СПОСОБ ИММУНОКОРРЕКЦИИ ПРИ ВИСЦЕРАЛЬНОМ КАНДИДОЗЕ Российский патент 1997 года по МПК G01N33/569 G01N33/53 

Изобретение относится к иммунологии и инфекционным болезням и может быть использовано в иммунокоррекции при инфекционных заболеваниях, при вакцинации с целью создания искусственного иммунитета и вакциносывороточном производстве.

Известен способ иммунокоррекции при вирусном гепатите, включающий введение зараженным животным вакцины стафилококков (см. Авторское свидетельство СССР N 1622819, кл. G 01 N 33/53, 1991).

Недостатком способа является невозможность его использования при висцеральном кандидозе.

Известно также, что Candida utilis, применяемый в микробиологической промышленности в качестве продуцента кормового белка, является непатогенным грибом (см. Забродский А. Г. 1977; Gy N.Y.W. Kreger-Van Rij, 1984).

Цель изобретения предотвращение дессиминации процесса и стимуляции иммунного ответа к возбудителю при висцеральном кандидозе.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу иммунокоррекции при висцеральном кандидозе в организм инфицированного животного вводят суспензию клеток C.utilis, в результате чего возрастает поступление возбудителя в селезенку с одновременным снижением обсемененности других соматических органов и повышаются титры антител к антигену возбудителя.

Способ осуществляется на примере экспериментального кандидоза, вызванного C.albicans, следующим образом. Культуру клеток C.utilis, выращенную на Сабуро-агаре при 37^oC в течение 48 ч, смывают стерильной дистиллированной водой, трижды отмывают от агара стерильной дистиллированной водой путем центрифугирования суспензии при 1500g в течение 15 мин и готовят суспензию клеток в стерильном физиологическом растворе в концентрации 1•10⁹ клеток в 1 мл. Полученную взвесь вводят по 2,5•10⁹ клеток на 1 кг веса в инфицированный организм внутримышечно ежедневно в течение 4 дней.

Предлагаемый способ отличается от прототипа тем, что проводят иммунокоррекцию при висцеральном кандидозе, используя при этом C.utilis.

Кандидоз моделировали однократным подкожным введением жизнеспособной культуры клеток C.albicans в дозе 2,5•10⁸ клеток на мышь. Все зараженные животные были разделены на 5 групп по 7 мышей в каждой: 4 группы опытных (различавшихся по дозе введения C.utilis) и 1 контрольная. В течение 4 дней ежедневно опытным животным инъецировали внутримышечно взвесь клеток C.utilis в физиологическом растворе в следующих дозах: I группе мышей - 1•10⁸ клеток на 1 кг веса, II группе 5•10⁸ клеток/кг, III 1•10⁹ клеток/кг, IV 5•10⁹ клеток/кг. Контрольной группе мышей вводили физиологический раствор.

На 5 день от начала эксперимента исследовали титры антител к C.albicans в сыворотке крови животных в реакции непрямой гемагглютинации и обсемененность соматических органов грибами. При этом в сердце, легких и печени грибы выявляли посевом мазков-отпечатков на Сабуро-агар с 4 глюкозой. Обсемененность селезенки, а также почек (как органа, наиболее часто поражающегося при экспериментальном кандидозе), исследовали путем посева гомогената органов на Сабуро-агар с 4 глюкозой. Идентификацию выросших колоний проводили, используя видовую особенность C.albicans образовывать ростковые трубки при инкубации в сыворотке крови.

Результаты эксперимента показали иммунокоррегирующее действие C.utilis при висцеральном кандидозе, зависящее от дозы введения этого гриба, что отражено в таблице.

Введение мышам C.utilis вызывало снижение обсемененности грибом C.albicans соматических органов (сердца, легких, печени, почек) с одновременным возрастанием обсемененности селезенки. При инъецировании C.utilis в дозе 1•10⁹ клеток/кг этот эффект проявлялся наиболее отчетливо и сопровождался стимуляцией выработки антител к инфекционному агенту.

Таким образом, C.utilis (или его фракции) оказывает иммуномоделирующий эффект при висцеральном кандидозе.

Назначение: иммунология, для иммунокоррекции при инфекционных заболеваниях, а именно при висцеральном кандидозе. Сущность: инфицированному животному при висцеральном кандидозе вводят суспензию клеток Candida utilis в стерильном физиологическом растворе концентрацией 1•10⁹ кл/мл в дозе 2,5•10⁹ кл/кг ежедневно внутримышечно в течение 4 дней. 1 табл.

Способ иммунокоррекции, включающий дробное введение инфицированному животному вакцины, отличающийся тем, что при висцеральном кандидозе вводят суспензию клеток Candida utilis в стерильном физиологическом растворе концентрацией 1•10⁹ кл/мл в дозе 2,5•10⁹ кл/кг ежедневно внутримышечно в течение 4 дней.