СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЛИЦИРРИЗИНОВОЙ КИСЛОТЫ Российский патент 1997 года по МПК C07J63/00 

Изобретение относится к способу получения тритерпенового гликозида - глицирризиновой кислоты (ГК) основного ингредиента корня солодки (лакрицы) (Glycyrrhizae glabra и Glycyrrhizae uralensis), обладающего комплексом ценных для медицины свойств [1-3]
В настоящее время доступным сырьем для получения гликозида являются экстракты солодкового корня густой и сухой, выпускаемые экстрактовыми заводами в г. Чарджоу и г. Уральске [4]
Промышленным сырьем является также субстанция моноаммонийной соли глицирризиновой кислоты (глицирам), выпускаемый ПО "Чимкентбиофарм" и Харьковским ПО "Здоровье трудящихся". Способ получения чистой ГК из глицирама был предложен нами ранее [5]
Ранее был предложен способ получения ГК из экстракта солодки густого по следующей схеме [6] (прототип) (см фиг.1).

Солодковый экстракт густой (30 кг) растворяли в 0,5% NaOH (150 л), осаждали сырой гликозид добавлением 25% H₂SO₄ до кислой реакции по Конго, осадок отфильтровывали водой и сушили при 40-50^oC. Выход технического гликозида 9,6 кг (содержание основного вещества 25-28%
Полученный технический гликозид экстрагировали при 50^oC ацетоном, осаждали трикалиевую соль (3К-соль) гликозида добавлением 15%-ного спиртового раствора КОН до слабо-щелочной реакции, осадок ЗК-соли ГК отсасывали, промывали ацетоном и сушили.

Сухой остаток растворяли в 75% EtOH (из расчета 100 г ЗК-соли на 1,5 л), обрабатывали катионитом КУ-2 (H⁺-форма) в соотношении 1:1 (по весу) и активированным углем.

После полного растворения соли раствор фильтровали и упаривали досуха в вакууме при 40-45^oC. Выход гликозида 80-82 г на 100 г ЗК-соли (91,1-93,4^o от теории или 40-45% на исходное сырье).

Содержание основного вещества в глицирризиновой кислоте, полученной по данной схеме, не превышало 60-70% по данным ВЗЖХ. Т. пл. 225-230^oC; [α]20D

= +50^° этанол).

Основным недостатком данного способа получения ГК является низкое содержание основного вещества в получаемом продукте (аморфный), которое не превышает 65-70% по данным ВЗЖХ (хроматограф Du Pont, колонка с обращенной фазой μ-Бондапак С-18, подвижная фаза: H₂O-CH₃CN-MeOH-AcOH 44:35:20:1 (v), детектор УФ, l 254 нм).

В заявленном способе предложено получение ГК из технического сухого экстракта солодки с содержанием глицирризиновой кислоты 26-28% (по данным ВЭЖХ), который экстрагировали ацетоном, содержащим 0,1% H₂SO₄ при комнатной температуре, затем ацетоном при кипячении, получали трикалиевую соль (ЗК-соль) гликозида путем обработки 10%-ным метанольным раствором КОН, последнюю превращали в однокалиевую соль (1K-соль) путем перекристаллизации из ледяной уксусной кислоты при 95-100^oC, 1K-соль перекристаллизовывали 2 раза из водного этанола (5: 1, v/v) и обрабатывали 1%-ным раствором H₂SO₄ при 100^oC, а затем хлороформом при комнатной температуре. Выход глицирризиновой кислоты 47-48% в пересчете на исходное сырье экстракт солодки с содержанием ГК 26,6% Содержание основного вещества в полученной ГК 87-89% по данным ВЭЖХ (хроматограф Du Pont, колонка с обращенной фазой m-Бондапак С-18, подвижная фаза: H₂O-CH₃CN-MeOH-AcOH 44:35:20:1, v детектор УФ, l 254 нм).

Отличительные признаки предлагаемого способа:
1. Использование на 1-й стадии для экстракции технического сухого экстракта солодки кислого ацетона (с добавлением 0,1% H₂SO₄), в то время как в способе-прототипе на 1-й стадии экстракт солодки густой растворяют в 0,5%-ном растворе щелочи).

2. Введена операция перевода 3К-соли ГК в 1K-соль путем перекристаллизации из ледяной уксусной кислоты при 95-100^oC, что повышает степень очистки получаемого гликозида.

3. Введена операция перекристаллизации 1K-соли ГК из водного этанола (5: 1, v/v) (2 раза).

4. На стадии перевода соли в кислоту мы использовали обработку чистой 1K-соли ГК 1%-ным раствором H₂SO₄ при 98-100^oC вместо катионита КУ-2 (H⁺) в 75%-ном водном этаноле, как в способе-прототипе.

Эта операция дает возможность получать мелкокристаллический белый осадок глицирризиновой кислоты, который после обработки хлороформом для удаления примеси агликона имеет содержание основного вещества 87-89% в то время как по способу-прототипу гликозид имеет 65-70%-ную чистоту и получается аморфным.

Схема получения глицирризиновой кислоты из сухого экстракта солодки показана на фиг.2
Выход 48-50% в пересчете на исходное сырье (экстракт солодки)
Т. пл. 214-220^oC (интервал 1-2^oC);
[α]20D

= + 60- +65^° (с = 0,04; MeOH)
Содержание основного вещества 87-89% по данным ВЭЖХ, содержание H₂O 5,4-6,0%
На фиг.3 приведена ВЭЖХ-хроматограмма экстракта солодки сухого (Уральский завод): жидкостной хроматограф Du Pont, колонка с обращенной фазой μ-Бондапак C-18, подвижная фаза: H₂O-CH₃CN-MeOH-AcOH 40:35:20:1 (v), детектор УФ (l 254 нм); скорость потока
Содержание глицирризиновой кислоты в экстракте 26,6±0,7%
Пример 1.

370 г технического сухого экстракта солодки с содержанием глицирризиновой кислоты приблизительно 27% загрузили в колбу, снабженную механической мешалкой и обратным холодильником, прилили 1000 мл ацетона, 10 мл раствора H₂SO₄ (1 мл H₂SO₄ 10 мл ацетона) и перемешивали при комнатной температуре 3 ч. Ацетоновую вытяжку слили декантацией, к осадку прибавили 500 мл свежего ацетона и кипятили с перемешиванием 3 ч. Ацетоновый экстракт слили, осадок экстрагировали еще 500 мл ацетона при кипячении (2 ч). Эту операцию повторили еще 2 раза (по 500 мл). Получили 3000 мл ацетонового экстракта, который отфильтровали, упарили до 1000 мл и сушили над MgSO₄. К концентрированному раствору гликозида прибавили при перемешивании 300 мл 10%-ного метанольного раствора КОН при перемешивании (pH 9). Осадок трикалиевой соли (3К) ГК отфильтровали, промыли 2 раза по 500 мл ацетона, 500 мл метанола и сушили на воздухе, затем в сушильном шкафу при 100-110^oC. Получили 222 г технической 3К-соли ГК, которую растворили при нагревании до 95-100^oC в 2200 мл ледяной уксусной кислоты (ЛУК), отфильтровали и оставили кристаллизоваться при комнатной температуре на ночь. Осадок однокалиевой соли (1K) ГК отфильтровали, промыли 500 мл ЛУК, 500 мл метанола, 500 мл эфира и высушили. Получили 103 г (100% ) 1K-соли ГК, которую перекристаллизовали 2 раза из этанола воды (5:1, v/v). Выход чистой 1K-соли ГК 62 г (60,2% в пересчете на исходное сырье). [α]20D

+ 50^o (c 0,06; 25% εtOH). УФ, λ25%макс. εtOH (lgε)): 255 нм (3,90). ИК, ν, см^-1: 3600-3200 (OH); 1720, 1710 (COOH); 1630-1600 (COO^-). Найдено, К 4,97. C₄₂H₆₁O₁₆R. Вычислено, К 4,54.

62 г 1K-соли ГК и 600 мл 1%ного раствора H₂SO₄ нагревали при 98-100^oC 20 мин, выдержали при комнатной температуре 3 ч и отфильтровали белый осадок ГК. Промыли его водой, сушили на воздухе, затем при 110-120^oC. Получили 50,5 г гликозида, который перемешивали 1 ч в 500 мл хлороформа, отфильтровали и сушили в вакууме при приблизительно 60^oC. Выход ГК 49 г (49,8% в пересчете на исходное сырье). Т. пл. 214-215^oC; [α]20D

+62^o (с 0,04; MeOH). УФ, λMeOHмакс. (lgε): 249 нм (4,03). Содержание основного вещества 87,4% по данным ВЭЖХ (хроматограф Du Pont, колонка с обращенной фазой μ-Бондапак С-18; подвижная фаза: H₂O-CH₃CN-MeOH-AcOH 44:35:20:1 (v); детектор УФ l 254 нм). Содержание воды 5,92%
Пример 2.

370 г технического экстракта солодки залили 1000 мл ацетона, прибавили 10 мл раствора H₂SO₄ (1 мл H₂SO₄ в 10 мл ацетона) в ацетоне и перемешивали при комнатной температуре 3 ч. Ацетоновую вытяжку слили декантацией, к осадку прибавили 1000 мл ацетона и кипятили при перемешивании 3 ч. Ацетоновый экстракт слили, к остатку прибавили 800 мл ацетона и кипятили еще 2 ч. Объединенные ацетоновые вытяжки (2800 мл) отфильтровали, упарили до 800 мл. К концентрированному ацетоновому экстракту прибавили 200 мл 10%-ного метанольного раствора КОН (pH 8), осадок 3К-соли ГК отфильтровали, промыли 500 мл ацетона, 500 мл спирта, 500 мл эфира и высушили на воздухе, затем при 100-110^oC. Получили 221 г 3К-соли ГК, которую растворили п\ри нагревании до 95-100^oC в 2200 мл ЛУК, отфильтровали и оставили кристаллизоваться на ночь. Осадок 1K-соли ГК отфильтровали, промыли 500 мл ЛУК, 500 мл метанола, 500 мл эфира и высушили. Получили 102 г (99%) 1K-соли ГК, которую перекристаллизовали 2 раза из этанола воды (5:1, v/v). Выход чистой 1K-соли ГК 60 г (58,2% в пересчете на исходное сырье). 60 г 1K-соли ГК и 600 мл 1%-ного раствора H₂SO₄ нагревали при 98-100^oC 20 мин, выдержали при комнатной температуре 3 ч и отфильтровали белый осадок ГК, промыли его водой и высушили. Получили 49,6 г гликозида, который перемешивали 1 ч в 500 мл хлороформа, отфильтровали и высушили в вакууме при приблизительно 60^oC. Выход ГК 48 г (48,8% в пересчете на исходное сырье). Т. пл. 219-220^oC; [α]20D

+60^o (с 0,04; MeOH). УФ, λεtмакс.OH(lgε): 250 нм (4,05). Содержание основного вещества 88,6% Содержание воды 5,92%

Использование: в качестве препарата, обладающего комплексом ценных для медицины свойств. Сущность: глицирризиновая кислота, которую получают из технического сухого экстракта солодки с содержанием глицирризиновой кислоты 26-28% путем экстрагирования ацетоном, содержащим 0,1%-ную серную кислоту при комнатной температуре с получением трикалиевой соли гликозида и переводом ее в однокалиевую соль путем перекристаллизации последней из водного этанола дважды при соотношении, соответственно равном (5:1, V/V), и далее переводом в глицирризиновую кислоту путем обработки однокалиевой соли 1%-ным раствором серной кислоты при 98-100^oC и хлороформом при комнатной температуре. Полученный мелкокристаллический белый осадок глицирризиновой кислоты содержит 87-89% основного вещества. 3 ил.

Способ получения глицирризиновой кислоты, включающий стадии экстракции технического сухого экстракта солодки ацетоном с получением трикалиевой соли гликозида путем обработки экстракта спиртовым раствором КОН, отличающийся тем, что сухой экстракт солодки с содержанием глицирризиновой кислоты 26-28% экстрагируют ацетоном, содержащим 0,1% серную кислоту при комнатной температуре, затем ацетоном при кипячении, полученную тракалиевую соль гликозида переводят в однокалиевую соль путем перекристаллизации из ледяной уксусной кислоты при 98 100^oС с последующей перекристаллизацией последней из водного этанола дважды при соотношении 5 1 объем/объем и далее переводом в глицирризиновую кислоту путем обработки однокалиевой соли 1%-ным раствором серной кислоты при 98 100^o и хлороформом при комнатной температуре.