СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ФИБРОАДЕНОМЫ И РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ Российский патент 1997 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к патологической анатомии.

Известен способ дифференциации диагностики доброкачественных (или внешне доброкачественных) опухолей и рака молочной железы в гистологических срезах окрашенных гематоксилином и эозином. Одним из процессов, относимых экспертами ВОЗ в группу доброкачественных опухолей молочных желез является фиброаденома (Гистологическая классификация опухолей молочной железы. 2-е изд. ВОЗ: Женева, 1984, 30 с.). Способ основан на микроскопическом выявлении узловатого образования в железе, в котором от размеров и формы железистых трубок и характера расположения соединительной ткани, можно в одних случаях выделять периканаликулярную, в других интраканаликулярную фиброаденому (Ласкина А.В. Опухоли молочной железы. В кн. Руководство по патологоанатомической диагностике опухолей человека. Изд. 2-е/Под ред. Н.А. Краевского, А. В. Смольянникова. М. Медицина, 1976, с. 191-211).

Недостатком способа является отсутствие однозначных патогистологических критериев, отличающих доброкачественные от начальных форм малигнизации фиброаденом, то есть от минимального рака молочной железы, в который в 5% от общего числа трансформируются фиброаденомы молочной железы (Ермилова В.Д. Опухоли молочной железы. В кн. Руководство по патологоанатомической диагностике опухолей человека (Под ред. Н.А. Краевского, А.В. Смольянникова, Д.С. Саркисова. 3-е изд. М. Медицина, 1982, с. 210-232). Наиболее достоверным признаком в таких случаях является инвазивный рост (Головин Д.И. Ошибки и трудности гистологической диагностики опухолей: Руководство для врачей. Л. Медицина, 1982, с. 304), что знаменует собой уже инвазивную, или диссеминированную форму заболевания.

Известен способ, выбранный в качестве прототипа, морфометрического исследования, повышающего информативность патогистологического исследования. Например, в качестве критерия дифференциальной диагностики опухолей предлагается обращать внимание на содержание ДНК ядер клеток. Наличие эпителиальных клеток с повышенным более 4 раз против нормы содержания ДНК повышает вероятность заболеть раком молочной железы в 9,1 раза (Нейштадт Э.Л. Возможности использования морфологических критериев в определении вероятности заболевания раком молочной железы. Автореф. дисс. д.м.н. Санкт-Петербург, 1991, с. 44). Недостатком способа, а именно критериев, является учет лишь паренхиматозного компонента опухоли, тогда как известно, что в развитии рака принимают участие и паренхима и строма с ее сосудами (Баженов С.М. Особенности паренхиматозно-стромальных и иммунологических взаимоотношений при раке молочной железы I-II стадии: Автореф. дисс. к.м.н. Вильнюс,1989, с. 15).

Задача предлагаемого способа заключается в разработке гистометрии паренхиматозных и стромальных компонентов опухолей молочной железы с одновременным повышением точности диагностики и дифференциальной диагностики их. Поставленная задача достигается тем, что после просмотра гистопрепарата, окрашенного рутинными методами окраски, с помощью количественной микроскопии определяют число опухолевых (паренхиматозных) клеток, а также фибробластов и фиброцитов, расположенных вокруг артериолы и при числе паренхиматозных клеток вокруг артериолы и при числе паренхиматозных клеток, равном или менее 18,67±1,96, числе фибробластов, равном или более 11,91±0,81, число фиброцитов, равном или более 14,00±1,07, диагностируют фиброаденому, а при числе паренхиматозных клеток, равном или более 44,62±6,56, числе фибробластов, равном или менее 8,32±0,61, числе фиброцитов, равном или менее 8,65±0,72, диагностируют рак молочной железы.

Основанием для предлагаемого способа являются результаты проведенного нами исследования на репрезентативном материале, показавшем статистически достоверные в высокой степени (при р <0,001) различия числа отмеченных выше клеток в сравниваемых группах фиброаденом и раков молочной железы. Величины показателей приведены в табл.1. Полученные цифровые значения апробированы в диагностике и дифференциальной диагностике опухолей молочной железы, осуществляемые в клинической практике и показавшими высокую их результативность.

Сущность предлагаемого способа заключается в следующем. Стереометрические методы основаны на принципе Delesse, согласно которому доля площади гистологического среза, приходящаяся на поперечных сечениях исследуемых компонентов, равнозначна части их объема во всем объекте. Показано, что число частиц в объеме ткани может быть определено по среднему их числу в единице площади гистологического среза.

Подсчет клеток осуществляют с помощью окулярной измерительной сетки, согласно методике ее автора (Автандилов Г.Г./Арх. пат. 1972, т. 34, вып.6, с. 76-77) в 10 полях зрения при увеличении 900х, то есть окуляр- 10 и объектив масляная иммерсия 90, вокруг артериолы, находящейся в срезе своим продольным сечением. Подсчитываемые в полях зрения клетки, совпадавшие с тест-точками большого квадрата окулярной измерительной сетки, протоколируют, затем подсчитывают общее число тех или других клеток в 10 полях зрения. Суммарный показатель сравнивается со среднестатистическим показателем, приведенным в табл. 1. Сравнение полученного и разработанного показателей позволяет уточнить представление о принадлежности опухолевого процесса в молочной железе либо к группе доброкачественных заболеваний, либо к злокачественному новообразованию. Использование способа повышает точность диагностики фиброаденомы и рака молочной железы, а также облегчает дифференциальную их диагностику.

Пример 1.

Количественная микроскопия паренхиматозных (опухолевых) клеток, фибробластов и фиброцитов, располагающихся вокруг артериолы в ткани опухоли молочной железы больной К-ой, 28 лет.

Во время микроскопии гистологического препарата опухоли молочной железы выбирают артериолу, располагающую непосредственно в опухолевой ткани и имеющую срез по ее длиннику. Подсчитывают количество паренхиматозных клеток, фибробластов и фиброцитов, расположенных вокруг данной артериолы. Подсчет клеток осуществляется с помощью морфометрической сетки, изготовленной по прописи ее автора (Автандилов Г.Г./Арх. пат. 1972, т. 34, вып. 6, с. 76-77), и вставленной в корпус окуляра микроскопа. Результаты гистометрии клеточных образований 10 полей зрения при увеличении 900х (окуляр-10, объектив - масляная иммерсия 90) протоколируют (табл.2).

Сравнение суммарных показателей количества паренхиматозных клеток, фибробластов и фиброцитов, располагающихся вокруг артериолы опухоли молочной железы со среднестатистическими величинами показателя (табл. 1), позволяет утверждать, что данная опухоль молочной железы имеет характеристики фиброаденом.

Пример 2.

Гистометрия паренхиматозных (опухолевых) клеток, фибробластов и фиброцитов, располагающихся вокруг артериолы в ткани опухоли молочной железы больной В-ой, 67 лет.

При микроскопическом исследовании гистологического препарата окрашенного гематоксилином и зозином проводят гистометрию паренхиматозных клеток, фибробластов и фиброцитов, располагающихся вокруг артериолы. Последняя располагается непосредственно посреди опухолевой ткани и в поле зрения находится своим продольным срезом. С помощью окулярной морфометрической сетки определяют число совпавших с тест-точками сетки клеток микроокружения. Подсчет ведут в 10 полях зрения при увеличении 900х (окуляр-10, объектив-масляная иммерсия 90) и сравнивают суммарное их количество со среднестатистическими показателями количества паренхиматозных клеток, фибробластов и фиброцитов (табл. 1). Результаты гистометрии клеток протоколируют (табл.3).

Суммарное количество паренхиматозных клеток оказалось равным 97, а среднестатистический показатель количества паренхиматозных клеток вокруг артериолы равен (табл. 1) для фиброаденомы 18,76±1,96 и для рака молочной железы 44,62±6,56. Полученное в результате гистометрии число паренхиматозных клеток больше среднестатистического показателя, соответствующего раку молочной железы. Сравнение количеств посчитанных фибробластов и фиброцитов с табличными данными показало, что они меньше среднестатистических показателей, соответствующих раку молочной железы. Таким образом, результаты гистометрии позволяют квалифицировать исследуемую опухоль молочной железы как злокачественное новообразование.

В заключение можно отметить, что предлагаемый способ позволяет повысить точность диагностики и дифференциальной диагностики в гистологических срезах фиброаденом и рака молочной железы, представляющих наиболее частую современную онкопатологию женщин.

Использование: в области медицины, в частности в онкологии. Сущность изобретения: морфометрически в гистологических срезах опухоли определяют количество паренхиматозных клеток, фибробластов и фиброцитов, локализованных периартериолярно, и при числе паренхиматозных клеток, равном или менее 18,67±1,96, числе фибробластов, равном или более 11,91±0,81, числе фиброцитов, равном или более 14,00±1,07, диагностируют фиброаденому, а при числе паренхиматозных клеток, равном или более 44,62±6,56, числе фибробластов, равном или менее 8,32±0,61, числе фиброцитов, равном или менее 8,65±0,72, диагностируют рак молочной железы. Способ позволяет повысить точность диагностики в гистологических срезах фиброаденомы и рака молочной железы. 3 табл.

Способ дифференциальной диагностики фиброаденомы и рака молочной железы, включающий гистометрию тканевых структур, отличающийся тем, что морфометрически в гистологических срезах опухоли определяют количество паренхиматозных клеток, фибробластов и фиброцитов, локализованных периартериолярно, и при числе паренхиматозных клеток, равном или менее 18,67 ± 1,96, числа фибробластов, равном или более 11,91 ± 0,81, числа фиброцитов, равном или более 14,00 ± 1,07, диагностируют фиброаденому, а при числе паренхиматозных клеток, равном или более 44,62 ± 6,56, числе фибробластов, равном или менее 8,32 ± 0,61, числе фиброцитов, равном или менее 8,65 ± 0,72, диагностируют рак молочной железы.