СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГРУППЫ РИСКА РЕЦИДИВА ЛЕПРЫ Российский патент 1997 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно к лепрологии и может быть, в частности, использовано для формирования группы "риска" возникновения рецидива среди больных лепрой в стадии регресса.

Известен способ прогнозирования рецидива лепрозного процесса (Маслов А. К. Ющенко А.А. авт.св. N 1636717), заключающийся в определении активности пероксидазы в митохондриях макрофагов, мембранах клеток и перимикобактериальной зоне. При наличии пероксидазо активных митохондрий от 76,5% и ниже от нормы и отсутствии активности пероксидазы на мембранах клеток прогнозируют рецидив. Существенным недостатком является трудоемкость и труднодоступность способа, связанная с использованием электронного микроскопа и подготовкой материала для просмотра.

Известен способ прогнозирования рецидива туберкулеза легких у клинически излеченных больных (Недлинская Н.Н. Прогнозирование рецидива туберкулеза легких. Проблемы туберкулеза N 4, 1988, С. 4 7), основанный на последовательном статистическом анализе наиболее информативных признаков "риска" рецидива. Недостатком способа является громоздкость прогностической таблицы, большой набор учитываемых признаков, не позволяющий объективно оценить состояние больного в отношении "риска" развития рецидива.

Известен также способ прогнозирования рецидива лепрозного процесса (Рыжова Н. Я. Логинов В.К. авт.св. N 1139415), заключающийся в определении отношения показателей активности лактатдегидрогеназы, окисляющей лактат в пируват, к активности лактатдегидрогеназы, восстанавливающей пируват в лактат, и при увеличении полученного значения в сравнении с нормой прогнозируют возникновение рецидива лепроматозной лепры. Существенным недостатком способа является невозможность отдаленного прогнозирования рецидива, (фактически способ регистрирует имеющийся рецидив), вариабельность биохимических показателей активности лактатдегидрогеназы. Этот способ принят авторами в качестве прототипа.

Целью предлагаемого способа является повышение точности раннего прогнозирования рецидива лепры.

Поставленная цель достигается в изобретении тем, что определяют антитела к нативному и полусинтетическому антигенам M.Leprae по показателям оптической плотности и при увеличении этих показателей по сравнению с нормой в 2 и более раз определяют группу "риска" рецидива лепры.

Предлагаемым способом достигается повышение точности раннего (за 1,5 2 г.) прогнозирования активации лепрозного процесса у больных лепрой, находящихся в стадии клинического регресса и БИН 0. При осуществлении предлагаемого способа требуется минимальное количество биологического материала (10 мкл сыворотки). Способ обладает высокой чувствительностью все больные лепрой с активацией лепрозного процесса имеют повышенный уровень антител к M.Leprae и специфичностью антитела к M.Leprae не выявлены в сыворотке доноров и больных со стойким регрессом заболевания. Предлагаемый способ отличает высокая скорость получения результатов (до 4-х ч) по сравнению с прототипом (26 ч).

Эпидемиологическая ситуация по лепре в России и других странах СНГ за последние годы значительно улучшилась, однако контроль за эффективностью лечения и прогнозирование рецидивов лепры у больных, находящихся на амбулаторном лечении, является актуальным.

В настоящее время эффективность противолепрозной терапии контролируется путем периодической оценки степени микобактериальной нагрузки в коже: анализ скарификатов, определение бактериоскопического индекса (БИН), гистологическое исследование кожных биоптатов. Хронический характер болезни, генерализация процесса, медленный регресс под влиянием химиотерапии могут приводить к появлению персистирующих форм микобактерий лепры в различных органах и тканях печени, селезенке, лимфатических узлах, нервах. В этом случае вышеуказанные методы бактериоскопического контроля становятся не эффективными.

Известно, что при активной лепре в сыворотке крови больных появляются антитела к микобактериям лепры, которые можно обнаружить различными способами, в частности, иммуноферментным методом. Титры антител отражают степень антигенной нагрузки в крови и поэтому могут служить хорошим индикатором регресса, устойчивости или прогрессирования инфекции.

В качестве антитела в серологическом анализе при лепре используется полусинтетический аналог специфического углеводного эпитопа фенольного гликолипида 1 из M.Leprae. При лечении активной лепры уровень антител к этому антигену заметно снижается и через 1,5 2 г. лечения антитела к полусинтетическому антигену могут не определяться совсем. Поэтому у больных лепрой, получающих специфическое лечение более 5 лет, при отсутствии клинических признаков лепры и отрицательной бактериоскопии трудно прогнозировать течение болезни. В этом случае дополнительное использование в качестве антигена нативного препарата из M.Leprae, представляющего комплекс видоспецифических и перекрестно-реагирующих антигенов, может выявить серопозитивных лиц среди контингента больных с отрицательной реакцией на полусинтетический антиген. Обнаружение в сыворотке больных с клиническим регрессом антител к синтетическому или к нативному антигену M.Leprae и к обоим препаратам вместе является показателем присутствия в организме микобактерий лепры и служит условием включения этих больных в группу "риска" рецидива лепры.

Предлагаемый способ осуществляется следующим образом. Берем кровь из пальца с помощью скарификатора в количестве 0,1 мл в сухую пробирку. Пробирку с кровью помещаем на 1 ч в термостат при +37^oC, а затем в холодильник (+4^oC) на 1 ч для ретракции сгустка. Отстоявшуюся сыворотку отсасывали в сухую пробирку и исследовали с помощью иммуноферментного анализа (ИФА). Для длительного хранения сыворотку замораживали при -20^oС. Использовали два антигенных препарата из M.Leprae: нативный водорастворимый антиген из M.Leprae, разрушенных ультразвуком и полусинтетический (ДМГ БСА) на основе углеводного эпитопа фенольного гликолипида (ФГЛ-1) из M.Leprae.

Водорастворимые антигены получали из M.Leprae, выделенных из инфицированных тканей крыс с экспериментальной лепрой, по методу Draper (Draper P. Problems related to purification of M.Leprae from armadillos tissues and standertiration of M.Leprae preparations Jn. Report on the Enlarged S.C. Meeting, Geneva, 1979. W.H.O. Document, Annex 1, prat 1/79, p. 4 4.

M.Leprae выделяли с помощью дифференциального центрифугирования тканевых гомогенатов в градиенте плотности сахарозы, а затем оделяли от тканевых частиц в двухфазной полимерной системе, состоящей из 7% декстрана Т-500 (фирмы Pharmacia) и 5% полиэтиленгликоля с молекулярной массой 6000 дальтон (фирмы BDH). Очищенные M.Leprae подергали ультразвуковому разрушению на аппарате М Е-100 (Англия) в физиологическом растворе в течение 7 мин. при 18 кГц (килогерц). Эффект разрушения контролировали микроскопически. Суспензию разрушенных M.Leprae центрифугировали (10000 об 40 мин d 23 см), надосадок использовали в качестве нативного антигена (УЗД-М. Leprae). Полусинтетический антиген (ДМГ-БСА) был синтезирован в Институте биорганической химии АН России.

Постановку ИФА осуществляли на полистироловых микропланшетах для иммунологических реакций однократного применения (производственное объединение "Ленмедполимер" ТУ 64-2-278-79). Одновременно сенсибилизировали два планшета: 1-й УЗД-М.Leprae, 2-й полусинтетическим антигеном (ДМГ-БСА).

Первый планшет сенсибилизировали УЗД-М.Leprae в карбонат-бикарбонатном буфере pH 9,25±0,25 (12,18 г Na₂CO₃, 3,47 г NaHCO₃ и 0,2 NaN₃ растворяли в 1 л дистиллированной воды) из расчета 5 мкг антигена на 1 мл буфера в объеме 0,1 мл на 1 лунку (18 час. при +4^oC). Затем планшет отмывали 3 раза в проточной воде и 3 раза в дистиллированной воде с добавлением 0,05% твина 20, после чего в лунки планшета заливали по 0,1 мл 1% раствора бычьего сывороточного альбумина в 0,02 М фосфатно-солевом буфере (pH 7,3 7,4) и выдерживали 1 час при -37^oC. Затем вновь производили промывку лунок вышеуказанным способом и заливали в лунки по 0,1 мл исследуемых сывороток больных лепрой, разведенных до 1:400 фосфатно-солевым буфером (pH 7,4), содержащий 1% телячьей сыворотки. На планшете ставили также положительный контроль (сыворотки больных с активной лепрой) и отрицательный контроль (донорские сыворотки) в том же разведении (1: 400). Каждый образец сыворотки заливали в 2 лунки (дубликат). Планшет инкубировали при +37^oC, 1 час, после чего снова повторяли процесс отмывки. Затем в каждую лунку добавляли по 0,1 мл конъюгата (кроличьи антитела к общим иммуноглобулинам человека, меченные пероксидазой) в разведении 1:1000 и инкубировали 1 час при +37^oC. После отмывки добавляли субстратную смесь - 5 аминосалициловая кислота с 0,05% перекисью водорода (к 100 мл подогретой до 70^oC дистиллированной воды добавляли 80 мг 5-аминосалициловой кислоты, раствор охлаждали до комнатной температуры и устанавливали pH 5,9 6,0. К 18 мл полученного раствора добавляли 2 мл 0,05% р-ра перекиси водорода). Планшет выдерживали при комнатной температуре 60 мин. При наличии в сыворотке антител к УЗД-М.Leprae субстратная смесь окрашивалась в темно-коричневый цвет (положительная реакция), а контрольные лунки оставались бесцветными или слегка желтоватыми (отрицательная реакция). Результаты реакции оценивали на фотометре (Minireder 590, США), при длине волны 450 нм по интенсивности окраски исследуемого образца и выражали в единицах оптической плотности (ОП). Положительными считали образцы, показатели ОП которых в 2 и более раз превышали показатели в отрицательном контроле ОП отрицательного контроля не превышала 0,20.

Одновременно осуществляли сенсибилизацию второй планшеты. Антиген ДМГ-БСА разводили в карбонат-бикарбонатном буфере (pH 9,25±0,25) из расчета 2 мкл антигена на 1 мл буфера, разливали по 0,1 мл на лунку (1,18 г Na₂CO₃ 3,74 г NaHCO₃ и 0,2 NaN₃ растворяют в 1 л дистиллированной воды) и оставляли при +37^oC на 18 час. Затем планшет отмывали 3 раза в забуферном физ. р-ре с 0,05% твином 20 (34 г NaCl на 4 л дистиллированной воды, доводя pH до 7,4 2 м Na₂ HPO₄). После промывки в лунки планшета заливали по 0,1 мл 1% р-ра бычьего сывороточного альбумина в 0,02 М фосфатно-солевом буфере (pH 7,3 7,4) и выдерживали 1 час при температуре +37^oC. Затем вновь производили промывку вышеуказанным способом и заливали в лунки исследуемые сыворотки (в объеме 0,1 мл), больных лепрой, разведенные до 1:200 фосфатно-солевом буфером (0,584 г NaCl, 12,8 г Na₂HPO₄ 2,62 г NaH₂PO₄ содержащим 1% телячьей сыворотки. Таким же образом разводили сыворотки от больных с активной лепрой (положительный контроль) и сыворотки донора (отрицательный контроль). Планшет инкубировали 1 час при температуре +37^oC, после чего снова отмывали. Затем в каждую лунку добавляли по 0,1 мл конъюгата (кроличьи антитела к иммуноглобулинам человека класса М, меченные пероксидазой) в разведении 1:1000 и выдерживали 1 час при температуре +37^oC. После отмывки добавляли субстрат 5 аминосалициловая кислота с 0,05% перекисью водорода (к 100 мл, Подогретой до 70^oC дистиллированной воды добавляли 80 мг 5-аминосалициловой к-ты, р-р охлаждали до комнатной температуры и устанавливали pH 5,9 6,0; к 18 мл полученного раствора добавляли 2 мл 0,05% р-ра перекиси водорода). Планшет выдерживали при комнатной температуре 40 60 мин. При наличии в сыворотке крови антител к ДМГ БСА субстратная смесь окрашивалась в темно-коричневый цвет (положительная реакция), а контрольные лунки оставались бесцветными или слегка желтоватыми (отрицательная реакция). Результаты реакции оценивали инструментально на фотометре (Minireader 590, США) при длине волны 450 нм по интенсивности окраски исследуемого образца и выражали в единицах оптической плотности (ОП). Положительными считали образцы, показатели ОП которых в 2 и более раз превышали показатели ОП в отрицательном контроле, ОП отрицательного контроля не превышали 0,15.

Предлагаемый способ был апробирован в НИИ лепры на 610 больных с клиническим регрессом заболевания и отрицательной бактериоскопией, находящихся на амбулаторном лечении. Положительный эффект связан с тем, что у 29 больных лепрой, поступивших в НИИ по изучению лепры за период 1985 1992 гг. с диагнозом рецидив лепры, в сыворотке крови обнаруживали антитела к M.Leprae за 1 2 года до возникновения у них рецидива.

Серологические исследования в НИИ по изучению лепры проводятся с 1985 г.

Ниже приводятся результаты апробации предлагаемого способа.

Пример 1.

Больной Д. (история болезни N 3463) впервые поступил в НИИ по изучению лепры 2.12.69 с диагнозом: Недифференцированный тип лепры. За время пребывания в стационаре принимал специфическую противолепрозную терапию. 31.07.70 был выписан на амбулаторное лечение. При выписке кожные покровы были свободны от специфических высыпаний, БИН 0. Гистологическое исследование биоптата кожи: фиброз, небольшие инфильтраты в дерме нехарактерной структуры без микобактерий лепры. Серологическое исследование от 3.04.86 г. Кровь (0,1 мл) брали в пробирку из пальца, ставили в термостат (1 ч, +37^oC), затем в холодильник (+4^oC, 1 ч). Отбирали сыворотку и титровали на фосфатно-солевом буфере (pH 7,4), содержащем 1% телячьей сыворотки для получения 2-х разведений: 1: 200 и 1:400. В две лунки (дубликат) полистиролового планшета, предварительно сенсибилизированного УЗД-М.Leprae (5 мкг/мл), заливали по 0,1 мл сыворотки больного Д. в разведении 1:400; в две лунки заливали по 0,1 мл (1: 400) сывороточного пула доноров (отрицательный контроль), в две лунки заливали по 0,1 мл (1: 400) сывороточного пула больных с активной лепрой (положительный контроль). Планшет помещали в термостат (+37^oC на 1 ч), затем отмывали фосфатно-солевым буфером (pH 7,4), содержащим 0,05% твин-20 (ФСБ-Т), после чего в лунки заливали по 0,1 мл конъюгата (кроличьи антитела к общим иммуноглобулинам человека, меченные пероксидазой) в разведении 1:1000 и инкубировали 1 ч при 37^oC. Затем планшеты отмывали ФСБ-Т, в лунки добавляли по 0,1 мл субстратной смеси (5-аминосалициловая кислота с 0,05% перекисью водорода, pH 5,9 6,0), выдерживали при комнатной температуре 1 ч и фотометрировали результаты реакции. Показатель ОП в лунках с отрицательным контролем был равен 0,05. Показатель ОП в лунках с положительным контролем был равен 0,98. Показатель ОП в лунках с сывороткой больного Д. был равен 0,54.

Сыворотку больного Д. в разведении 1:200 в объеме 0,1 мл наливали в две лунки (дубликат) планшета, предварительно сенсибилизированного ДМГ-БСА. В две лунки наливали по 0,1 мл сывороточного пула доноров (отрицательный контроль), в две лунки наливали по 0,1 мл сывороточного пула от больных с активной лепрой (положительный контроль) в том же разведении (1:200), что и сыворотка больного Д. и инкубировали при 37^oC • 1 час. Затем лунки отмывали ФСБ-Т (pH 7,4) и добавляли по 0,1 мл конъюгата (кроличьи антитела к иммуноглобулинам человека класса М, меченные пероксидазой) в разведении 1:1000. Планшет инкубировали 1 час при +37^oC, а затем отмывали, как описано выше. В лунки добавляли по 0,1 мл субстратной смеси (5-аминосалициловая кислота, с 0,05% перекисью водорода, pH 5,9 6,0). Планшет выдерживали 35 40 мин при комнатной температуре и оценивали результаты фотометрически на микрофотометре при длине волны 450 нм. Показатель ОП отрицательного контроля был равен 0,03. Показатель ОП положительного контроля был равен 0,96. показатель ОП сыворотки больного Д. был равен 0,46. Серологические исследования образцов сывороток от 5.03.87, 9.12.87, 10.06.88 и 13.10.88 проводили аналогичным образом.

Результаты серологических исследований образцов сывороток приведены в табл. 1.

13.10.88 при очередном осмотре кожных покровов обнаружена диффузная поверхностная инфильтрация без четких границ синюшного цвета в области надбровных дуг, крыльев и спинки носа, мочки уха и шеи. На передней поверхности грудной клетки и живота имелись множественные очаговые инфильтраты, местами сливающиеся между собой, имеющие четкие границы с видимо здоровой кожей, размером от 0,5 x 1 см до 7 x 10 см. На всех элементах отмечено снижение чувствительности с выходом за их пределы на 1 см. Локтевые и малоберцовые нервы утолщены, болезненные при пальпации. БИН 11,0,-5,2-0 1,5. Гистологическое исследование биоптатов кожи: активно формирующаяся гранулема погранично-лепроматозного типа, с большим количеством преимущественно гомогенных микобактерий лепры. Серологическое исследование от 13.10.88: антитела к УЗД-М. Leprae 0,72; антитела к ДМГ-БСА 0,56. Диагноз: рецидив заболевания. Специфический полиневрит. Назначено комбинированная противолепрозная химиотерапия.

В процессе лечения высыпания на кожном покрове регрессировали, БИН 0. Гистологическое исследование биоптата кожи: интрадермальные инфильтраты неспецифической структуры без микобактерий лепры. Серологическое исследование при выписке от 16.04.92: антитела к антигену УЗД-М.Leprae 0,05, антитела к антигену ДМГ-БСА 0,11.

Таким образом, пример 1 показывает, что больной Д. находясь на амбулаторном лечении, был устойчиво серопозитивен около 2,5 лет при отсутствии активных проявлений на коже и БИН 0. Уровень антител в этот период к УЗД-М.Leprae был повышен в 1,5 3,5 раза по сравнению с нормой (<0,2), а уровень антител к ДМГ-БСА был в 2,5 3 раза выше нормы (<0,15). При дополнительном обследовании серопозитивность была подтверждена клинически, бактериоскопически и гистологически: у больного диагностирован рецидив болезни.

Пример 2.

Больной Т. (история болезни N 2774) поступил первично в НИИ по изучению лепры в марте 1959 г. с диагнозом: лепроматозный тип лепры. В процессе лечения высыпания на коже полностью регрессировали, БИН 0. Гистологическое исследование биоптатов кожи: фиброз, небольшие инфильтраты в дерме нехарактерной структуры без микобактерий лепры. Больной выписан на амбулаторное лечение 12.04.72 г. Серологическое исследование проводили аналогично методу, указанному в примере 1. Данные приведены в табл. 2.

6.01.87 при очередном посещении амбулатории у больного на спине, пояснице, ягодицах обнаружены инфильтраты розовосинюшного цвета с четкими границами. На верхних конечностях диффузная инфильтрация. Во всех очагах отмечено снижение чувствительности. Локтевые и малоберцовые нервы утолщены, при пальпации болезненны, БИН 0.

Гистологическое исследование биоптатов кожи: гистологическая структура пограничного типа с трансформацией в погранично-лепроматозную форму. Умеренное количество преимущественно зернистых микобактерий лепры. Серологическое исследование от 6.01.87: антитела к УЗД-М.Leprae 0,61, антитела к ДМГ-БСА - 0,80. Диагноз: рецидив заболевания. Специфический полиневрит. Больному назначено комбинированное лечение. В процессе лечения высыпания на коже полностью регрессировали, БИН 0. Гистологическое исследование биоптата кожи: интрадермальные инфильтраты неспецифической структуры на фоне продуктивной сосудистой реакции. Микобактерий не обнаружено 9.10.89 г. Больной выписан на амбулаторное лечение. Серологическое исследование при выписке: антитела к антигену УЗД-М.Leprae 0,26 (норма <0,20), к ДМГ_БСА 0,16 (норма <0,15).

Таким образом, пример 2 показывает, что больной Т. за 2 года до рецидива был серопозитивен. Уровень антител к УЗД-М.Leprae был повышен в 2 3 раза; за 3 месяца до рецидива в 2 раза возросли показатели антител к ДМГ-БСА, а в момент рецидива в 5,5 раза. После проведенного лечения уровень антител к обоим антигенам снизился до верхних границ нормы.

Пример 3.

Больная М. (история болезни N 3120) поступила первично в июне 1963 г. с диагнозом: лепроматозный тип лепры. В процессе лечения наблюдались неоднократные обострения лепрозного процесса. 28.12.68 г была выписана на амбулаторное лечение. При выписке больной из стационара высыпания на коже полностью регрессировали, БИН 0. Гистологическое исследование биоптата кожи: незначительные по величине инфильтраты в дерме простой воспалительной структуры, изредка встречаются единичные зернистые микобактерии. Серологическое исследование проводили аналогично методу, указанному в примере 1. Данные приведены в табл. 3.

19.01.88 г. при очередном осмотре больной в области передней поверхности грудной клетки было обнаружено гипохромно-эритематозное пятно, размером 9 x 8 см с четкими границами в виде гиперпигментного венчика шириной 0,5 0,8 см. Аналогичные высыпания разных размеров отмечались над левой лопаткой, верхней половине живота. На боковой поверхности живота, поясничной области имелись поверхностные очаговые инфильтраты розового цвета (от 2 x 3,5 см до 5 x 8 см). Локтевые нервы утолщены. БИН 0,28-0 + 0,16+. Гистологическое исследование биоптатов кожи: формирующийся инфильтрат погранично-лепроматозного типа, единичные гомогенные и зернистые микобактерии лепры. Серологическое исследование от 18.01.88 г. антитела к УЗД-М.Leprae 0,98 (норма <0,20), антитела к ДМГ-БСА 0,42 (норма <0,15). Диагноз: рецидив заболевания. Специфический полиневрит. Назначено комбинированное лечение. 31.08.88 г. после проведенного лечения больная была выписана на амбулаторное лечение. При выписке: высыпания на коже регрессировали, БИН 0. Гистологическое исследование биоптата кожи: регрессирующего характера инфильтрат погранично-лепроматозного типа, небольшое количество зернистых микобактерий лепры в дерме. Серологическое исследование при выписке: антитела к УЗД-М.Leprae 0,28 (норма <0,20), антитела к ДМГ-БСА 0,18 (норма <0,15). Таким образом, из пример 3, следует, что больная М. была устойчиво серопозитивна в течение 1,5 года до регистрации у нее рецидива. Уровень антител к УЗД-М. Leprae был повышел в 1,5 4 раза, а к ДМГ-БСА в 2 2,5 раза. После лечения уровень антител к обоим антигенам снизился, но больная оставалась слабосеропозитивна, что согласуется с данными гистологического исследования при выписке на амбулаторное лечение (небольшое кол-во зернистых микобактерий лепры в дерме).

Пример 4.

Больная П. (история болезни N 1989) поступила в клинику НИИ по изучению лепры 15.05.50 г. с диагнозом: Лепроматозный тип лепры. Находилась на стационарном лечении, получала противолепрозную терапию. После проведенного лечения высыпания на коже регрессировали, БИН 0. Гистологическое исследование биоптата кожи: нехарактерной структуры инфильтрат без микобактерий лепры. 5.04.57 г. больная выписана на амбулаторное лечение. В настоящее время лепрозный процесс находится в стадии стойкого регресса. Серологические исследования проводили аналогично методу, указанному в примере N 1. Данные приведены в табл. 4.

Таким образом, из пример 4 следует, что у больной П. устойчивый регресс болезни (безрецидивное течение лепры). В течение 5 лет больна была серонегативна, т.е. показатели уровня антител к обоим антигенам M.Leprae были ниже нормы.

Пример 5.

Больная С. (история болезни N 2739) поступила в клинику НИИ по изучению лепры 12.11.58 г. с диагнозом: недифференцированный тип лепры. Находясь на стационарном лечении, получала противолепрозную терапию. 20.01.60 г. выписана на амбулаторное лечение. На коже высыпаний нет, БИН 0. Гистологическое исследование биоптата кожи: инфильтрат простой воспалительной структуры без микобактерий лепры. В мае 1974 г. у больной был зарегистрирован рецидив, назначена комбинированная терапия. В 1978 г. больная повторно выписана на амбулаторное лечение. На коже проявлений нет, БИН 0. Гистологическое исследование биоптата кожи: неспецифической структуры инфильтрат без микобактерий лепры. Лепрозный процесс в стадии стойкого регресса с 1978 г. Серологические исследования проводили аналогично методу, указанному в примере 1.

Данные приведены в табл. 5.

Таким образом, как видно из пример 5, у больной С. с 1978 г. лепрозный процесс в стадии стойкого регресса. Уровень антител к УЗД-М.Leprae и к ДМГ-БСА ниже фоновых уровней в течение 5 лет за период с 1987 1992 гг.

Пример 6.

Серологическое исследование образцов сывороток 85 доноров, полученных на Астраханской станции переливания крови. Уровень антитель к УЗД-М.Leprae колебался от 0,01 до 0,15 (норма <0,20). Уровень антител к ДМГ-БСА колебался от 0,02 до 0,10 (норма <0,15). Пример 5 показывает, что колебания уровней антител к обоим антигенам M. Leprae у 85 доноров не превышали нормальных показателей.

Предлагаемым способом достигается повышение точности раннего (за 1,5 2 г.) прогнозирования активации лепрозного процесса у больных лепрой, находящихся в стадии клинического регресса и БИН 0. При осуществлении предлагаемого способа не требуется дорогостоящих реактивов и оборудования. Cпособ может быть воспроизведен в условиях клинической лаборатории. Способ может быть рекомендован в широкую клиническую практику системы противолепрозных учреждений для оценки эффективности противолепрозной терапии, раннего прогнозирования активации лепрозного процесса, при обследовании лиц семейного контакта по лепре. Способ позволит своевременно выявить группу "риска" рецидива лепры среди больных, находящихся на амбулаторном лечении, назначить противорецидивные препараты, изменить схему лечения, назначить профилактическое лечение лицам семейного контакта по лепре, имеющим повышенный уровень антител к M. Leprae.

Назначение: медицина, лепрология, для формирования группы "риска" возникновения рецидива лепры. Сущность: в сыворотке крови определяют антитела к нативному и полусинтетическому антигенам Mycobacterium leprae hominis по показателям оптической плотности и при увеличении этих показателей по сравнению с нормой в 2 и более раза определяют группу "риска" рецидива лепры. 5 табл.

Способ определения группы риска рецидива лепры путем исследования сыворотки крови больных лепрой, отличающийся тем, что определяют антитела к нативному и полусинтетическому антигенам Mycobacterium leprae hominis по показателям оптической плотности и при увеличении этих показателей по сравнению с нормой в 2 и более раза определяют группу риска рецидива лепры.