АССОЦИИРОВАННАЯ ВАКЦИНА ПРОТИВ ТРИХОФИТИИ И МИКРОСПОРИИ ЛОШАДЕЙ Российский патент 1997 года по МПК A61K39/116 C12N1/14 A61K39/116 A61K39/00 A61K39/02 

Изобретение относится к области ветеринарной микологии, в частности к получению вакцины против трихофитии и микроспории лошадей.

Известна вакцина против трихофитии лошадей, содержащая живую культуру гриба штамма Trichophyton equinum N Л 2251/70 (СССР) в количестве 400-600 млн микроконидий в 1 мл раствора pH 6,2 7,0, с добавлением защитной среды, состоящей из 35 45% сахарозы и 5 7% желатина [1]
Однако известная вакцина эффективна против трихофитии лошадей и не создает иммунитета против микроспории лошадей.

Задача изобретения получение ассоциированной вакцины, обеспечивающей создание в организме лошадей напряженного и длительного иммунитета против трихофитии и микроспории.

Сущность изобретения: ассоциированная вакцина содержит антигены из штамма гриба Microsporum canis ВИЭВ N 473 и из штамма гриба Trichophyton equinum штамма N Л 2251/70 (СССР) с концентрацией каждого штамма 1•10⁷-8•10⁷ микроконидий в 1 мл вакцины, взятые в равных соотношениях. При этом она содержит защитную среду, состоящую из 35 45% сахарозы и 5 7% желатина.

Штамм Microsporum canis ВИЭВ N 473 депонирован в музее грибных культур лаборатории микологии и антибиотиков Всероссийского научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко под N 473 и обладает следующими свойствами.

Культурально-морфологические признаки.

Штамм распадается по популяционному составу на 3 основных варианта, которые все используются для изготовления вакцины.

Вариант 1. Колонии белые, округлые, возвышенные, пушистые. Обратная сторона центральной части колоний коричневого цвета, причем 50% колоний 5 7 мм в диаметре и 50% более мелкие 1 3 мм. Мицелий толстый и тонкий. Толстый мицелий крупнозернистый, тонкий без перегородок. Микроконидии овальные, грушевидные 5,2 10,4 х 2,6 5 мкм.

Вариант 2. Колонии белые, округлые, возвышенные, пушистые. Обратная сторона центра колоний коричневого цвета. Микроскопия такая же, как в 1 варианте.

Вариант 3. Колонии светло-серого цвета, однотипные, паутинистые диаметром 3 5 мм. Мицелий толстый и тонкий. Микроконидии округлые, овальные, грушевидные 5,2 10,4 х 2,6 5,2 мкм. Макроконидии чаще всего абортивные без перегородок или с 1 2 перегородками 19,5 54,6 мкм.

Процентное соотношение микро- и макроконидий в варианте колеблется в пределах 90 99,08% 1,92 10% соответственно.

Наличие макроконидий в вакцине необходимо и является признаком ее иммуногенности.

Вирулентные свойства. При нанесении на скарифицированную кожу кролика растертой в ступке культуры гриба вакцинного штамма в концентрации 300 500 млн/мл грибных клеток на 3 5 день заметна гиперемия скарифицированного участка кожи кролика, которая исчезает на 7 10 день с образованием поверхностного легкого шелушения и выздоровления на 15 25 день.

Иммуногенные свойства. Двукратная иммунизация кошек, собак, кроликов, пушных зверей и лошадей формирует у животных напряженный иммунитет сроком 1,5 2 года (срок наблюдения).

Реактогенные свойства. Внутримышечное введение вакцины у собак, кошек, кроликов, пушных зверей и лошадей не приводит к изменению клинического состояния животных.

При введении вакцины больным микроспорией лошадям на месте введения в 1
10% случаях может наблюдаться небольшая припухлость размером с грецкий орех, которая исчезает к 3 5 дню.

Пример 1. Для получения антигена используют штамм гриба Microsporum canis ВИЭВ N 473.

С матрасов проводят съем грибницы, которую гомогенизируют в стерильной дистиллированной воде и получают гемогенат с содержанием 400 600 млн микроконидий в 1 мл.

В качестве второго антигена берут штамм гриба Trichophyton equinum штамма N Л 2251/70 (СССР). Гомогенат получают аналогично. Оба гомогената смешивают в равных соотношениях и добавляют защитную среду (сахароза 30% желатина 8% вода остальное) и лиофилизируют.

Полученную вакцину применяют для лошадей двукратно в дозе 1 мл внутримышечно для профилактики (48 голов). Эффективность составила 94,3% Эту же вакцину применили на 23 больных микроспорией лошадях в лечебной дозе 2 мл, двукратно, внутримышечно. Все лошади выздоровели. Эффективность 100%
Пример 2. Гомогенат антигенов готовят как в примере 1 с той же концентрацией микроконидий и смешивают 240 мл гомогената культуры гриба Microsporum canis N 473 и 240 мл гомогената культуры гриба Trichophyton equinum штамма N Л 2251/70 (СССР). После этого 480 мл смеси гомогенатов соединяют с 520 мл защитной среды такого же состава, как в примере 1, расфасовывают по 2 мл в пенициллиновые флаконы и, так же как в примере 1, замораживают и лиофилизируют.

Полученную вакцину применяют для лошадей двукратно внутримышечно в дозе 1 мл для профилактики (17 голов). Эффективность составила 99% Эту же вакцину применили на 41 больных микроспорией лошадях в лечебной дозе 2 мл двукратно, внутримышечно. Все лошади выздоровели.

Предлагаемая вакцина является ассоциированной, ареактогенной и обеспечивает создание напряженного и длительного иммунитета одновременно против трихофитии и микроспории лошадей.

Вакцина найдет применение в коневодческих хозяйствах, ипподромах, частных секторах, акционерных обществах.

Использование: биотехнология, ветеринарная микология, вакцина против трихофитии и микроспории лошадей. Сущность изобретения: вакцина против трихофитии и микроспории лошадей содержит смесь антигенов из культур гриба Trichophyton equinum штамма N Л 2251/70 (СССР) и штамма Microsporum canis ВИЭВ N 473, взятых в равных соотношениях, и защитную среду высушивания на основе желатина и сахарозы. Концентрация каждого штамма в 1 мл вакцины составляет 1•10⁷ - 8•10⁷ микроконидий. Вакцину готовят обычным способом, присущим трихофитийным и микроспорийным вакцинам. Вакцину используют с профилактической и лечебной целью против трихофитии и микроспории лошадей внутримышечно двукратно с интервалом 10 - 14 дн. Вакцина обеспечивает создание напряженного и длительного иммунитета у лошадей против указанных заболеваний. Вакцина найдет применение на ипподромах, частных секторах и других учреждениях.

Ассоциированная вакцина против трихофитии и микроспории лошадей, отличающаяся тем, что содержит антигены из штамма гриба Microsporum canis ВИЭВ N 473 и штамма гриба Trichophyton equinum NЛ 2251/70 (СССР), взятые в равных соотношениях с конечной концентрацией каждого штамма (1 8) • 10⁷ микроконидий в 1 мл вакцины, и защитную среду на основе сахарозы и желатина.