1-ФЕНИЛ-2-[β-(5'-НИТРО-2'-ФУРИЛ)ВИНИЛ]-6,7,8,9-ТЕТРАГИДРОПИРИМИДО[4,5-b] ХИНОЛИН-4-ОН И 1-МЕТАХЛОРФЕНИЛ-2-[β-(5'-НИТРО-2'-ФУРИЛ)ВИНИЛ]-7,8-ДИГИДРО-6Н-ПИРИМИДО[4 ,5-b]-ПИРИНДИН-4-ОН, ПРОЯВЛЯЮЩИЕ АНТИМИКРОБНУЮ АКТИВНОСТЬ Российский патент 2001 года по МПК C07D405/06 C07D487/04 A61K31/341 A61K31/519 A61P31/04 

Изобретение относится к области органической химии, к классу пиримидо[4,5-b] хинолинов и пиримидо[4,5- b]пириндинов, а именно к новым биологически активным 1-фенил-2- [β-(5'-нитро-2'-фурил)винил]-6,7,8,9-тетрагидропиримидо[4,5-b]хинолин-4-ону(I)и1-метахлорфенил-2-[β-(5'-нитро-2'-фурил)винил]-7,8-дигидро-6H-пиримидо[4,5-b]пириндин-4-ону (II), формулы


которые могут найти применение в качестве лекарственных антимикробных препаратов.

Ближайшими структурными аналогами заявляемым соединениям являются 1-паратолил-(а) и 1-параметоксифенил-2-[β-(5'-нитро-2'-фурил)винил]- 7,8-дигидро-6H-пиримидо[4,5-b]пириндин-4-оны (б), формулы

а R= CH₃, б R=OCH₃, обладающие бактериостатической активностью (Галеева Р. Н. , Гаврилов М.Ю., Воронина Э.В., Коньшин М.Е. Хим.-фармац. журн., 1996, т. 30, N 11, с. 37-38).

Известны и применяются в лечебной практике антимикробные препараты фурацилин (Машковский М.Д. Лекарственные средства (пособие по фармакотерапии для врачей).- М.: Медицина, 1993, т. 2, с. 358) и пефлоксацин (Мокрушина Т. А. , Чарушин В.Н., Чупахин О.Н. Хим.-фармац. журн., 1995, N 9, с. 5-19), которые взяты нами в качестве эталонов сравнения антимикробного действия.

Целью предлагаемого изобретения является получение новых 1-фенил-2-[β-(5'-нитро-2'-фурил)винил]-6,7,8,9-тетрагидропиримидо [4,5-b]хинолин-4-она и 1-метахлорфенил-2-[ β-(5'-нитро-2'-фурил)винил] -7,8- дигидро-6H-пиримидо[4,5-b)пириндин-4-она, обладающих антимикробным действием.

Поставленная цель достигается реакцией по типу альдольной конденсации между метильной группой во 2-ом положении 1-арил-2-метил-6,7-три(тетра)метиленпиридо[2,3-d] пиримидин-4-онов (Гаврилов М.Ю., Коньшин М.Е. Химия гетероцикл. соед., 1988, N 1, с. 85-87; Галеева Р.Н., Гаврилов М.Ю., Воронина Э.В., Коньшин М.Е. Хим.-фармац. журн., 1996, т. 30, N11, с. 37-38), проявляющей кислотные свойства, и 5-нитрофурфуролом при нагревании в ледяной уксусной кислоте.

I R=H, n=2; II R=Cl, n=1.

Пример получения заявляемых соединений 1-фенил-2-[β-(5'- нитро-2'-фурил)винил] -6,7,8,9-тетрагидропиримидо[4,5-b]хинолин-4- она (I) и 1-метахлорфенил-2-[ β -(5'-нитро-2'-фурил)винил]-7,8- дигидро-6H-пиримидо[4,5-b]-пириндин-4-она (II): раствор эквимолекулярных количеств (0,01 моль) 1-фенил-2-метил-6,7,8,9-тетрагидропиримидо [4,5-b] хинолин-4-она или 1 -метахлорфенил-2-метил-7,8-дигидро-6H- пиримидо[4,5-b]пириндин-4-она и 5-нитрофурфурола в ледяной уксусной кислоте нагревают 30 мин. Выпавший осадок отфильтровывают и кристаллизуют из уксусной кислоты. Соединение I: выход 0,32 г (78,2%); Т. пл. 251-252^oC; найдено, %: C 66,78; H 4,51; N 13,32; C₂₃H₁₈N₄O₄; вычислено, %: C 66,66; H 4,38; N 13,52. II: выход 0,37 г (86,1%); Т.пл. 255- 256^oC; найдено,%: N 12,71; Hal 8,03; C₂₂H₁₅ClN₄O₄; вычислено,%: N 12,89; Hal 8,15.

Заявляемые соединения представляют собой желтоватые кристаллические вещества, растворимые в ДМФА, уксусной кислоте, малорастворимые в спиртах. В ИК спектрах (UR-20) наблюдаются пики при 1650... 1660 (CO) см^-1 (суспензия в вазелиновом масле). В спектре ПМР (BS-587 A, 80,023 мГц, Тесла, ДМСО·d₆) соединения II имеются следующие сигналы: 1,90...2,11 (2H, 7-СН₂, м), 2,63... 3,10 (4H, 6-СН₂ и 8-СН₂, м), 6,39; 7,82 и 7,19; 7,65 (два HC= д), 7,44... 7,70 (ароматические протоны, м), 8,23 (H, 5-CH=, с). Спектр ПМР соединения 1 также соответствует придаваемой ему структуре.

Исследование антимикробной активности (Першин Т.Н. Методы экспериментальной химиотерапии. - М., 1959, с. 109-111, 456-460; Приказ М3 СССР N 250 от 13.03.75. Об унификации методов определения чувствительности микроорганизмов к химиотерапевтическим препаратам.- М., 1975) заявляемых соединений I, II проводилось на кафедре микробиологии, а острой токсичности - на кафедре фармакологии Пермской фармацевтической академии. Для определения брали навеску 0,05 г и растворяли в 5 мл соответствующего растворителя. Разведение 1:100. Исходное разведение препарата готовили на мясопептонном бульоне (МПБ) в разведение 1:500 путем смешивания (1 мл разведения препарата 1:100 и 4 мл МПБ). Для опыта брали ряд пробирок, содержащих по 2 мл МПБ. Использован метод двукратных серийных разведений путем последовательного переноса 2 мл жидкости из одной пробирки в другую. В качестве контроля использовали пробирки со средой без препарата. Исследование проводили по отношению к двум видам тест-микробов: грамположительному - золотистому стафилококку и грамотрицательному - кишечной палочке. Для заражения использовали суточную агаровую культуру, которую смывали изотоническим раствором хлорида натрия и доводили по оптическому стандарту до концентрации 500 млн микробных тел в 1 мл. Стандартное разведение разводили еще до содержания 5 млн микробных тел в 1 мл. После заражения пробирки инкубировали при 37^oC. Учет результатов проводили через 18-20 ч по наличию роста бактерий (помутнение среды) или по его отсутствию за счет антибактериального действия препарата. Показателем антимикробной активности химических соединений является минимальная ингибирующая концентрация (МИК) препарата (в мкг/мл), задерживающая рост соответствующего тест-микроба при стандартной постановке опыта.

Была определена острая токсичность (LD₅₀) соединений I, II на белых мышах массой 23-26 г при однократном внутрибрюшинном введении в 2% крахмальной слизи. Восемь животных делили на четыре группы. Каждой паре вводили одну дозу в порядке возрастания. Гибель животных регистрировали в течение 1 сут. LD₅₀ в размерах колебаний вычисляли экспресс-методом при p= 0,05 (Измеров Н. Ф. и др. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном введении. - М.: Медицина, 1977, с. 197). Результаты исследований представлены в таблице.

Как видно из данных таблицы, соединение I в 12,8 раз превышает по активности пефлоксацин и в 1280 раз - фурацилин в отношении кишечной палочки. Соединение I активнее фурацилина в отношении золотистого стафилококка в 40 раз. Соединение II активнее пефлоксацина в 51,2 раза, и фурацилина - в 2560 раз в отношении золотистого стафилококка, также это соединение активнее пефлоксацина в 3,2 раз, а фурацилина - в 320 раз в отношении кишечной палочки. Соединения I и II по классификации Измерова Н.Ф. (Измеров Н.Ф. и др. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном введении.- М.: Медицина, 1977, с. 197) относятся к классу малотоксичных веществ.

Таким образом 1-фенил-2-[β-(5'-нитро-2'-фурил)винил] - 6,7,8,9-тетрагидропиримидо[4,5-b] хинолин-4-он и 1-метахлорфенил- 2-[β-(5'-нитро-2'-фурил)винил] -7,8-дигидро-6H-пиримидо[4,5-b] пириндин-4-он обладают выраженным антимикробным действием.

Описываются новые производные пиримидо [4,5-b] хинолина и пиримидо[4,5-b] пиридина, а именно 1-фенил-2-[β-(5-нитро-2-фурил)винил]-6,7,8,9-тетрагидропиримидо[4,5-b]хинолин-4-он(I)и1-метахлорфенил-2-[β-(5-нитро-2-фурил)винил]-7,8-дигидро-6H-пиримидо[4,5-b]пириндин-4-он (II), которые обладают антимикробным действием и в 12,8 раз превышают по активности пеорлоксацин и в 1280 - фурацилин в отношении кишечной палочки и относятся к классу малотоксичных веществ. Соединения I и II получены конденсацией по метильной группе во 2 положении 1-фенил-2-метил-6,7,8,9-тетрагидропиримидо[4,5-b]хинолин-4-она или 1-метахлорфенил-2- метил-7,8-дигидро-6Н-пиримидо[4,5-b] пириндин-4-она с 5-нитрофурфуролом при нагревании 0,5 ч в лед. АсОН. 1 табл.

1-Фенил-2-[β-(5'-нитро-2'-фурил)винил]-6,7,8,9-тетрагидропиримидо[4,5-b] -хинолин-4-он формулы I

и 1-Метахлорфенил-2-[β-(5'-нитро-2'-фурил)винил] -7,8-дигидро-6H-пиримидо[4,5-b]пириндин-4-он формулы II

обладающие бактерицидной активностью.