Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано для иммунопрофилактики и иммунотерапии дифтерии.
В настоящее время специфическая терапия больных дифтерией осуществляется с помощью противодифтерийной лечебной гетерологичной сыворотки, частично очищенной от балластных белков. Введение гетерологичного антитоксина сопряжено с риском развития серьезных осложнений и зачастую вызывает возникновение побочных реакций на чужеродный белок (анафилактический шок, сывороточная болезнь и т.д.). Кроме того, известно, что антитоксин человека обладает большей клинической эффективностью по сравнению с антитоксином животных.
Для серопрофилактики дифтерии только в исключительных случаях используют однократное введение 2000 5000 АЕ лечебной сыворотки лицам, имевшим контакт с дифтерийными больными. Коллективная пассивная профилактика дифтерии лиц с низким уровнем противодифтерийных антител, находившихся в контакте с больными, не проводится в связи с риском развития осложнений.
Активная иммунизация вакциной не может защитить в ближайшие 2 3 недели после выявления заболевших, лиц, находившихся в контакте. В таких случаях для серопрофилактики дифтерии желательно введение очищенного гомологичного противодифтерийного иммуноглобулина, который в настоящее время не выпускается.
Эксперты ВОЗ с 1975 г. предложили максимально сократить использование гетерологичной сыворотки.
Известен способ получения противодифтерийной сыворотки 10000 V1 Пастер (фирма Мерье, Франция). В состав препарата входят специальные компоненты, нейтрализующие у больного токсин, вырабатываемый Corynebacterium Diphteriae. Препарат используют для серопрофилактики и лечения дифтерии при подкожном и внутримышечном введении. Однако риск возникновения побочных реакций на гетерологичный препарат сохраняется.
Наиболее близким к предлагаемому является способ получения противодифтерийной сыворотки Диаферм-3 из крови иммунизированных лошадей. Способ предусматривает очистку с помощью сорбентов и ферментативного гидролиза лошадиной сыворотки (схема 1). Сыворотка имеет 2000 5000 АЕ в 1 мл. Препарат Диаферм-3 обладает всеми недостатками, перечисленными выше, присущими гетерологичным и недостаточно очищенным препаратам.
Схема 1.
Лошадиная сыворотка (плазма)
Ферментативный гидролиз сывороточных белков пепсином (плазма= сыворотка разводятся до 3% белка) 1 час при рН 3,25 3,33 и +25 +26o в присутствии 1,5 1,7% алюмокалиевых квасцов
Образование геля гидроокиси алюминия при подщелачивании ферментированного материала до рН 6,0 выдержка при +45o в течение 1 часа
Отделение осадка сорбента фильтрацией (осадок удаляют)
Высаливание антитоксических глобулинов из активного фильтрата сульфатом аммония 320 г/л
Отделение осадка глобулинов фильтрацией, прессование, и диализ против проточной воды в течение 48 часов
Дополнительная очистка диализата от остаточных балластных продуктов протеолиза и возможного пирогена выбранными сорбентами, удаление ионов солей с помощью ионитов КУ-2 и ЭДЭ-10п, стерилизующая фильтрация
Схема получения сыворотки Диаферм-3.
Целью изобретения является создание высокоочищенного гомологичного иммуноглобулинового препарата, пригодного для иммунопрофилактики и иммунотерапии дифтерии.
Поставленная цель достигается тем, что для получения исходного сырья отбирают лиц с титрами антител в крови против дифтерийного токсина, определяемыми в РПГА (реакции пассивной гемагглютинации) не ниже 1:320, ревакцинируют их дифтерийным анатоксином и берут кровь в качестве исходного сырья у доноров с титрами антител к дифтерийному токсину не ниже 1:5000 и выше с последующим выделением конечного продукта по методу Кона.
Пример. У новобранцев 18 19 лет, получивших последнюю ревакцинацию дифтерийным анатоксином в 16 лет, определяют в РПГА титры антител к дифтерийному токсину. Отбирают лиц с титрами антител не менее чем 1:320 (или не менее 0,5 мг/мл по методу Иенсена) и проводят им ревакцинацию АД-М-вакциной (адсорбированным дифтерийным анатоксином с уменьшенным содержанием антигена, содержащим в дозе 0,5 мл 5 Lf ДА. Через 20 45 дней после ревакцинации вновь определяют титры антител и отбирают доноров с титрами не менее чем 1:5000 (5 мг/мл) и более. Кровь у доноров берут методом плазмафереза.
Схема получения препарата представлена на схеме 2.
Полученный таким способом из сыворотки человека высокоочищенный иммуноглобулиновый препарат на иммуноэлектрофореграмме с антисывороткой ко всем сывороточным белкам человека дает одну линию, соответствующую lgG-иммуноглобулину.
Препарат можно использовать для серопрофилактики и терапии дифтерии без риска развития тяжелых осложнений.
е
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОГЛОБУЛИНА ПРОТИВОДИФТЕРИЙНОГО ЧЕЛОВЕКА | 1995 |
|
RU2150960C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИРОТАВИРУСНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА | 1998 |
|
RU2129017C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТИВОСТОЛБНЯЧНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА | 1992 |
|
RU2078572C1 |
ПРЕПАРАТ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ДИФТЕРИИ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ | 1999 |
|
RU2174408C2 |
СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ЭРИТРОЦИТАРНОГО ИММУНОДИАГНОСТИКУМА И СПОСОБ ОЦЕНКИ ИММУНОРЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА | 1996 |
|
RU2142807C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОГЛОБУЛИНОВОГО ПРЕПАРАТА | 1995 |
|
RU2111001C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОГЛОБУЛИНОВОГО ПРЕПАРАТА | 1995 |
|
RU2108794C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ПРОТИВОГЕРПЕТИЧЕСКОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА ЧЕЛОВЕКА | 1992 |
|
RU2051054C1 |
Способ определения состояния иммунитета при дифтерийной инфекции | 1986 |
|
SU1534401A1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОГЛОБУЛИНОВОГО ПРЕПАРАТА | 1993 |
|
RU2073525C1 |
Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано для иммунопрофилактики и иммунотерапии дифтерии. Цель изобретения - создание высокоочищенного гомологичного иммуноглобулинового препарата, пригодного для профилактики и терапии дифтерии. Поставленная цель достигается тем, что для получения исходного сырья отбирают лиц с титрами антител в крови против дифтерийного токсина не ниже 1:320 (РПГА), ревакцинируют их дифтерийным анатоксином и берут кровь у доноров с титрами антител к дифтерийному токсину не ниже 1:5000 и выше с последующим выделением конечного продукта по методу Кона.
Способ получения иммуноглобулинового препарата для профилактики и терапии дифтерии, отличающийся тем, что для получения исходного сырья отбирают лиц с титрами дифтерийного антитоксина в крови не ниже 1 320 (РПГА), ревакцинируют их дифтерийным анатоксином и через 25 40 дней берут кровь у доноров с титрами антител к дифтерийному токсину не ниже 1 5000 и выше с последующим выделением конечного продукта по методу Кона.
Хавкин В.А., Чижова Т.М., Баталова Т.А., Насырова И.И | |||
Токсины-анатоксины и антитоксические сыворотки.-М., Медицина, 1966. |
Авторы
Даты
1997-03-10—Публикация
1994-06-06—Подача