5(3)-ФЕНИЛ-4-ФЕНИЛАЗО-3(5)-ПИРАЗОЛКАРБОНОВАЯ КИСЛОТА, ПРОЯВЛЯЮЩАЯ АНТИМИКРОБНУЮ АКТИВНОСТЬ Российский патент 2003 года по МПК C07D231/38 A61K31/415 A61P31/04 

Изобретение относится к области органической химии, а именно к новым биологически активным соединениям класса пиразолкарбоновых кислот.

Известен в практической медицине препарат Этакредина лактат (2-этокси-6,9-диаминоакридина лактат), аналогичный по фармакологическому (противомикробному) действию предлагаемому соединению (см. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М.: Медицина, 1985, т. 2, с. 398, 409).

Наиболее близким по структуре и действию к предлагаемому соединению является 5(3)-п-толил-4-фенилазо-3(5)-пиразолкарбоновая кислота, проявляющая антимикробную активность (см. Пименова Е.В. и др. Синтез и антимикробная активность 5-арил-4-арилазо-1Н-пиразол-3-карбоновых кислот и продуктов их циклизации. - Хим.фарм.ж., 1998, 8, с.27-28).

Аналог имеет следующую структуру:

Структурный аналог обладает недостаточно высокой антимикробной активностью для практического здравоохранения.

Задачей изобретения является получение представителя класса пиразолкарбоновых кислот с более высокой антимикробной активностью.

Техническая задача решается посредством настоящего изобретения, состоит в синтезе 5(3)-фенил-4-фенилазо-3(5)-пиразолкарбоновой кислоты формулы I

проявляющей антимикробную активность.

Соединение I получают взаимодействием 2,4-диоксо-4-фенил-3-фенилгидразонобутановой кислоты с избытком гидразингидрата в среде уксусной кислоты при комнатной температуре с последующим выделением целевого продукта известными приемами.

Реакция идет по схеме, приведенной в конце описания.

Соединение I отличается от структурного аналога наличием в 5(3)-положении фенильного радикала вместо п-толильного.

Технический результат, получаемый в результате реализации изобретения, состоит в получении практически нетоксичного соединения I с высоким выходом и высокой антимикробной активностью.

Пример 1. Синтез.

К раствору 1,48 г (0,005 м) 2,4-диоксо-4-фенил-3-фенилгидразонобутановой кислоты в 20 мл уксусной кислоты добавляют 0,30 мл 80% раствора (0,005 м) гидразингидрата и перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. Через сутки осадок отфильтровывают, перекристаллизовывают из уксусной кислоты. Выход 1,44 г (99%). Т.пл. 225-226^oС (из СН₃СООН). ///2 Найдено, %: С 65,89; Н 4,19; N 18,97. C₁₆H₁₂N₄О₂. Вычислено, %: С 65,75; Н 4,14; N 19,17.

5-(3)-Фенил-4-фенилазо-3(5)-пиразолкарбоновая кислота представляет собой кристаллическое вещество желто-оранжевого цвета, нерастворимое в воде, растворимое в диоксане, уксусной кислоте и ДМСО.

В ИК-спектре полученного соединения (VR-20, вазелиновое масло) присутствуют полосы поглощения карбоксильной группы в области 1720 см^-1 (СО) и широкая полоса валентных колебаний ОН- и NH-групп, участвующих в образовании межмолекулярных водородных связей, в области 3150 см^-1.

В ПМР-спектре полученного вещества (РЯ-2310, ДМСО-d₆) имеется мультиплет протонов двух бензольных колец с центром при 7,50 м.д. и уширенный синглет протона NH-группы при 14,19 м.д. В УФ-спектре наблюдается максимум поглощения при 335 нм (ед. Е=4,49). Спектральные характеристики соединения I согласуются с литературными данными для соединений данного класса (см. Хим. фарм.ж., 1998, 8, с.27-28).

Пример 2. Антимикробная активность и токсичность.

Исследование специфического действия 5(3)-фенил-4-фенилазо-3(5)-пиразолкарбоновой кислоты проводили на двух штаммах микроорганизмов Stapylococcus aureus и Bacterium coli. Антимикробную активность соединения I определяли в жидкой питательной среде методом последовательных разведении. (см. Першин Г.Н. Методы экспериментальной химиотерапии. - М.: Медицина, 1971, с. 100, 109-117). Бактериальная нагрузка рабочего раствора соответствовала 2,5х10⁵ микробных тел в 1 мл среды. Результаты опытов учитывали после 20 часов термостатирования при 37^oС. Определяли минимальную концентрацию, ингибирующую рост микроорганизмов (МИК), в мкг/мл. Эталонами сравнения служили препарат - Этакридина лактат - и 5(3)-п-толил-4-фенилазо-3(5)-пиразолкарбоновая кислота.

Результаты исследований представлены в таблице.

Проведенные исследования показали, что соединение I проявляет выраженное бактериостатическое действие в отношении Stapylococcus aureus и Bacterium coli.

Острую токсичность изучали на белых беспородных мышах массой 18-22 г при внутрибрюшинном пути введения. За животными наблюдали в течение 14 дней. Экспериментальные данные были подвергнуты статистической обработке с вычислением средней токсической дозы LД₅₀ по методу Литчфилда и Уилкоксона (см. Беленький М. Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - Л.: Гос. изд. мед. лит-ры, 1963, с.71). LД₅₀ исследуемого соединения (см. таблицу) 5400 (4200-6180) мг/кг массы тела животного, т.е. данное соединение практически нетоксично.

Таким образом, 5(3)-фенил-4-фенилазо-3(5)-пиразолкарбоновая кислота практически нетоксична и обладает более высокой антимикробной активностью по сравнению со структурным аналогом и эталоном сравнения. Следовательно, она может найти широкое применение в медицинской практике в качестве антисептического средства.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к новым биологически активным соединениям класса пиразолкарбоновых кислот. Предложена 5(3)-фенил-4-фенилазо-3(5)-пиразолкарбоновая кислота формулы I, проявляющая антимикробную активность. Соединение формулы I получают взаимодействием 2,4-диоксо-4-фенил-3-фенилгидразонобутановой кислоты с избытком гидразингидрата в среде уксусной кислоты при комнатной температуре с последующим выделением целевого продукта известными приемами. Технический результат: получение практически нетоксичного соединения с высоким выходом (99%) и высокой антимикробной активностью. 1 табл.

5(3)-фенил-4-фенилазо-3(5)-пиразолкарбоновая кислота формулы

проявляющая антимикробную активность.