5-НИТРОФУРФУРИЛИДЕНГИДРАЗИД 2-АМИНО-5,6,7,8-ТЕТРАГИДРОХИНОЛИН-3-КАРБОНОВОЙ КИСЛОТЫ Российский патент 1999 года по МПК C07D405/12 C07D405/12 C07D215/38 C07D307/70 A61K31/47 

Заявляемое соединение относится к области органической химии, классу 5,6,7,8-тетрагидрохинолин-3-карбоновых кислот, а именно к новому биологически активному 5-нитрофурфурилиденгидразиду 2-амино-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-3-карбоновой кислоты (I):

который может найти применение в качестве лекарственного антимикробного препарата.

Известен и применяется в лечебной практике антимикробный препарат фурацилин [2] , который взят нами в качестве эталона сравнения антимикробного действия.

Целью предлагаемого изобретения является получение нового, не описанного ранее, 5-нитрофурфурилиденгидразида 2-амино-5,6,7,8- тетрагидрохинолин-3-карбоновой кислоты, обладающего антимикробным действием. Поставленная цель достигается получением 5-нитрофурфурилиденгидразида 2-амино-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-3- карбоновой кислоты взаимодействием этилового эфира 2-амино-5,6,7,8- тетрагидрохинолин-3-карбоновой кислоты [3] с гидразингидратом с последующим вовлечением промежуточного гидразида без его выделения в реакцию с 5-нитрофурфуролом.

Пример получения 5-нитрофурфурилиденгидразида 2-амино-5,6,7,8- тетрагидрохинолин-3-карбоновой кислоты. Раствор 2,2 г (0,01 моль) этилового эфира 2-амино-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-3-карбоновой кислоты и 5 мл гидразингидрата в 30 мл этанола кипятят 5 ч, выливают в воду. Выделившееся вещество отфильтровывают, промывают водой, сушат на воздухе, растворяют в 50 мл этанола, приливают раствор 1,40 г (0,01 моль) 5-нитрофурфурола в 20 мл бензола и выдерживают при 20^o С сутки. Выпавший осадок отфильтровывают и кристаллизуют из этанола, выход 0,11 г (75,9%). Т. пл. 233-234^o (р). Найдено: C 54,86; H 4,28; N 21,32%. C₁₅H₁₅N₅O₄. C 54,71; H 4,59; N 21,27%.

Заявляемое соединение представляет собой светло-желтое кристаллическое вещество, растворимое в этаноле, ДМФА, уксусной кислоте, в ИК спектре (Specord, суспензия в вазелиновом масле) которого имеются полосы при 1660 (CO) и 3170-3380 см^-1 (NH и NH₂).

Исследование бактериостатической активности заявляемого соединения I проводилось на кафедре микробиологии, а острой токсичности - на кафедре фармакологии Пермской фармацевтической академии. Соединение I исследовали на наличие бактериостатической активности [4, 5]. Для определения брали навеску 0,05 г и растворяли в 5 мл соответствующего растворителя. Разведение 1:100. Исходное разведение препарата готовили на мясопептонном бульоне (МПБ) в разведении 1: 500 путем смешивания (1 мл разведения препарата 1:100 и 4 мл МПБ). Для опыта брали ряды пробирок, содержащих по 2 мл МПБ. Использовали метод двухкратных серийных разведений путем последовательного переноса 2 мл жидкости из одной пробирки в другую. В качестве контроля использовали пробирки со средой без препарата. Исследования проводили по отношению к двум видам тест-микробов: грамположительному - золотистому стафилококку и грамотрицательному - кишечной палочке. Для заражения использовали суточную агаровую культуру, которую смывали изотоническим раствором хлорида натрия и доводили по оптическому стандарту до концентрации 500 млн микробных тел в 1 мл. Стандартное разведение разводили еще до содержания 5 млн микробных тел в 1 млн. После заражения пробирки инкубировали при 37^oC. Учет результатов проводили через 18-20 ч по наличию роста бактерии (помутнение среды) или его отсутствию за счет антибактериального действия препарата. Показателем антибактериальной активности химических соединений является минимальная ингибирующая концентрация (МИК) препарата (в мкг/мл), задерживающая рост соответствующего тест-микроба при стандартной постановке опыта.

Острую токсичность ЛД₅₀ (мг/кг) соединения I определяли после внутрибрюшинного введения белым мышам массой 22-26 г в виде 2% крахмальной слизи. За животными наблюдали в течение 5 дней.

Сравнивали острую токсичность ЛД₅₀, противомикробную активность против золотистого стафилококка, кишечной палочки и величину отношения МИК исследуемого соединения к его ЛД₅₀ в сравнении с широко применяемым в медицине противомикробным препаратом фурацилином [2]. Результаты испытаний представлены в таблице.

Согласно классификации токсичности препаратов [6] соединение I относится к классу малотоксичных препаратов.

Как видно из таблицы исследуемое соединение по антимикробной активности по отношению к стафилококку в 2,56 раза и по отношению к кишечной палочке в 10 раз более активно по сравнению с фурацилином. Отношение МИК (мкг/мл) к токсичности ЛД₅₀ (мг/кг) составляет для стафилококка - 0,0078 и для кишечной палочки 0,002.

Таким образом 5-нитрофурфурилиденгидразид 2-амино-5,6,7,8- тетрагидрохинолин-3-карбоновой кислоты (I) проявляет выраженную антимикробную активность и является малотоксичным. Следовательно заявляемое соединение I может найти применение в медицине в качестве противомикробного лекарственного средства.

5-Нитрофурфурилиденгидразид 2-амино-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-3-карбоновой кислоты формулы I получают взаимодействием гидразида 2-амино-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-3-карбоновой кислоты с 5-нитрофурфуролом. Соединение обладает бактериостатической активностью в отношении золотистого стафилококка с МИК 7,8 мкг/мл в отношении кишечной палочки -2,0 мкг/мл при острой токсичности соединения ЛД₅₀ равной 1000 мг/мл. 1 табл.

5-Нитрофурфурилиденгидразид 2-амино-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-3-карбоновой кислоты формулы I

обладающий антибактериальной активностью.