 0,84
Лецитин 8,5
Холестерин 1,3
Сахароза 5,3
Витамин Е 0,006
Вода Остальное
с диаметром 510±25 нм и процентом встраивания 36,0±3,6 (по данным ВЭЖХ).

Увеличение продолжительности жизни мышей при введении ЛФЦ по схеме примера 1 составляет 163,0±7,2
Анализ фармакокинетических закономерностей показал, что ЛФЦ существенно дольше циркулирует в кровеносном русле и препарат обнаруживается в плазме экспериментальных животных даже через 7 ч после его внутривенного введения.

Изобретение относится к лекарственному препарату на основе биологически активных веществ и может быть использовано в медицинской практике для лечения онкологических заболеваний, в частности, при лечении лейкозов. Предлагаемый противолейкозный лекарственный препарат, включающий цитарабин, отличается тем, что с целью повышения терапевтической эффективности, цитарабин используют в липосомальной форме следующего состава, мас.%: цитарабин 0,8 - 0,9; лецитин 8,0 - 9,0; холестерин 1,2 - 1,4; сахароза 5,0 - 5,4; витамин Е 0,004 - 0,008; вода до 100 мл. Эффективность встраивания цитарабина в липосомы равна 30 - 45 %, средний объемно-численный диаметр липосом 300 - 600 нм. 1 табл.

Противолейкозный лекарственный препарат, включающий цитарабин и воду, отличающийся тем, что дополнительно содержит лецитин, холестерин, сахарозу, витамин Е при следующих соотношениях компонентов, мас.

Цитарабин 0,8 0,9
Лецитин 8,0 9,0
Холестерин 1,2 1,4
Сахароза 5,0 5,4
Витамин Е 0,004 0,008
Вода Остальное
при этом встраивание цитарабина в липосомы равно 30 45% а средний объемно-численный диаметр липосом равен 300 600 нм.