Способ диагностики генитального кандидоза Советский патент 1991 года по МПК G01N33/53 

Описание патента на изобретение SU1670607A1

Изобретение относится к области медицинской микологии и может быть использовано в диагностике генитального кандидоза.

Цель изобретения - повышение точности способа и сокращение времени диагностики.

Способ осуществляют следующим образом.

Сыворотку крови получают из венозной крови больного. Предварительно определяют рабочую дозу антигена. Для этого готовят 2- кратные разведения гликопротеидного антигена (Candida alblcaus). В ряд пробирок вносят пипеткой исследуемую сыворотку больного, предварительно сорбированную эритроцитами барабана, и равный объем различных разведений антигена. Полученную смесь инкубируют при 37°С в течение 30 мин и проводят постановку РТНГА с антигенным эритроцитарным диагностику- мом. Доза антигена, нейтрализующая антитела сыворотки крови, является эквивалентной. За рабочую дозу антигена принимают его разведение, на 1 порядок превышающее эквивалентную дозу. Затем приступают к постановке основного опыта. В две опытные пробирки вносят по 0.1 мл i исследуемой сыворотки крови и по 0,1 мл антигена в рабочем разведении; в две контрольные пробирки вносят по 0,1 мл физиологического раствора. Пробирку инкубируют в течение 30 мин при комнатной температуре. Затем в одну опытную и одну контрольную пробирки вносят по 2 мл 6% ПЭГеооо для определения мелких иммунных комплексов.в две оставшихся пробирки вносят такое же количество 3% раствора ПЭГеооо для определения крупных иммунных комплексов. Пробирки инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре, после чего содержимое пробирок переносят в кюветы спектрофотометра и фотометрируют при длине волны 450 нм. Результаты учитывают в единицах оптической плотности (ед.ОП).

ё

О

VI

О Os О VI

Далее определяют величину иммунных комплексов, образующихся при взаимодействии сыворотки крови с субэквивалентной дозой специфического антигена. Для этого вычисляют показатель соотношения мелких

иммунных комплексов к крупным (ИК- в

контрольных пробах (без добавления анти- . гена) и опытных пробах (с добавлением антигена), и при снижении этого показателя в опытных пробах по сравнению с контрольными (что свидетельствует об образовании у больных преимущественно крупных иммунных комплексов со специфическим антигеном) диагностируют генитальный кандидоз.

При м.е р 1. Больная Б., 30 лет, поступила в клинику Всесоюзного центра по глубоким микозам МЗ СССР с жалобами на зуд наружных половых органов, выделения из влагалища. Больна в течение 1 года после лечения высокими дозами антибиотиков широкого спектра действия по поводу эндометрита. При осмотре гинекологом обнаружены явления вульвовагинита. Микроскопия мазков отделяемого влагалища выявила дрожжевые клетки. При посеве патологического материала на сусло-агар обнаружен рост дрожжевых клеток, культура идентифицирована как Candida alblcaus. Специфи- ческие антитела в сыворотке крови выявлены в реакции непрямой иммунофлу- оресценции (РНИФ) в титрах 1:4, в реакции непрямой гемагглютинации(РНГА) в титрах 1:32. У больной исследовано соотношение мелких иммунных комплексов к крупным после добавления к сыворотке крови субэквивалентной дозы специфического антигена (опыт) и без добавления антигена (контроль). Для этого предварительно определяли рабо- чую дозу антигена следующим образом. Готовили 2-кратные разведения антигена. В ряд пробирок вносили исследуемую сыворотку больной, сорбированную эритроцитами барана, и равный объем различных разведе- ний антигена. Смесь инкубировали при 37°С в течение 30 мин и проводили постановку РТНГА с антигенным эритроцитар- ным диагностикумом. Оказалось, что при добавлении к сыворотке крови антигена в количестве 0,07 мг/мл (расчет проводился по содержанию белка в антигенном препарате) антитела сыворотки крови полностью нейтрализуются. За рабочую дозу антигена принята доза 0,035 мг/мл. Затем приступи- ли к постановке основного опыта. В две опытные пробирки внесли по 0,1 мл исследуемой сыворотки и по 0,1 мл антигена в рабочей дозе; в две контрольные пробирки внесли по 0,1 мл исследуемой сыворотки и

по 0,1 мл физиологического раствора. Пробирки инкубировали в течение 30 мин при комнатной температуре. Затем в одну опытную и одну контрольную пробирку внесли по 2 мл 6 % ПЭГеооо для определения мелких иммунных комплексов,в две оставшихся пробирки внесли по 2 мл 3% раствора ПЭГеооо для определения крупных иммунных комлексов. Пробирки инкубировали в течение 1 ч при комнатной температуре, после чего содержимое пробирок перенесли в кюветы спектрофотометра и фотометрирова- при длине волны 450 нм. Результаты учитывали в единицах оптической плотности (ед.ОП). Количество мелких иммунных комплексов в контрольной пробе составило 0,47 ед. ОП, крупных иммунных комплексов - 0,12 ед. ОП. В опытной пробе (т.е. при добавлении к сыворотке крови антигена в рабочей дозе) количество мелких иммунных комплексов повысилось до U.54 ед. Uli, a количество крупных иммунных комплексов возросло до 0,25 ед. ОП. Далее высчитывали показатель соотношения количества мелких иммунных комплексов к крупным в опытной и контрольной пробах. В контрольной пробе он оказался равным

0,47ед.ОП „Q 0,12ед.ОП

в опытной пробе он составил

0.54ед.ОП 1fi 0,25ед.ОП °

Снижение соотношения мелких иммунных комплексов к крупным в опытной пробе по сравнению с контрольной свидетельствовало о наличии у данной больной гени- тального кандидоза. Действительно, на основании повторных исследований диагноз кандидоза гениталий был подтвержден. Лечение антифунгальными препаратами привело к положительному эффекту,

П р и м е р 2, Больная М. Поступила в клинику Всесоюзного центра по глубоким микозам МЗ СССР с жалобами на зуд наружных гениталий и выделения из влагалища. Больна в течение 5 мес. При объективном осмотре гинеколога обнаружены проявления вульвовагинита. Микроскопическое исследование отделяемого влагалища показало наличие в мазках дрожжевых клеток и Frlchomonas vaglnalis. Посев патологического материала на сусло-агар выявил рост гриба, гриб был идентифицирован как С.alblcaus. Специфические антитела сыворотки крови в РНИФ выявлены в титрах 1:16, в РИГА 1:32. Показатель соотношения ИК - в контрольной (исходной)сыворотке составил

0.1ед.ОП 0 э 0.23ед.ОП и

в опытной пробе

0.12ед.ОП 0.27ед.ОП

0,44,

т.е. при взаимодействии сыворотки крови с субэквивалентной дозой специфического антигена не отмечено снижения соотношения ИК - по сравнению с этим показателем в контрольной пробе, что свидетельствовало об отсутствии кандидоза у больной. Больной был поставлен диагноз трихомониаза. Действительно, специфическое лечение трихомониаза без применения антифунгальной терапии привело к выздоровлению больной.

Предложенный способ апробирован на 20 здоровых лицах, 10 больных гинекологическими и соматическими заболеваниями некандидоэной этиологии и 20 больных ге- нитальным кандидозом.

У здоровых лиц и больных гинекологи ческими соматическими заболеваниями не- кандидозной этиологии после добавления к сыворотке крови антигена в рабочей дозе м

ИК - не менялось или возсоотношение

растало. При наличии генитального кандидоза этот показатель снижался у 17 из 20 обследованных, т.е. в 85% случаев.

При исследовании сыворотки крови соответственно известному способу (определение титров антител в сыворотке крови), диагностически значимые титры антител в РНИФ найдены в 3 из 20 больных гениталь- ным кандидозом,что составляет 15% случаев от числа обследованных, вРНГА-у5из

20 больных, т.е. в 25% случаев.

Таким образом предложенный способ повышает надежность серодиагностики не менее, чем на 60%. Время диагностики по сравнению с прототипом уменьшается на 7

- 10 дней, так как предлагаемый способ не требует исследования сыворотки крови в динамике, и выполняется однократно в течение одного рабочего дня.

Формула изобретения

Способ диагностики генитального кан- дидоэа путем забора крови, выделения сыворотки, добавления к ней антигена с последующей инкубацией, отличающийс я тем, что с целью повышения точности способа и сокращения времени диагностики, к сыворотке крови и к смеси ее с антигеном дополнительно добавляют полиэтиленгли- коль, после инкубации центрифугируют, определяют концентрацию мелких и крупных иммунных комплексов по оптической плотности, вычисляют их соотношение и при снижении соотношения иммунных комплексов в сыворотке, содержащей антиген, по сравнению с этим соотношением в сыворотке диагностируют генитальный кандидоз.

Похожие патенты SU1670607A1

название год авторы номер документа
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СИФИЛИСА 1994
  • Кубанова А.А.
  • Резайкина А.В.
  • Аковбян В.А.
  • Куршакова Т.С.
  • Федорова Л.Д.
RU2084894C1
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ХЛАМИДИОЗОВ 2003
  • Мананков В.В.
  • Пашанина Т.П.
  • Корсакова И.И.
  • Бессарабов О.И.
  • Веселков А.В.
  • Волотова А.В.
RU2251112C1
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ МИКСОМАТОЗА КРОЛИКОВ 2004
  • Дубовой Борис Лаврентьевич
  • Улько Наталья Владимировна
  • Белокабыльская Любовь Григорьевна
  • Фалеева Елена Викторовна
RU2279088C2
Способ диагностики вялотекущего ревматизма у детей 1989
  • Мощич Петр Степанович
  • Дембицкий Владимир Леонидович
  • Федорич Владимир Николаевич
SU1712877A1
ВАКЦИНА ПРОТИВ КАНДИДОЗА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ 2002
  • Агольцов В.А.
  • Ласкавый В.Н.
RU2217163C2
СПОСОБ ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИКИ ГЕНИТАЛЬНОЙ ФОРМЫ ИНФЕКЦИОННОГО РИНОТРАХЕИТА У КОРОВ 2013
  • Коба Игорь Сергеевич
  • Новикова Елена Николаевна
  • Решетка Михаил Борисович
  • Лунева Альбина Владимировна
RU2548729C1
Способ постановки реакции иммунофлюоресценции для диагностики лейкоза крупного рогатого скота 2023
  • Новикова Наталья Николаевна
  • Власенко Василий Сергеевич
  • Вишневский Евгений Алексеевич
  • Бармина Ксения Алексеевна
RU2810589C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СЫВОРОТКИ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ АНАПЛАЗМОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА В РЕАКЦИИ НЕПРЯМОЙ ИММУНОФЛУОРЕСЦЕНЦИИ ПУТЕМ ГИПЕРИММУНИЗАЦИИ КРОЛИКОВ 2007
  • Красиков Александр Пантелеевич
  • Рудаков Николай Викторович
  • Козлова Наталья Петровна
RU2368393C2
Иммуноферментная тест-система для серологической диагностики анаэробной энтеротоксемии животных и контроля напряженности поствакцинального иммунитета 2016
  • Спиридонов Антон Геннадьевич
  • Никитин Андрей Иванович
  • Спиридонов Геннадий Николаевич
  • Чернов Альберт Николаевич
  • Макаев Харис Нуртдинович
RU2625031C1
Способ диагностики изоиммунизации животных 2020
  • Дмитриев Анатолий Федорович
  • Агарков Александр Викторович
  • Агарков Николай Викторович
  • Онищенко Артем Романович
RU2749026C1

Реферат патента 1991 года Способ диагностики генитального кандидоза

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в диагностике генитального кандидоза. Цель изобретения - повышение точности способа и сокращение времени диагностики. У больного берут кровь, выделяют сыворотку, в одну ее пробу добавляют антиген, а обе пробы инкубируют с 3% и 5% полиэтиленгликоля, определяют затем количество мелких и крупных иммунных комплексов по оптической плотности, вычисляют соотношение между ними и при снижении этого соотношения в пробе сыворотки с антигеном по сравнению с пробой без антигена диагностируют генитальный кандидоз. По сравнению с прототипом повышается точность способа на 60%, а время диагностики сокращается на 7 - 10 дней.

Формула изобретения SU 1 670 607 A1

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 1991 года SU1670607A1

Большая медицинская энциклопедия, 1982, т
Печь-кухня, могущая работать, как самостоятельно, так и в комбинации с разного рода нагревательными приборами 1921
  • Богач В.И.
SU10A1

SU 1 670 607 A1

Авторы

Караев Закир Омарович

Лебедева Татьяна Николаевна

Михайлова Нина Александровна

Мирзабалаева Анна Курбановна

Даты

1991-08-15Публикация

1989-05-05Подача