5-НИТРОФУРФУРИЛИДЕНГИДРАЗИД 2-ХЛОР-5,6,7,8,-ТЕТРАГИДРОХИНОЛИН-4-КАРБОНОВОЙ КИСЛОТЫ, ОБЛАДАЮЩИЙ АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТЬЮ Российский патент 1999 года по МПК C07D405/12 A61K31/47 

Соединение относится к области органической химии, классу 5,6,7,8-тетрагидрохинолин-4-карбоновых кислот, а именно к новым биологически активным 5-нитрофурфурилиденгидразиду 2-хлор-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-4-карбоновой кислоты формулы II

который может найти применение в качестве лекарственного антимикробного препарата.

Ближайшим структурным аналогом заявляемому соединению является гидразид 5,6,7,8-тетрагидрохинолин-4-карбоновой кислоты формулы

изучавшийся на наличие противотуберкулезной активности, но не показавший таковой. О противовоспалительной активности этого соединения ничего не известно. [Isber O. , Gutmann H. , Straub O. et al. Helv. Chim.acta. 38(4) 1033-1046 (1955)].

Известен и применяется в лечебной практике антимикробный препарат этакридина лактат, который взят нами в качестве эталона сравнения антимикробного действия /Машковский М.Д. Лекарственные средства (пособие по фармакотерапии для врачей), М.: Медицина, т.2, с.363 (1986).

Целью предлагаемого изобретения является получение неописанного ранее 5-нитрофурфурилиденгидразида 2 хлор-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-4-карбоновой кислоты, обладающего антимикробным действием. Поставленная цель достигается получением гидразида 2-хлор-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-4-карбоновой кислоты (I) взаимодействием метилового эфира [1] 2-хлор-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-4-карбоновой кислоты с гидразин-гидратом

Пример получения соединения I: К раствору 2,11 г (0,01 моль) метилового эфира 2-хлор-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-4-карбоновой кислоты в 30 мл этилового спирта прибавляют 1,5-кратный избыток 60% гидразин-гидрата и кипятят в течение 5 ч. Реакционную смесь охлаждают, выливают в холодную воду, выделившийся осадок отфильтровывают, промывают горячей водой до нейтральной реакции, сушат и кристаллизуют из этанола. Выход 1,34 г (58,4%). Т.пл. 185-187^oC. Найдено: N 18,75; Hal 15,61%. C₁₀H₁₂ClN₃O. Вычислено: N 18,63; Hal 15,74%.

5-нитрофурфурилиденгидразид II получается реакцией гидразида I и 5-нитрофурфурола

Пример получения заявляемого соединения 5-нитрофурфурилиденгидразида 2-хлор-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-4-карбоновой кислоты: к раствору 2,25 г (0,01 моль) гидразида 1 в 15 мл уксусной кислоты прибавляют 1,41 г (0,01 моль) 5-нитрофурфурола, выдерживают при комнатной температуре 1 сутки. Выпавший осадок отфильтровывают,кристаллизуют из уксусной кислоты. Выход 1,46 г (65,2%). Т.пл. 198-200^oC. Найдено: N 15,91; Cl 10,22%. C₁₅H₁₃ClN₄O₄. Вычислено: N 16,07; Cl 10,17%.

Заявляемое соединение представляет собой светло-желтое кристаллическое вещество, растворимое в ДМФА, уксусной кислоте. В ИК-спектре (Specord, суспензия в вазелиновом масле) присутствует полоса поглощения при 1630 см^-1(CO).

Исследование бактериостатической активности соединения проводили на кафедре микробиологии, а острой токсичности - на кафедре фармакологии Пермской фармацевтической академии.

Для определения бактериостатической активности (Першин Г. Н. Методы экспериментальной химиотерапии. М. , с. 109-111, 456-460 (1959). Приказ МЗ СССР N 250 от 13.03.75 Об унификации методов определения чувствительности микроорганизмов к химиотерапевтическим препаратам. М., 1975.) брали навеску 0,05 г и растворяли в 5 мл соответствующего растворителя. Разведение 1:100. Исходное разведение препарата готовили на мясопептонном бульоне (МПБ) в разведении 1: 500 путем смешивания (1 мл разведения препарата 1:100 и 4 мл МПБ). Для опыта брали ряды пробирок, содержащих по 2 мл МПБ. Использован метод двухкратных серийных разведений путем последовательного переноса 2 мл жидкости из одной пробирки в другую. В качестве контроля использовали пробирки со средой без препарата. Исследования проводили по отношению к двум видам тест-микробов: грамположительному - золотистому стафилококку и грамотрицательному - кишечной палочке. Суточную агаровую культуру тест-микробов смывали изотоническим раствором хлорида натрия и доводили по оптическому стандарту до концентрации 500 млн микробных тел в мл. Стандартное разведение разводили по содержанию 5 млн микробных тел в 1 мл. После добавления микробной взвеси пробирки инкубировали при 37^oC. Учет результатов проводили через 18-20 ч по наличию роста бактерий (помутнение среды) или по его отсутствию за счет антибактериального действия препарата. Показателем антибактериальной активности химических соединений является минимальная ингибирующая концентрация (МИК) препарата (в мкг/мл), задерживающая рост соответствующего тест-микроба при стандартной постановке опыта.

Была определена острая токсичность (ЛД₅₀) соединения II на белых мышах массой 21 - 26 г при однократном внутрибрюшинном введении в 2% крахмальной слизи. Каждой паре вводили дозу в порядке возрастания. Гибель животных регистрировали в течение 1 сут. ЛД₅₀ в размерах колебаний вычисляли экспресс-методом при p = 0,05 [5].

Сравнивали острую токсичность ЛД₅₀, противомикробную активность против золотистого стафилококка, кишечной палочки и величину отношения МИК исследуемого соединения к его ЛД₅₀ в сравнении с широко применяемым в медицине противомикробным препаратом этакридина лактатом [5].

Результаты испытаний представлены в таблице.

Согласно классификации токсичности препаратов соединение II относится к классу малотоксичных препаратов, оно в 7,1 раз менее токсично, чем этакридина лактат.

Как видно из таблицы исследуемое соединение по антимикробной активности по отношению к стафилококку в 500 раз и по отношению к кишечной палочке - в 126 раз более активно по сравнению с этакридина лактатом. Отношение МИК (мкг/мг) к токсичности ЛД₅₀ (мг/кг) составляет для стафилококка - 0,002 и для кишечной палочки 0,0078.

Таким образом, 5-нитрофурфурилиденгидразид 2-хлор-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-4-карбоновой кислоты (II) проявляет выраженную антимикробную активность и является малотоксичным. Следовательно, заявляемое соединение II может найти применение в медицине в качестве противомикробного лекарственного средства.

Измеров И. Ф. и др. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии. М., Медицина, с.197 (1977)о

Изобретение относится к 5-нитрофурфурилиденгидразиду 2-хлор-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-4-карбоновой кислоты, обладающему бактериостатической активностью в отношении золотистого стафилококка с МИК 1 мкг/л и кишечной палочки - 3,9 мкг/мл при ЛД₅₀ более 500 мк/кг. 1 табл.

5-Нитрофурфурилиденгидразид 2-хлор-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-4-карбоновой кислоты формулы

обладающий антимикробной активностью.