ПРЕПАРАТ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ И ТРАВМ РОГОВОЙ ОБОЛОЧКИ ГЛАЗА Российский патент 1997 года по МПК A61K31/21 A61K31/21 A61K31/24 

Изобретение относится к медицине, точнее, к офтальмологии и может быть использовано при диагностике заболеваний и травм роговой оболочки глаза.

Известен препарат, содержащий 2% флуоресцеин натрия и 1% метиленовую синь, применяемый для диагностики заболеваний роговицы/ метод двойного окрашивания по Reis/, когда лишенный эпителия участок окрашивается в синий цвет, а окаймляющая его зона в зеленый/ Кацнельсон А.Б. Герпетические заболевания глаз. о Медицина, 1969, с.41/. Раствор метиленового синего окрашивает протоплазму и ядра поврежденных эпителиальных клеток, нервные стволы, волокна и их концевые колбы. Недостатком этого препарата является раздражающее действие метиленового синего на конъюнктиву глазного яблока, а также возникающее "фоновое свечение". Из-за применения высоких концентраций красителей проводят вымывание излишков препарата из конъюнктивальной полости, что вызывает нежелательное окрашивание век, лица пациента и рук медперсонала.

Наиболее близким к предлагаемому препарату для диагностики заболеваний и травм роговой оболочки является 1% раствор флуоресцеина [1] С диагностической целью в конъюнктивальную полость закапывают 1-2 капли 1% раствор флуоресцеина, затем через 1-2 мин удаляют остатки препарата струйным промыванием физиологическим раствором, после чего проводят биомикроскопию глаза. В процессе диагностирования возникает "фоновое" свечение неповрежденных участков роговицы в результате использования больших концентрация флуоресцеина, что позволяет провести четкую диагностику только после вымывания излишков красителя физиологическим раствором. Другим недостатком 1-ного раствора флуоресцеина является его быстрая эвакуляция слезой из конъюнктивальной полости ввиду низкой вязкости воды вследствие чего происходит его быстрое в течение 3-4 мин исчезновение из поврежденных участков роговой оболочки. Метод приготовления препарата трудоемок: требует длительного времени подготовки и значительного количества импортного красителя. Готовят 2-ный содовый раствор, затем на 100 мл этого раствора берут 1 г флуоресцеина, раствор оставляют стоять на сутки, после чего его фильтруют.

Кроме того, при вымывании красителя физиологическим раствором из конъюнктивальной полости глаза происходит нежелательное окрашивание век, лица пациента и рук медицинского персонала.

Нами была поставлена задача повысить точность диагностирования заболеваний и травм роговой оболочки путем пролонгирования действия флуоресцеина, сократить время проведения процедуры ее окрашивания и уменьшить расходы красителя.

Для решения поставленной задачи предложен препарата, содержащий флуоресцеин и водный раствор, отличающийся тем, что он содержит полиакриламид при следующем соотношении компонентов, мас.

Флуоресцеин 0,005-0,1%
Полиакриламид 0,25-1,0%
Дистиллированная вода Остальное
Препарат в указанных концентрациях позволяет точно и детально биомикроскопировать дефекты роговой оболочки. Преимущество флуоресцеина в растворе полиакриламида заключается в пролонгировании действия флуоресцеина, сокращении его расхода и времени проведения процедуры ее окрашивания, так как мы исключаем этап вымывания красителя физиологическим раствором из конъюнктивальной полости глаза, предлагая в препарате низкие концентрации флуоресцеина. Кроме того, препарат обладает лечебными противовирусными свойствами, так как полиакриламид имеет интерфероноиндуцирующие свойства /Майчук Ю.Ф. Вирусные заболевания глаз. Медицина, 1981, с.76/.

В результате экспериментальных исследований на кроликах при древовидном герпетическом кератите и непроникающей травме роговицы установлено, что применение более 0,1% раствора флуоресцеина в полиакриламиде дает неспецифическое "фоновое" окрашивание /ложно-положительнй результат/ при биомикроскопии глаза сразу после инстиллирования препарата в конъюнктивальную полость, а менее 0,005% даже незначительное окрашивание пораженных участков роговицы ввиду низкой концентрации флуоресцеина. При применении раствора, содержащего полиакриламида менее 0,25% не достигается пролонгирующий эффект, так как он быстро смывается слезой, а при использовании более 1% его раствора не происходит образования стабильной прекорнеальной красящей слезной пленки роговицы ввиду высокой вязкости и низких смачивающих свойств, препарат как бы скатывается с роговой оболочки в виде "шарика".

Препарат готовят следующим образом.

В 100 мл дистиллированной воды растворяют 0,25-1,0 г полиакриламида при постоянном помешивании для получения 0,25-1,0% раствора. В готовый водный раствор полиакриламида вносят 0,005-0,1 г флуоресцеина и перемешивают. Подготовленный раствор разливают во флаконы, укупоривают и подвергают стерилизации методом автоклавирования без изменения его свойств и активности.

Пример 1. Для диагностики травмы роговой оболочки в опыте на кроликах предлагаемым препаратом были подготовлены следующие растворы: N 1 0,005% флуоресцеин в 0,25-ном растворе полиакриламида; N 2 0,1% флуоресцеин в 1-ном водном растворе полиакриламида; N 3 0,001% флуоресцеин в 2-ном водном растворе полиакриламида.

В качестве контроля взят 1% раствор флуоресцеина.

Для создания модели экспериментальной травмы под местной анестезией 0,25 -ном раствором дикаина на роговицу обоих глаз 3-м кроликам /6 глаз/ наносят стандартные травмы трепаном. В правый глаз кролика закапывают предлагаемые растворы: N 1 первому кролику, N 2 второму, N 3 третьему.

При осмотре щелевой лампой правого глаза первого кролика после инстилляции 1-2 капель раствора N 1 наблюдают, что краситель ровным слоем покрывает роговую оболочку, в течение 1 мин после внесения красителя окрашиваются дефекты эпителия, четкая флуоресценция которых длится до 20 мин, после чего наступает уменьшение свечения поврежденных участков эпителия роговицы, следы красителя обнаруживают в дефектах роговицы до 60 мин (см. таблицу/.

При биомикроскопии правого глаза второго колика после инстиллирования 1-2 капель раствора N 2 наблюдают ровный слой красителя, покрывающий роговицу и окрашивающий дефекты эпителия в первую же минуту, четкая флуоресценция длится до 20 мин, а следы красителя обнаруживают в дефектах роговицы до 60 мин.

Как видно из таблицы, при использовании раствора N 3 у третьего кролика получают отрицательные результаты. Краситель нечетко и лишь в отдельных участках окрашивает дефекты эпителия роговицы ввиду высокой вязкости раствора и слабых смачивающих его свойств, при этом препарат как бы "скатывается" с роговицы.

При осмотре левого глаза каждого кролика /контроль/ после инстиллирования 1-ного раствора флуоресцеина окрашивание наступает только после промывания излишков красителя физиологическим раствором и длится 3-4 мин, так как 1-ный раствор красителя быстро смывается с роговицы и эвакуируется слезой в слезно-носовой канал. Отрицательным является и то, что при диагностике указанным раствором окраске подвергаются веки и шерсть кролика, руки экспериментатора, чего не происходит при использовании предлагаемого препарата.

Пример 2. Для диагностики экспериментального древовидного кератита в опыте на кроликах предложенным препаратом готовят следующие растворы; N 4 - 0,005% флуоресцеина в 1-ном водном растворе полиакриламида; N 5 0,1% флуоресцеин в 0,25-ном водном растворе полиакриламида; N 6 0,1% флуоресцеин в 0,1 -ном водном растворе полиакриламида.

Путем заражения вирусом простого герпеса /штамм Л₂ титр 10⁵ ТЦД₅₀/0,1 мл/ на роговице обоих глаз 3-х кроликов /N 4, N 5, N 6/ получена экспериментальная модель герпетического древовидного кератита.

В правый глаз кролика закапывают предлагаемые растворы: N 4 четвертому кролику, N 5 пятому, N 6 шестому, а в левый глаз каждому из них 1% раствор флуоресцеина для сравнения с предлагаемыми выше растворами.

При осмотре щелевой лампой правого глаза четвертого кролика после закапывания 1-2 капель раствора N 4 сразу появляется древовидной формы окрашивание флуресцеином пораженных участков роговицы, длящееся до 20 мин, после чего наступает уменьшение площади окрашивания и раскрашивание неповрежденных участков эпителия роговой оболочки.

После закапывания в правый глаз пятого кролика раствора N 5 биомикроскопически также наблюдают четкую флуоресценцию пораженных вирусом герпеса участков эпителия роговицы, на 20 мин уменьшение свечения и раскрашивание непораженных участков роговицы.

При использовании раствора N 6 у шестого кролика биомикроскопически наблюдают четкую флуоресценцию дефектов роговицы в течение только 3-4 мин, что связано с быстрой эвакуацией данного раствора из конъюнктивальной полости из-за низкой его вязкости, связанной с недостаточной концентрацией полиакриламида /см. таблицу/.

При осмотре левого глаза кроликов N 4, 5 и 6 /контроль/ окрашивание пораженных участков эпителия роговицы длится лишь 3 4 мин, так как 1% раствор флуоресцеина из-за низкой вязкости быстро смывается слезой, а также при промывании красителя физиологическим раствором происходит нежелательное окрашивание век и шерсти кролика и рук экспериментатора. Тогда как при использовании предлагаемого нами препарата, этап промывания излишков красителя исключается ввиду содержания его в водном растворе полиакриламида в низких концентрациях.

Пример 3. Для диагностики герпетического древовидного кератита у больного М. в конъюнктивальную полость больного глаза инстиллируют 1-2 капли 0,005% флуоресцеина в 0,25-ном водном растворе полиакриламида. Биомикроскопически в течение первой минуты наблюдают четкую флуоресценцию пораженного вирусом герпеса эпителия роговой оболочки, которая длится до 20 мин, затем наступает уменьшение свечения, следы красителя обнаруживают в течение 60 мин.

Пример 4. Для диагностики травматической эрозии роговицы у больного Н. в конъюнктивальную полость больного глаза инстиллируют 1-2 капли 0,005% флуоресцеина в 0,25-ном водном растворе полиакриламида. Биомикроскопически в течение первой минуты наблюдают четкую флуоресценцию дефекта эпителия роговицы, которая длится до 20 мин, затем наступает уменьшение свечения, следы красителя обнаруживают в течение 60 мин.

Таким образом, предлагаемый препарат для диагностики заболеваний и травм роговой оболочки, содержащий флуоресцеин в водном растворе полиакриламида, обладает значительными преимуществами в сравнении с прототипом, а именно: пролонгирует время окрашивания, что повышает точность диагностики пораженных участков роговицы, сокращает время приготовления препарата /не готовится содовый раствор/ и самой процедуры ее окрашивания /отсутствует этап удаления излишков красителя из конъюнктивальной полости глаза/, при этом уменьшаются расходы импортного красителя, кроме того оказывает лечебное и профилактическое противовирусное действие при травмах.

Использование: в медицине, а именно в офтальмологии при диагностике заболеваний и травм роговой оболочки глаза. Сущность изобретения: средство содержит флуоресцеин и водный раствор полиакриламида, при этом компоненты взяты в следующим соотношении, мас.%: флуоресцеин 0,005-0,1; полиакриламид 0,25-1,0; дистиллированная вода остальное. Технический результат: реализация указанного назначения. 1 табл.

Средство для диагностики заболеваний и травм роговой оболочки, содержащее флуоресцеин и водный раствор вещества, отличающееся тем, что оно в качестве вещества содержит полиакриламид при следующем соотношении компонентов, мас.

Флуоресцеин 0,005 0,1
Полиакриламид 0,25 1,0
Дистиллированная вода Остальноем