СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СПЕЦИФИЧЕСКОГО ПОРАЖЕНИЯ ПЕЧЕНИ У БОЛЬНЫХ ЛЕПРОЙ Российский патент 2010 года по МПК A61B10/00 G01N33/68 

Изобретение относится к области медицины, а именно лепрологии, и может быть, в частности, использовано для определения специфического поражения печени у больных лепрой.

Из практики медицины известен способ определения поражения печени у больных лепрой, состоящий в том, что в сыворотке крови биохимическим методом определяют активность гамма-глутамилтрансферазы (Цемба В.П., Наумов В.З., Ющенко А.А., Умнова З.Г., Безрукавникова О.А., Урляпова Н.Г. Диагностическая информативность определения активности гамма-глутамилтрансферазы в сыворотке крови больных лепрой с хроническим персистирующим гепатитом // Научно-практическая конференция «Актуальные вопросы терапии инфекций, передаваемых половым путем, и хронических дерматозов»: Тезисы научных работ.- Екатеринбург, 2002. - С.218). Недостатками известного способа является его использование только в комплексе с другими методами диагностики, что обусловлено его недостаточной точностью; повышение активности фермента встречается при других заболеваниях (панкреатит, ишемическая болезнь сердца) и состояниях (подъем на высоту, продолжительная физическая нагрузка, беременность, недостаточность кровообращения) и не всегда обусловлено хроническим поражением печени; ложноположительные результаты теста могут быть связаны с приемом больным лекарственных препаратов (противосудорожные, противоопухолевые, изониазид) и способствуют гипердиагностике патологических состояний со стороны печени, что снижает точность способа. Все перечисленные недостатки не позволяют получить конкретный технический результат - повышение точности способа.

Известен также способ определения поражения печени у больных лепрой, состоящий в определении в сыворотке крови количества перекисно-модифицированных гепаринсодержащих апо-В-содержащих липопротеидов. (Патент №2188431 от 27.08.2002). Недостатками известного способа являются невозможность определения специфического поражения печени, трудоемкость и длительность осуществления. Кроме того, для получения результатов необходимо проведение сложных математических расчетов. Эти недостатки не дают возможность получить конкретный технический результат - повышение точности способа.

Наиболее близким способом к предлагаемому является способ определения микобактерий лепры у больных с регрессом заболевания, состоящий в определении антител к микобактериям лепры с помощью иммуноферментного анализа (Патент №2137137 от 10.09.1999).

Сходство данного способа с предлагаемым заключается в том, что они оба относятся к области медицины, а именно лепрологии, и состоят в определении антител к микобактериям лепры.

Известный способ имеет следующие недостатки:

- недостаточная точность способа в связи с тем, что известным способом невозможно определить локализацию специфического процесса;

- известный способ включает дополнительное определение перекрестно-реагирующих антител к антигенам микобактерий лепры, которые могут встречаться и при других заболеваниях;

- длительность осуществления способа ввиду необходимости постановки реакции встречного иммуноэлектрофореза;

- возможность уточнения локализации специфического процесса только по данным аутопсии.

Перечисленные недостатки не дают возможность получить конкретный технический результат - повышение точности способа.

Лепра - хроническое инфекционное гранулематозное заболевание, вызываемое Mycobacterium leprae (М.leprae), характеризующееся длительным инкубационным периодом, затяжным течением, разнообразными клиническими проявлениями, склонностью к периодическим обострениям, поражающее преимущественно кожные покровы, слизистые оболочки верхних дыхательных путей, периферическую нервную систему, опорно-двигательный аппарат и внутренние органы. Из последних наиболее часто поражается печень, в которой обычно развивается хронический лепрозный гепатит, подтверждаемый клиническими и лабораторно-инструментальными методами обследования. Нарушения функции печени у больных лепроматозным типом лепры выражаются в отклонении белкового, пигментного, ферментного, углеводного обменов, а также в нарушении антитоксической функции печени. Лепрозный процесс вызывает достаточно выраженные специфические и неспецифические изменения паренхимы и стромы органа. В этиологии поражения печени при лепре нельзя исключать и токсический компонент, обусловленный длительным приемом лекарственных средств как для специфической противолепрозной терапии, так и для лечения сопутствующей патологии. Таким образом, проблема поражения печени при лепре остается одной из наиболее актуальных в современной лепрологии. Важнейшим ее аспектом является своевременное выявление поражения печени, тем более что у части больных возможно латентное или малосимптомное течение заболевания. В то же время специфическое поражение печени при лепре наблюдается уже на ранних стадиях болезни, а наступление регресса лепрозного процесса не свидетельствует об интактности печени. Кроме того, при наличии функциональной недостаточности печени возрастает вероятность проявления неблагоприятных эффектов со стороны противолепрозных химиопрепаратов, которые больные получают на протяжении длительного времени. В связи с этим актуальным представляется поиск новых способов определения поражения печени.

В клинической практике широко используются показатели белков острой фазы, что объясняется важной ролью последних в каскаде реакций неспецифической защиты организма при патологических процессах.

Наряду с иммуноглобулинами, способными специфически связывать чужеродные антигены, в плазме крови содержится другая группа защитных белков - ингибиторов протеиназ. Широкое распространение в тканях и биологических жидкостях протеолитических ферментов, обладающих высокой физиологической активностью, требует тонкой регуляции их действия. При некоторых патологических состояниях, обусловленных воспалительной реакцией, происходит избыточная активация протеиназ, что может способствовать деструкции тканевых белков. Важным способом контроля протеолиза является присутствие в организме специфических белков - ингибиторов протеолитических ферментов, в необходимой степени ограничивающих их биологическую активность.

От 70 до 80% антипротеазной активности крови приходится на альфа-1-антитрипсин. Выступая в роли главного ингибитора нейтрофильной эластазы и альтернативного ингибитора всего класса сериновых протеиназ, альфа-1-антитрипсин закономерно возрастает при воспалительных процессах. Ингибиторы протеиаз можно рассматривать в качестве индикаторов остроты воспалительной реакции, массивности повреждения тканей, эффективности проводимой терапии и прогноза течения заболевания, и их определение представляет большую диагностическую ценность при воспалительных и деструктивных процессах, имеющих место при ряде заболеваний и состояний, в том числе и при лепре.

Хронический характер заболевания, генерализация процесса, медленный регресс под влиянием химиотерапии могут приводить к появлению персистирующих форм микобактерий лепры в различных органах и тканях - печени, селезенке, лимфатических узлах, нервах. Маркерами персистенции микобактерий лепры в органах и тканях, приводящей к развитию специфических осложнений лепрозного процесса, являются антитела. Титры антител отражают степень антигенной нагрузки, и их определение в сыворотке крови позволяет оценить эффективность специфической химиотерапии и может быть одним из критериев излеченности больных. В то же время серологическое обследование больных лепрой в стадии регресса позволяет выявлять лиц с персистенцией микобактерий в органах и тканях и таким образом формировать группы риска рецидива заболевания и развития специфических осложнений, в том числе и со стороны печени.

В качестве антигенов в серологическом анализе при лепре используются полусинтетический аналог специфического углеводного эпитопа фенольного гликолипида-1 из микобактерий лепры и нативный препарат из микобактерий лепры, представляющий комплекс видоспецифических антигенов. Обнаружение в сыворотке крови больных с клиническим регрессом антител к данным антигенам является показателем присутствия микобактерий лепры в организме.

Предлагаемое изобретение решает основную задачу - повышение точности способа. Сущность изобретения выражена совокупностью существенных признаков, достаточных для обеспечиваемого изобретением технического результата.

Предлагаемый способ состоит в том, что при определении антител к микобактериям лепры дополнительно определяют альфа-1-антитрипсин в сыворотке крови и при его значении выше 346,7 мг/дл судят о специфическом поражении печени у больных лепрой.

Предлагаемый способ осуществляется следующим образом.

Обследовано 55 больных лепрой, находящихся на стационарном и амбулаторном лечении в ФГУ «НИИ по изучению лепры Росздрава». Все больные были разделены на группы. Первую группу составили 30 пациентов, у которых были выявлены клинические, лабораторные и инструментальные (по результатам УЗИ-исследования) признаки поражения печени смешанной этиологии (специфической, токсической, вирусной). Во вторую группу были включены 25 больных, не имевших на момент обследования признаков поражения печени.

Содержание альфа-1-антитрипсина в сыворотке крови определяют иммунотурбодиметрическим методом с использованием коммерческого набора фирмы «Sentinel», Италия. Измерения производят на программируемом фотометре «Humalyzer 2000» (Германия). Статистическая обработка полученных результатов проводится с использованием критерия Стьюдента.

Антитела к микобактериям лепры определяют следующим образом. Берем кровь из пальца с помощью скарификатора в количестве 0,1 мл в сухую пробирку. Пробирку с кровью помещаем на 1 ч в термостат при +37°С, а затем в холодильник (+4°С) на 1 ч для ретракции сгустка. Отстоявшуюся сыворотку отсасывают в сухую пробирку и исследуют с помощью иммуноферментного анализа (ИФА). Для длительного хранения сыворотку замораживают при -20°С. Используют два антигенных препарата из M.leprae: нативный - водорастворимый антиген из M.leprae, разрушенных ультразвуком, и полусинтетический (DIS-BSA) на основе углеводного эпитопа фенольного гликолипида (ФГЛ-1) из M.leprae.

Водорастворимые антигены получали из M.leprae, выделенных из инфицированных тканей крыс с экспериментальной лепрой, по методу Draper (Draper P. Problems related to purification of M.leprae from armadillos tissues and standertiration of M.Leprae preparations - Jn.: Report on the Enlarged S.C. Meeting, Geneva, 1979. W.H.O. Document, Annex 1, prat 1/79, p.4-4).

M.leprae выделяют с помощью дифференциального центрифугирования тканевых гомогенатов в градиенте плотности сахарозы, а затем отделяют от тканевых частиц в двухфазной полимерной системе, состоящей из 7% декстрана Т-500 (фирмы Pharmacia) и 5% полиэтиленгликоля с молекулярной массой 6000 дальтон (фирмы BDH). Очищенные М.leprae подвергают ультразвуковому разрушению на аппарате М Е-100 (Англия) в физиологическом растворе в течение 7 мин при 18 кГц (килогерц). Эффект разрушения контролируют микроскопически. Суспензию разрушенных M.Leprae центрифугируют (10000 об 40 мин d=23 см), надосадок используют в качестве нативного антигена (УЗД-M.Leprae). Полусинтетический антиген (DIS-BSA) получен из Банка ВОЗ.

Постановку ИФА осуществляют на полистироловых микропланшетах для иммунологических реакций однократного применения (производственное объединение “Медполимер” ТУ 64-2-375-86).

Одновременно сенсибилизируют два планшета: 1-й - УЗД-M.leprae, 2-й - полусинтетическим антигеном (DIS-BSA).

Первый планшет сенсибилизируют УЗД-M.Leprae в карбонат-бикарбонатном буфере pH 9,25±0,25 (12,18 г Na₂CO₃, 3,47 г NaHCO₃ и 0,2 NaN₃ растворяют в 1 л дистиллированной воды) из расчета 5 мкг антигена на 1 мл буфера в объеме 0,1 мл на 1 лунку (18 часов при +4°С). Затем планшет отмывают 3 раза в забуферном физиологическом растворе и 3 раза - в дистиллированной воде с добавлением 0,05% твина - 20, после чего в лунки планшета заливают по 0,1 мл 1% раствора бычьего сывороточного альбумина в 0,02 М фосфатно-солевом буфере (pH 7,3-7,4) и выдерживают 1 час при 37°С. Затем вновь производят промывку лунок вышеуказанным способом и заливают в лунки по 0,1 мл исследуемых сывороток больных лепрой, разведенных до 1:400 фосфатно-солевым буфером (pH - 7,4), содержащий 1% телячьей сыворотки. На планшете ставят также положительный контроль (сыворотки больных с активной лепрой) и отрицательный контроль (донорские сыворотки) в том же разведении (1:400). Каждый образец сыворотки заливают в 2 лунки (дубликат). Планшет инкубируют при +37°С 1 час, после чего снова повторяют процесс отмывки. Затем в каждую лунку добавляют по 0,1 мл конъюгата (кроличьи антитела к общим иммуноглобулинам человека, меченные пероксидазой) в разведении 1:1000 и инкубируют 1 час при +37°С. После отмывки добавляют субстратную смесь - 5-аминосалициловая кислота с 0,05% перекисью водорода (к 100 мл подогретой до 70°С дистиллированной воды добавляют 80 мг 5-аминосалициловой кислоты, раствор охлаждают до комнатной температуры и устанавливают pH 5,9-6,0; к 18 мл полученного раствора добавляют 2 мл 0,05% раствора перекиси водорода). Планшет выдерживают при комнатной температуре 60 мин.

При наличии в сыворотке антител к УЗД-M.leprae субстратная смесь окрашивается в темно-коричневый цвет (положительная реакция), а контрольные лунки остаются бесцветными или слегка желтоватыми (отрицательная реакция). Результаты реакции оценивают на фотометре (Minireder 590, США) при длине волны 450 нм по интенсивности окраски исследуемого образца и выражают в единицах оптической плотности (ОП). Положительными считают образцы, показатели ОП которых в 2 и более раз превышают показатели в отрицательном контроле ОП. ОП отрицательного контроля не превышает 0,20.

Одновременно осуществляют сенсибилизацию второй планшеты. Антиген DIS-BSA разводят в карбонат-бикарбонатном буфере (pH 9,25±0,25) из расчета 2 мкл антигена на 1 мл буфера, разливают по 0,1 мл на лунку (1,18 г Na₂CO₃; 3,74 г NaHCO₃ и 0,2 NaN₃ растворяют в 1 л дистиллированной воды) и оставляют при +37°С на 18 часов. Затем планшет отмывают 3 раза в забуферном физиологическом растворе с 0,05% твином - 20 (34 г NaCl на 4 л дистиллированной воды, доводя pH до 7,4 2 м Na₂HPO₄). После промывки в лунки планшета заливают по 0,1 мл 1% раствора бычьего сывороточного альбумина в 0,02 М фосфатно-солевом буфере (pH 7,3-7,4) и выдерживают 1 час при температуре +37°С. Затем вновь производят промывку вышеуказанным способом и заливают в лунки исследуемые сыворотки (в объеме 0,1 мл), больных лепрой, разведенные до 1:200 фосфатно-солевом буфером (0,584 г NaCl, 12,8 г Na₂HPO₄; 2,62 г NaH₂PO₄, содержащим 1% телячьей сыворотки. Таким же образом разводят сыворотки от больных с активной лепрой (положительный контроль) и сыворотки донора (отрицательный контроль). Планшет инкубируют 1 час при температуре +37°С, после чего снова отмывают. Затем в каждую лунку добавляют по 0,1 мл конъюгата (кроличьи антитела к иммуноглобулинам человека класса М, меченные пероксидазой) в разведении 1:1000 и выдерживают 1 час при температуре +37°С. После отмывки добавляют субстрат - 5-аминосалициловая кислота с 0,05% перекисью водорода (к 100 мл подогретой до 70°С дистиллированной воды добавляют 80 мг 5-аминосалициловой кислоты, раствор охлаждают до комнатной температуры и устанавливают pH 5,9-6,0; к 18 мл полученного раствора добавляют 2 мл 0,05% раствора перекиси водорода). Планшет выдерживают при комнатной температуре 40-60 мин.

При наличии в сыворотке крови антител к DIS-BSA субстратная смесь окрашивается в темно-коричневый цвет (положительная реакция), а контрольные лунки остаются бесцветными или слегка желтоватыми (отрицательная реакция). Результаты реакции оценивают инструментально на фотометре (Minireader 590, США) при длине волны 450 нм по интенсивности окраски исследуемого образца и выражают в единицах оптической плотности (ОП). Положительными считают образцы, показатели ОП которых в 2 и более раз превышают показатели ОП в отрицательном контроле, ОП отрицательного контроля не превышает 0,15.

Результаты исследования показали, что концентрация альфа-1-антитрипсина у больных лепрой с поражением печени была выше по сравнению с больными лепрой, не имеющими данной патологии, и составила 389,77±43,1 мг/дл и 298,40±15,68 мг/дл соответственно (p<0,05). Таким образом, среднее значение содержания альфа-1-антитрипсина (М) у больных лепрой, имеющих поражение печени (первая группа), составило 389,77 мг/дл. С учетом стандартной ошибки среднего (т) нижняя граница исследуемого показателя в первой группе равна 346,7 мг/дл. Она была принята в качестве критерия, при превышении значений которого у больных лепрой определяли поражение печени.

Серологическое обследование пациентов, относящихся к первой и второй группам, позволило выявить повышение уровня антител к антигенам микобактерий лепры (УЗД-M.leprae и DIS-BSA) у больных, имеющих признаки поражения печени (норма для УЗД-M.leprae<0,20; для DIS-BSA<0,15). Уровень антител к обоим антигенам во второй группе находился в пределах допустимых значений.

Таким образом, положительные результаты серологического обследования в совокупности с повышенным уровнем альфа-1-антитрипсина свидетельствуют о персистенции микобактерий лепры в печени, что подтверждается клиническими, лабораторными (биохимический анализ крови) и инструментальными (УЗИ) методами исследования.

Предлагаемым способом достигается, по сравнению с прототипом, повышение точности способа.

Предлагаемый способ прошел успешную апробацию в клинике ФГУ «НИИ по изучению лепры Росздрава» на 55 больных в течение 2007-2009 гг.

Ниже приводятся результаты апробации.

Пример 1.

Больная М., 1932 г.р. История болезни №. 1963.

DS: Лепра, погранично-лепроматозный тип (BL), стадия регресса.

Клинически наблюдались болевой и диспепсический синдромы, по данным лабораторно-инструментальных методов исследования (биохимический анализ крови, УЗИ органов брюшной полости): повышение уровня аспартатаминотрансферазы, увеличение размеров печени, повышенная эхогенность и диффузно-неоднородная структура органа.

Определение специфического поражения печени осуществляли по предлагаемому способу.

Серологическое обследование от 31.03.2008 г.

Кровь (0,1 мл) брали в пробирку из пальца, ставили в термостат (1 ч, +37°С), затем в холодильник (+4°С, 1 ч). Отбирали сыворотку и титровали на фосфатно-солевом буфере (pH - 7,4), содержащем 1% телячьей сыворотки, для получения двух разведений: 1:200 и 1:400. В две лунки (дубликат) полистиролового планшета, предварительно сенсибилизированного УЗД-М.leprae (5 мкг/мл), заливали 0,1 мл сыворотки больной М. в разведении 1:400; в две лунки заливали по 0,1 мл (1:400) сывороточного пула доноров (отрицательный контроль), в две лунки заливали по 0,1 мл (1:400) сывороточного пула больных с активной лепрой (положительный контроль). Планшет помещали в термостат (+37°С, 1 ч), затем отмывали фосфатно-солевым буфером (pH - 7,4), содержащим 0,05% твин-20 (ФСБ-Т), после чего в лунки заливали по 0,1 мл конъюгата (кроличьи антитела к общим иммуноглобулинам человека, меченные пероксидазой) в разведении 1:1000 и инкубировали 1 ч при 37°С. Затем планшеты отмывали ФСБ-Т, в лунки добавляли по 0,1 мл субстратной смеси (5-аминосалициловая кислота с 0,05% перекисью водорода, pH 5,9-6,0), выдерживали при комнатной температуре 1 ч и фотометрировали результаты реакции. Показатель ОП в лунках с отрицательным контролем был равен 0,05. Показатель ОП в лунках с положительным контролем был равен 0,98. Показатель ОП в лунках с сывороткой больной М. был равен 0,68.

Сыворотку больной М. в разведении 1:200 в объеме 0,1 мл наливали в две лунки (дубликат) планшета, предварительно сенсибилизированного DIS-BSA. В две лунки наливали по ОД мл сывороточного пула доноров (отрицательный контроль), в две лунки наливали по 0,1 мл сывороточного пула от больных с активной лепрой (положительный контроль) в том же разведении (1:200), что и сыворотка больной М., и инкубировали при 37°С 1 ч. Затем лунки отмывали ФСБ-Т (pH 7,4) и добавляли по 0,1 мл конъюгата (кроличьи антитела к иммуноглобулинам человека класса М, меченные пероксидазой) в разведении 1:1000. Планшет инкубировали 1 час при 37°С, а затем отмывали, как описано выше. В лунки добавляли по 0,1 мл субстратной смеси (5-аминосалициловая кислота с 0,05% перекисью водорода, pH 5,9-6,0). Планшет выдерживали 35-40 мин при комнатной температуре и оценивали результаты фотометрически на микрофотометре при длине волны 450 нм. Показатель ОП отрицательного контроля был равен 0,03. Показатель ОП положительного контроля был равен 0,96. Показатель ОП сыворотки больной М. был равен 0,29.

Содержание альфа-1-антитрипсина в сыворотке крови определяли иммунотурбодиметрическим методом с использованием коммерческого набора фирмы «Sentinel», Италия. Измерения производились на программируемом фотометре «Humalyzer 2000» (Германия). Статистическая обработка поученных результатов проводилась с использованием критерия Стьюдента. Концентрация альфа-1-антитрипсина в сыворотке крови от 31.03.2008 г. составила 458,1 мг/дл.

Таким образом, серопозитивность больной в совокупности с повышенным уровнем альфа-1-антитрипсина свидетельствует о персистенции микобактерий лепры в печени, что подтверждается клиническими, лабораторными (биохимический анализ крови) и инструментальными (УЗИ) методами исследования.

Вывод: предложенный способ позволяет достоверно определить специфическое поражение печени у данной больной.

Пример 2.

Больной А., 1945 г.р. История болезни №3070.

DS: Лепра, лепроматозный (LLs) тип, стадия регресса.

Клинически отмечались непостоянный болевой и диспепсический синдромы, по данным лабораторно-инструментальных методов исследования (биохимический анализ крови, УЗИ органов брюшной полости): повышение уровня аспартатаминотрансферазы, повышение уровня общего белка при пониженном содержании альбуминов, увеличение размеров печени, повышенная эхогенность и диффузно-неоднородная структура органа.

Определение специфического поражения печени осуществляли по способу, описанному в примере 1. Серологическое исследование от 2.06.2008 г.: антитела к УЗД-М.leprae - 0,87 (норма <0,20); антитела к DIS-BSA - 0,19 (норма <0,15). Концентрация альфа-1-антитрипсина в сыворотке крови от 2.06.2008 г.составила 431,4 мг/дл.

Таким образом, серопозитивность больного в совокупности с повышенным уровнем альфа-1-антитрипсина свидетельствует о персистенции микобактерий лепры в печени, что подтверждается клиническими, лабораторными (биохимический анализ крови) и инструментальными (УЗИ) методами исследования.

Вывод: предложенный способ позволяет достоверно определить специфическое поражение печени у данного больного.

Пример 3.

Больной Н., 1932 г.р. История болезни №3645.

DS: Лепра, лепроматозный (LLs) тип, стадия регресса.

Клинически данные о поражении печени отсутствуют. По данным УЗИ: печень увеличена, эхогенность повышена, структура диффузно-неоднородная.

Определение специфического поражения печени осуществляли по способу, описанному в примере 1. Серологическое исследование от 4.02.2008 г.: антитела к УЗД-М.leprae - 0,11 (норма <0,20); антитела к DIS-BSA - 0,16 (норма <0,15). Концентрация альфа-1-антитрипсина в сыворотке крови от 4.02.2008 г. составила 314,0 мг/дл.

Вывод: незначительное повышение уровня антител лишь к одному из двух антигенов (DIS-BSA) в совокупности с концентрацией альфа-1-антитрипсина ниже установленного критерия не позволяет достоверно определить специфическое поражение печени у данного больного.

Пример 4.

Больная К., 1934 г.р. История болезни №3829.

DS: Лепра, лепроматозный тип (LLs), стадия регресса.

Клинические и лабораторно-инструментальные признаки поражения отсутствуют. Определение специфического поражения печени осуществляли по способу, описанному в примере 1. Серологическое исследование от 26.05.2008 г.: антитела к УЗД-M.leprae - 0,04 (норма <0,20); антитела к DIS-BSA - 0,03 (норма <0,15). Концентрация альфа-1-антитрипсина в сыворотке крови от 26.05.2008 г. составила 132,0 мг/дл.

Вывод: полученные результаты свидетельствуют об отсутствии специфического поражения печени.

Предлагаемым способом достигается, по сравнению с прототипом, повышение точности определения специфического поражения печени у больных лепрой. Предлагаемый способ позволяет достоверно определить не только локализацию патологического процесса, но и прижизненно установить его этиологию. Кроме того, предлагаемым способом возможно раннее, доклиническое, выявление признаков специфического поражения печени у больных лепрой как в активной стадии, так и в стадии регресса. Предлагаемый способ не требует проведения реакции встречного иммуноэлектрофореза и сложных математических расчетов, что значительно сокращает время его осуществления, также отсутствует необходимость дополнительного определения перекрестно-реагирующих антител к антигенам микобактерий лепры, которые могут встречаться и при других заболеваниях. Способ может быть воспроизведен в условиях клинической лаборатории, является малоинвазивным и необременительным для пациента.

Таким образом, авторами предложен никем ранее не предлагаемый способ определения специфического поражения печени у больных лепрой.

Предлагаемый способ может быть рекомендован для применения в противолепрозных и дерматовенерологических учреждениях системы здравоохранения страны.

Изобретение относится к области медицины, а именно лепрологии, и может быть, в частности, использовано для определения специфического поражения печени у больных лепрой. Способ обеспечивает повышение точности. У больных лепрой проводят исследование сыворотки крови, при этом определяют в сыворотки крови уровень антител к антигенам микобактерий лепры УЗД-M.leprae и DIS-BSA, а также содержание альфа-1-антитрипсина. При повышении уровня антител к двум антигенам относительно нормы и содержании альфа-1-антитрипсина выше 346,7 мг/дл определяют поражение печени у больных лепрой.

Способ определения поражения печени у больных лепрой, включающий исследование сыворотки крови, отличающийся тем, что определяют в сыворотке крови уровень антител к антигенам микобактерий лепры УЗД-M.leprae и DIS-BSA и содержание альфа-1-антитрипсина, и при повышении уровня антител к двум антигенам относительно нормы и содержании альфа-1-антитрипсина выше 346,7 мг/дл определяют поражение печени у больных лепрой.