ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ АНТИВИРУСНОГО ДЕЙСТВИЯ Российский патент 1997 года по МПК A61K38/21 A61K9/08 

Настоящее изобретение касается приготовления интерферонсодержащих композиций, способных сохранять свою биологическую активность, которые могут найти применение как лекарства, например, от многих вирусных инфекций, в частности, для приготовления инъекционных растворов, интраназальных аэрозолей и капель, в том числе глазных.

Для устранения возможных побочных эффектов и обеспечения воспроизводимости наблюдаемых лечебных эффектов желательно использовать интерфероны с высокой специфической активностью. Однако хорошо известно, что растворы интерферонов с высокой специфической активностью являются биологически нестабильными, что затрудняет создание биологически устойчивых лекарственных форм клинического использования.

При создании лекарственных форм интерферонов известно использование в качестве стабилизаторов биологической активности компонентов человеческого альбумина (EP О133767, A 61 K 45/О2, 1984), сахаров-глюкозы, маннозы, галактозы, фруктозы, сахарозы и др. (EP 0133767, A 61 K 45/02, 1984), декстранов и гидроксиэтилкрахмала (EP О150067, A 61 K 45/О2, 1985), полиэтиленгликоля и гидроксиэтилцеллюлозы (EP 0152345, A 61 K 45/02, 1985), поликарбоновых кислот сополимеров метилметакрилата и малеиновой кислоты, Na-соли карбоксиметилцеллюлозы и ксилита (DE 3642223, A 61 K 45/02, 1988).

Применение человеческого альбумина как стабилизатора лекарственных форм интерферонов связано с дополнительным контролем полученных лекарственных форм на отсутствие антигена гепатита B, вируса СПИДа. Использование этого компонента ограничено также недостаточностью сырья донорской крови.

По эффекту сохранения биологической активности ближайшим аналогом данного изобретения является лиофилизованная фармацевтическая композиция, растворяемая в стерильной воде, содержащая в качестве стабилизирующих веществ аминокислоты или их производные (глицин, аланин), а также человеческий альбумин (EP 0082481 A 61 K 45/02, 1982 или US 4496537, A 61 K 45/02, 1983).

Однако биологическая стабильность этой композиции сохранялась в сущности только 6 месяцев. Кроме того, в данной композиции хотя и в уменьшенных количествах применяется человеческий альбумин.

Технической задачей настоящего изобретения является увеличение срока, в течение которого интерферонсодержащая композиция сохраняет биологическую активность с одновременным исключением из лекарственной формы человеческого альбумина.

Это достигается путем использования интерферонсодержащей композиции, включающей полиглюкин и подходящую буферную систему для поддержания pH в растворах лекарственной формы, преимущественно в интервале 7,0-7,6.

Применяемый как стабилизатор биологической активности полиглюкин (Polyglucinum, Полиглюкин ГФХ ст. 545) представляет собой стерильный раствор среднемолекулярной фракции (60000±10000 D) частично гидролизованного декстрана в 0,9% -ном изотоническом растворе хлорида натрия. Полиглюкин получают гидролизом нативного декстрана, синтезированного из сахарозы с помощью Leuconostoc mesenteroides штамма СФ-4. Содержание полиглюкина в препарате 5,5-6,5%
Количество полиглюкина, которое используют для приготовления стабилизированных интерферон-содержащих композиций, составляет 5 30 мг на каждый 1 мл разбавленного раствора.

Человеческий интерферон, используемый в предлагаемой композиции, может быть α -интерфероном или g -интерфероном в количестве, соответствующем 1•10⁶ 6,6•10⁶ ME/мл.

Биологическая активность интерферонов определялась в культуре перевиваемой линии клеток кожно-мышечной ткани человека против вируса везикулярного стоматита.

Полиглюкин для увеличения срока сохранения биологической активности интерферонсодержащими композициями, по нашим сведениям, ранее не использовался. Использование же сходных по природе веществ, таких как декстран (ММ 10000 100000 D), известно (EP 0150067, A 61 K 45/02, 1985), но только для g -интерферона и в сочетании с гидроксиэтилкрахмалом. Однако достигаемый срок сохранения биологической активности в таких случаях составляет не более 2-х недель при 40^oC.

Таким образом, данное изобретение явным образом не следует из известного уровня техники.

Возможность осуществления изобретения иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Методика получения композиций для последующих примеров одинаковая. В емкость вместимостью 1000 мл наливают 250-500 мл воды для инъекций и добавляют требуемое количество натрия хлористого. Содержимое перемешивают. К полученному раствору добавляют натрий фосфорнокислый двухзамещенный двенадцативодный и натрий фосфорнокислый однозамещенный двухводный, перемешивают до полного растворения солей и добавляют 6%-ный раствор полиглюкина. Затем доводят pH раствора фосфорной кислотой или натрием едким. К полученному раствору добавляют раствор интерферона и объем доводят водой для инъекций до 1000 мл, корректируя pH фосфорной кислотой или натрием едким.

Состав раствора для лиофильной сушки
(1000 мл, по 1 мл в лекарственной форме)
Интерферон a -2 (по ВФС 42-226 ВС-89) 1•10⁶ ME/мл
Натрий хлористый (по ГФ X ст.426) 8,5 г
Натрий фосфорнокислый двухзамещенный двенадцативодный 4,5 г
Натрий фосфорнокислый однозамещенный двухводный (ТУ 6-09-01-584-79) - 1,25 г
Полиглюкин, 6%-ный раствор (по ГФ X ст. 545) 85 мл
NaOH или H₃PO₄ До pH 7,0
Вода для инъекций До 1000 мл
Пример 2. Состав раствора для лиофильной сушки (1000 мл, по 1 мл в лекарственной форме)
Интерферон g 1,3•10⁶ ME/мл
Натрий хлористый 9,05 г
Натрий фосфорнокислый двухзамещенный двенадцативодный 6,5 г
Натрий фосфорнокислый однозамещенный двухводный 0,5 г
Полиглюкин, 6%-ный раствор 500 мл
NaOH или H₃PO₄ До pH 7,6
Вода для инъекций До 1000 мл
Пример 3. Состав раствора для лиофильной сушки (1000 мл, по 1 мл в лекарственной форме)
Интерферон a -2 3,2•10⁶ ME/мл
Натрий хлористый 8,5 г
Натрий фосфорнокислый двухзамещенный двенадцативодный 4,5 г
Натрий фосфорнокислый однозамещенный двухводный 1,25 г
Полиглюкин, 6%-ный раствор 170 мл
NaOH или H₃PO₄ До pH 7,0
Вода для инъекций До 1000 мл
Пример 4. Состав раствора для лиофильной сушки (1000 мл, по 1 мл в лекарственной форме)
Интерферон a -2 6,4•10⁶ ME/мл
Натрий хлористый 9,0 г
Натрий фосфорнокислый двухзамещенный 12-ти водный 6,5 г
Натрий фосфорнокислый однозамещенный двухводный 0,5 г
Полиглюкин, 6%-ный раствор 500 мл
NaOH или H₃PO₄ pH 7,6
Вода для инъекций До 1000 мл
Пример 5. Состав раствора для лиофильной сушки (1000 мл, по 1 мл в лекарственной форме)
Интерферон g 3,1•10⁶ ME/мл
Натрий хлористый 9,0 г
Натрий фосфорнокислый двухзамещенный 12-ти водный 6,5 г
Натрий фосфорнокислый однозамещенный двухводный 0,5 г
Полиглюкин, 6%-ный раствор 500 мл
NaOH или H₃PO₄ До pH 7,6
Вода для инъекций До 1000 мл
Пример 6. Состав раствора для лиофильной сушки (1000 мл, по 1 мл в лекарственной форме)
Интерферон g 6,6•10⁶ ME/мл
Натрий хлористый 9,0 г
Натрий фосфорнокислый двухзамещенный 12-ти водный 6,5 г
Натрий фосфорнокислый однозамещенный двухводный 0,5 г
Полиглюкин, 6%-ный раствор 500 мл
NaOH или H₃PO₄ До pH 7,6
Вода для инъекций До 1000 мл
Стабильность лекарственной формы интерферонов человека при хранении (температура 4^oC) приведена в таблице.

Как видно из данных таблицы, основное преимущество лекарственных форм интерферонов человека, содержащих полиглюкин в качестве стабилизирующего агента, состоит в сохранении своей биологической активности не менее 2-х лет. Отсутствие в композиции альбумина освобождает от дополнительного контроля полученных лекарственных форм на отсутствие антигена гепатита B, вируса СПИД. Таким образом, заявляемая композиция является новой, промышленно применимой и не следует явным образом из уровня техники.

Стабильность лекарственной формы интерферронов человека при хранении (температура 4^oC) приведена в таблице.

Пример 7. Получение лифилизата. Лиофильную сушку растворов интерферонов производят известным способом. Для этого предварительно охлаждают полки лиофилизатора и приготовленные растворы интерферонов замораживают либо на полках лиофилизатора, либо в холодильнике при температуре эвтектической точки растворов (-40^oC). Последовательность лиофилизации такова: температуру полок лиофилизатора начинают поднимать через 3-4 ч после набора вакуума, при достижении продуктом температуры полок (температура полок поднимается до комнатной температуры со скоростью 0,5^oC/ч), вакуум не снимается еще 2-3 ч, затем вакуум гасится сухим воздухом или сухими инертными газами, например сухим азотом. Потери активности интерферонов при лиофилизации не наблюдается (см. таблицу).

Использование: для приготовления лекарств от вирусных инфекций, в частности инъекционных растворов, интраназальных аэрозолей и капель, в том числе глазных. Сущность изобретения: композиция в форме лиофилизата, полученного из водного раствора, содержащего интерферон - (1-6,6)•10⁶ME, хлорид натрия 8,5-9,05 мг, частично гидролизованный декстран с ММ 60±10 кД 5-30 мг, буферную смесь - до pH раствора 7,0-7,6, в расчете на 1 мл раствора. Предпочтительно в качестве декстрана содержится полиглюкин, а в качестве буферной смеси - фосфатная смесь. 2 з.п. ф-лы, 1 табл.

1. Фармацевтическая композиция антивирусного действия в форме лиофилизата, полученного из водного раствора, содержащего интерферон, хлорид натрия, буферную смесь и декстрановый стабилизатор, отличающаяся тем, что в качестве декстранового стабилизатора она содержит частично гидролизованный декстран с мол.м. (60 ± 10) кД при следующем содержании компонентов в 1 мл раствора для лиофильной сушки:
Интерферон, МЕ (1 6,6)•10⁶
Хлорид натрия, мг 8,5 9,05
Частично гидролизованный декстран, мг 5 30
Буферная смесь До pН раствора 7,0 7,6
2. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что в качестве декстранового стабилизатора раствор для лиофильной сушки содержит полиглюкин. 3. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что в качестве буферной смеси она содержит фосфатную смесь.