ПРОИЗВОДНЫЕ 3-ДЕЗОКСИОЛИГОСАХАРИДОВ, СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ (ВАРИАНТЫ), ПРОМЕЖУТОЧНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ Российский патент 1999 года по МПК C07H3/04 C07H3/06 C07H11/00 A61K31/715 A61K31/725 

Настоящее изобретение относится к новым производным 3-дезоксиолигосахаридов, способам их получения и содержащим их фармацевтическим композициям.

Гепарин представляет собой полисахарид группы гликозаминогликанов, известных своими антикоагулирующими свойствами. Известно [I.Bjork и U.Lindahl, "Moleculer and Cellular Biochemistry", /1982/, Dr.W.Junk Publishers-Pays-Ba] , что коагуляция крови представляет собой сложное физиологическое явление. Некоторые стимулы, такие, как контактная активация и тканевые факторы, вызывают последовательную активацию ряда коагулирующих факторов, присутствующих в плазме крови. Какова бы ни была природа стимула, конечные стадии идентичны: активированный фактор X /Xa/ активирует фактор II /также называемый протромбином/, который в своей активированной форме /фактор IIа, также называемый тромбином/ вызывает частичный протеолиз растворимого фибриногена и высвобождением нерастворимого фибрина, образующего основу сгустка крови.

В нормальных физиологических условиях активность факторов коагуляции регулируется протеинами, такими, как антитромбин III /AT-III/ и кофактор II гепарина /HC-II/, которые также присутствуют в плазме. AT-III оказывает ингибирующее воздействие на некоторое число факторов коагуляции и особенно на факторы Xa и IIа.

Ингибирование фактора Xa или фактора IIа, следовательно представляет собой преимущественную возможность достижения антикоагулирующей и антитромботической активности, поскольку эти оба фактора принимают участие в двух последних этапах коагуляции, которые независимы от исходного стимула.

Пентасахарид формулы /a/:

I/R = -COCH₃; /2/ R = -SO₃ ^-; представляет собой минимальную последовательность гепарина, требуемую для связывания с АТ-III. Это соединение /R = -SO₃ ^-/ получено около десятка лет назад путем полностью химического синтеза [P. Sinaij и др., Carbohydrate Research /1984/, 132, с. 5]. С тех пор в литературе было описано некоторое число синтетических олигосахаридов, полученных путем полностью химического синтеза и обладающих антитромботическими и антикоагулирующими активностями.

В европейском патенте ЕР-0084999 описываются производные, образованные моносахаридными единицами уроновых кислот [глюкуроновой или идуроновой] и глюкозамина и обладающие интересными антитромботическими свойствами. Кроме гидроксильных групп в качестве заместителей эти соединения содержат N-сульфатные группы, N-ацетильные группы и в некоторых случаях аномерные гидроксильные группы заменены метокси-группами.

В европейском патенте EP-0165134 также описываются синтетические олигосахариды, обладающие антитромботическими активностями. Эти соединения образованы моносахаридными единицами уроновых кислот и глюкозамина и содержит O-сульфатные или O-фосфатные группы. Производные уроновых кислот и глюкозамина, содержащие в положении 3 глюкозаминовой единицы O-сульфатную группу, также описаны в европейской заявке на патент EP-0301618. Эти соединения обладают улучшенными антитромботическими и антикоагулирующими свойствами. В европейской заявке на патент EP-0454220 описываются производные уроновых кислот и глюкозы, содержащие в качестве заместителей O-алкильные или O-сульфатные группы. Эти последние соединения также обладают антитромботическими и антикоагулирующими свойствами.

Сульфатированные гликозаминогликаноидные производные, в которых функциональные N-сульфатные, N-ацетатные или гидроксильные группы заменены алкоксильными, арилокси-, аралкилокси- или O-сульфатными группами, также описываются в европейской заявке на патент EP-0529715. Эти соединения обладают интересными антитромботическими свойствами. Эти последние также являются ингибиторами пролиферации гладких мышечных клеток.

Олигосахариды, и особенно пентасахариды, аналогичные минимальной последовательности гепарина, требуемой для связывания с AT-III, описаны в Angew. Chem. Int. Ed. Engl. /1993/, 32 /3/, с. 434-436. Эти соединения содержат единицы /звенья/ глюкуроновых кислот или глюкозы, гидроксильные функции которых заменены O-сульфатными или O-метильными группами.

В настоящее время найдено, что заменяя один или несколько гидроксильных радикалов или O-алкильных или O-сультфатных групп в положении 3 атомами водорода, в одной или нескольких сахаридных единицах, получают олигосахариды, обладающие интересными биологическими свойствами. В самом деле, соединения настоящего изобретения отличаются от других, описанных в литературе, синтетических гепариноидов своими оригинальными структурами и своими многочисленными и неожиданными биологическими свойствами. Соединения изобретения представляют собой 3-дезокси-олигосахариды, обладающие очень большой анти-факторной Xa активностью и большим сродством к AT-III. Кроме того, соединения изобретения хорошо адсорбируются в пищеварительном тракте. Следовательно, это продукты, которые могут вводиться перорально.

Более конкретно, предметом настоящего изобретения являются соединения формулы /I/:

в которой X обозначает радикал -OS₃ ^-, радикал формулы /A/: R - O/A/, радикал формулы /B/:

или радикал формулы /C/:

Y обозначает радикал формулы /D/:

R обозначает линейный или разветвленный алкильный радикал с 1 - 6 C-атомами;
R₁, R₃, R₅, R₇, R₈, R₁₀, R₁₂ и R₁₃, одинаковые или разные, обозначают, каждый, гидроксильный радикал; линейный или разветвленный алкоксильный радикал с 1-6 C-атомами; или радикал -OSO₃ ^-;
R₂, R₄, R₆, R₉ и R₁₁, одинаковые или разные, обозначают, каждый атом водорода; гидрксильный радикал, линейный или разветвленный алкоксильный радикал с 1-6 C-атомами; или радикал - -OSO₃ ^-; однако, при условии, что по крайней мере один из имеющихся заместителей R₂, или R₄, или R₆, или R₉, или R₁₁ обозначает атом водорода;
в форме фармацевтически приемлемых солей или соответствующих кислот.

Впоследствии, термин "моносахаридная единица" будет использоваться для обозначения озидной единицы:

независимо от заместителей, которые будут связаны с этой единицей в положениях 2,3 или 5.

Что касается радикалов B, C и D то связь " " обозначает, что в некоторых случаях, конфигурация углерода, несущего заместитель, связанный этой связью, может быть R, а в других случаях - S.

Соединения настоящего изобретения представляют собой производные 3-дезоксисахаридов.

Следовательно, нужно, чтобы по крайней мере одна из моносахаридных единиц, из которых образованы соединения изобретения, соответствовала структуре 3-дезоксимоносахарида.

Из этого следует, что в формуле /1/ по крайней мере один из заместителей R₂, или R₄, или R₆, или R₉, или R₁₁ обозначает атом водорода.

Соединения формулы /I/, а которой R₂ обозначает атом водорода, представляют собой предпочтительные продукты изобретения.

Предпочтительными продуктами настоящего изобретения также являются соединения формулы /I/, в которой X обозначает радикал формулы /B/ или радикал формулы /C/.

Эти соединения отвечают следующим формулам /Ia/ и /Ib/:


в которых R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₆, R₇, R₈, R₉, R₁₀, R₁₁, R₁₂ и R₁₃ имеют такое же значение, что и в формуле /I/
Особенно предпочтительны соединения формулы /Ia/.

Соединения формулы /I/ и преимущественно таковые формул /Iа/ и /Ib/, в которых R₁, R₃, R₅, R₇, R₈ и R₁₀ и R₁₃, одинаковые или разные, обозначают, каждый, линейный или разветвленный алкоксильный радикал с 1-6 C-атомами или -OSO₃ ^- - радикал; R₂, R₄, R₆ и R₉, одинаковые или разные, обозначают, каждый, атом водорода или линейный или разветвленный алкоксильный радикал с 1-6 C-атомами; R₁₁ обозначает атом водорода, линейный или разветвленный алкоксильный радикал с 1-6 C-атомами или радикал - OSO₃ ^-; однако, при условии, что по крайней мере R₂, или R₄, или R₆, или R₉, или R₁₁ обозначает атом водорода; R₁₂ обозначает гидроксильный радикал или радикал -OSO₃ ^-, являются предпочтительными соединениями изобретения.

Преимущественно предпочтительны соединения формулы /I/ и особенно таковые формул /Iа/ и /Ib/, в которых R₂ и R₆ обозначает атом водорода; R₃, R₁₁ и R₁₂ обозначают радикал -OSO₃ ^-; R₁₃ обозначает линейный или разветвленный алкоксильный радикал с 1-6 C-атомами.

Преимущественно также предпочтительны соединения формулы /I/ и особенно таковые формул /Iа/ и /Ib/, в которых алкоксильный радикал представляет собой метокси-радикал.

Предметом настоящего изобретения также является способ получения соединений формулы /I/, отличающийся тем, что соединение формулы /II/:

в которой X' обозначает хлорацетокси-, левулинилокси-радикал, радикал формулы /A/, радикал формулы /B₁/:

или радикал формулы /C₁/:

P₁, P₂, P₃ и P₅, одинаковые или разные, обозначают, каждый, защитную группу, такую, как ациклический ацильный радикал с 1-6 C-атомами, предпочтительно ацетильный радикал; ароматический ацильный радикал, предпочтительно бензоильный радикал; алк-2-енильный радикал с 2-7 C-атомами, предпочтительно аллильный радикал; или бензильный радикал;
P₄, P₆, одинаковые или разные, обозначают, каждый, защитную группу, такую, как алкильный радикал с 1-6 C-атомами, предпочтительно метильный радикал; или бензильный радикал;
R'₁, R'₅, R'₈, одинаковые или разные, обозначают, каждый, линейный или разветвленный алкоксильный радикал с 1-6 C-атомами; ациклический ацилокси-радикал с 1-6 C-атомами, предпочтительно ацетоксирадикал; ароматический ацилокси-радикал, предпочтительно бензоилокси-радикал; или алк-2-анилокси-радикал с 2-7 C-атомами, предпочтительно аллилокси-радикал;
R'₇, R'₁₀, одинаковые или разные, имеют указанные для R'₁ значения; или они обозначают хлорацетокси- или левулинилокси-радикал;
R'₂, R'₆ и R'₉, одинаковые или разные, обозначают, каждый, атом водорода или имеют значения, указанные для R'₁; вводят во взаимодействие с соединением формулы /III/:

в которой P₇ имеет значения, указанные для P₄ в формуле /II/;
P₈ имеет значения, указанные для P₁ в формуле /II/;
R'₄ и R'₁₁, одинаковые или разные, имеют те же значения, что и R'₂ в формуле /II/; и
R'₃, R'₁₂ и R'₁₃, одинаковые или разные, имеют значения, указанные для R'₁ в формуле /II/;
для получения соединений формулы /IV/:

в которой X', P₁, P₂, P₃, P₄, R'₁ и R'₂ имеют такое же значение, что и указанное для формулы /II/;
P₇, R'₃ и R'₄ имеют такое же значение, что и для формулы /III/;
Y' обозначает радикал формулы /D₁/;

в которой P₈, R'₁₁, R'₁₂ и R'₁₃ имеют такое же значение, что и для формулы /III/;
которые затем подвергают либо каталитическому гидрированию, затем омылению и сульфатации; либо сначала омылению, затем сульфатации и после этого каталитическому гидрированию; либо сначала каталитическому гидрированию, затем сульфатации и после этого омылению, для получения соединения формулы /I/.

Вышеописанный способ представляет собой предпочтительный способ изобретения. Однако соединения формулы /I/ могут быть получены другими, известными из химии сахаров, способами, и особенно путем введения во взаимодействие моносахарида, содержащего защитные группы, такие, как описанные J. W. Gren b. Protective Groups in Organic Synthesis /Wiley, n.y. 1981/, у гидроксильных радикалов и в известных случаях у карбоксильных радикалов, если они имеются с другим защищенным моносахаридом для получения дисахарида, который затем вводят во взаимодействие со следующим защищенным моносахаридом для получения защищенного трисахарида, из которого можно получать защищенный тетрасахарид, затем защищенный пентасахарид и после этого защищенный гексасахарид [приближение "шаг за шагом"].

У защищенных олигосахаридов /тетра, пента и гексасахаридов/ затем удаляют защитные группы и в известных случаях их сульфатируют или сначала частично удаляют защитные группы, затем сульфатируют и затем удаляют защитные группы, для получения соединения формулы /I/.

Такие способы известны в химии углеводов и особенно описаны: G. Jaurand и др. в Bioorganic and Medicinal Chemistiy Letters, /1992/, 2 /N 9/, c. 897-900; J. Basten и др. b Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, /1992/, 2 /N 9/, c. 901-904; J. Basten и др., в Bioorganic and Mesicinal Chemisty Letters, /1992/, 2 /N 9/ c. 905-910, и M. Petitou и C.A.C. van Boeckel b "Cnemical Syntheses of heparin fragments and analogues" c. 203-210 - Progress in the Chemistry of Organic Natural Products. Ed. Springer Verlag Wien - n.y. /1992/.

Соединения формулы /II/, когда X' обозначает радикал формулы /B₁/, могут быть получены путем введения во взаимодействие активированного по его аномерному углероду моносахарида, как, например, соединения формулы /V/:

в которой P₅, R'₅, R'₆ и R'₇ имеют указанные в формуле /B₁/ значение; с соединением формулы /VI/:

в которой R'₁, R'₂, P₁, P₂ и P₄ имеют указанное для формулы /II/ значение;
для получения таким образом соединения формулы /VII/:

в которой P₅, R'₅, R'₆ и R'₇ имеют указанное для формулы /V/ значение;
R'₁, R'₂, P₁, P₂ и P₄ имеют указанное для формулы /II/ значение;
согласно способу, описанному T. Peters и др. в Can. J. Chem. /1989/, 67, c. 491-496; и G.H.Veeneman и J.H.van Boom в Tetrahedron Letters, /1990/, 31, c. 275-278.

Обрабатывая это соединение известными способами [R. Schmidt, Angew, Chem. Int. Ed. England /1986/, 25/3/, c. 212-235], и особенно путем ацетолиза, с помощью бензиламина, затем трихлорацетонитрила, получают соединения формулы /II/, в которой X' обозначает радикал формулы /B₁/.

Получение некоторых соединений формулы /VII/ и особенно соединений, для которых R'₂ и R'₆ имеют указанные для R'₁ значения, но не означают атома водорода, описано J. Basten и др., Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, /1992/, 2 /N 9/, c. 905-910.

Соединения формулы /VII/ также могут быть получены путем введения во взаимодействие соединений формулы /VI/ с другими активированными моносахаридами, например, с соединениями формулы /V'/:

в которой P₅, R'₅, R'₆ и R'₇ имеют указанное для формулы /V/ значение.

Соединения формулы /V'/, для которых R'₆ имеет указанные для R'₁ значения и не обозначает атома водорода, представляют собой известные соединения, описанные M. Petitou и C.A.A.van Boeckel в "Chemical Synthesis of heparin fragments and analogues", c. 203-210- Progress in the Chemistry of Organic Natural Products, Ed. Springer Verlag Wien- n.y. /1992/.

Соединения формулы /V/, в которой R'₆ обозначает атом водорода, могут быть получены из соединения формулы /VIII/:

в которой Bz обозначает бензоильный радикал.

Соединение формулы /VIII/ получают из 3-дезокси-β-D-рибогексопиранозы [полученной по методу T. V. Rajanbabu, описанному в J. Org. Chem. /1988/, 53, c. 4522-4530], которую подвергают воздействию бензоилхлорида в основном органическом растворителе. Таким образом, полученное соединение подвергают воздействию энантиола с целью получения соединений формулы /VIII/.

Соединения формулы /VI/, когда R'₂ обозначает атом водорода, также могут быть получены из соединения формулы /VIII/, которое вводят во взаимодействие с 1,6: 2,3-ди-ангидроD-маннопиранозой, для получения соединения формулы /IX/:

в которой B_z обозначает бензоильный радикал.

Это соединение затем подвергают воздействию сильного основания для получения 1,6:2,3-ди-ангидридо-4-O-/3-дезокси-β-D-рибогексопиранозил-β-D-маннопиранозы, соединения формулы /X/:

Из соединения формулы /X/ и при использовании классических способов [G. Jaurand и др., Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, /1992/, 2/ N 9/, c. 897-900; J. Basten и др., Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, /1992/, 2 /N 9/, с. 901-904; J. Basten и др., Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, /1992/, 2 /N 9/, c. 905-910; M. Petitou и C.A.C. van Boeckel "Chemical Synthesis of Heparin fradments and analagues" c.203-210 - Progress in the Chemistry of Organic Natural Products, Ed, Springer Verlag, Wien - n.y. /1992/].

получают соединения формулы /XI/:

в которой R'₁, P₁, P₂ и P₄ имеют такое значение, как и указанное для формулы (VII);
P₉ обозначает левулинильный или хлорацетильный радикал.

Соединение формулы /XI/ затем подвергают воздействию гидразина для получения соединений формулы /VI/, в которой R'₂ обозначает атом водорода.

Соединения формул /IX/, /X/ и /XI/ являются новыми продуктами и также составляют часть изобретения.

Соединения формулы /VI/, для которых R'₂ имеет указанные для R'₁ значения и не обозначает атома водорода, могут быть получены аналогичным образом, используя в качестве исходных продуктов защищенные производные глюкозы, активированные на уровне их аномерного углерода, вместо соединений формулы /VIII/. Получение таких соединений описано M.Petitou и C.A.C. van Boeckel в "Chemical Synthesis of heparin fragments and analogues" с. 203-210 - Progress in the Chemistry of Organic Natural Products, Ed. Springer Verlag Wien-n. y. /1992/. Те же авторы описывают также аналогичное получение соединений формулы /IX/, содержащих в положении 3 защищенный гидроксильный радикал.

Соединения формулы /II/, когда X' обозначает радикал формулы /C_1a/:

в которой: R'₅, R'₆, R'₈, R'₉, R'₁₀, P₅ и P₆ имеют указанное для формулы /C₁/ значение,
могут быть получены путем введения во взаимодействие соединения формулы /VI/ с соединением формулы /XIIa/:

в которой R'₅, R'₆, R'₈, R'₉, R'₁₀, P₅ и P₆ имеют указанное для формулы /C₁/ значение; для получения соединения формулы /XIIIa/:

в которой:
R'₅, R'₆, R'₈, R'₉, R'₁₀, P₅ и P₆ имеют указанное для формулы /C₁/ значение; и
- R'₁, R'₂, P₁, P₂ и P₄ имеют указанные для формулы /II/ значения.

Соединения формулы /XIIIa/ затем обрабатывают, как указано в случае соединения /VII/, с целью получения соединений формулы /II/, в которой X' обозначает радикал формулы /C_1a/.

Соединения формулы /XIIa/, когда R'₉ обозначает атом водорода, получают из соединений формулы /XIV/:

в которой R'₅, R'₆, R'₈, R'₁₀ и P₆ имеют указанное для формулы /C₁/ значение; которые подвергают ацетолизу, затем удаляют защитные группы и после этого подвергают воздействию трихлорацетонитрила. Соединения формулы /XIV/ могут быть получены из соединений формулы /X/ согласно способу, описанному для соединений формулы /XI/.

Соединения формулы /XIIa/, когда R'₉ имеет указанные для R'₁ значения и не обозначает атома водорода, получают из производных 1,6:2,3-ди-ангидро-4-O-/β-D-глюкопиранозил /-β-D-маннопиранозы согласно вышеописанному способу. Производные 1,6: 2,3-ди-ангидро-4-O-/-β-D-глюкопиранозил/-β-D-маннопиранозы представляют собой известные продукты, описанные J.Basten и др. в Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters /1992/, 2 /N 9/, с. 905-910.

Соединения формулы /II/, когда X' обозначает радикал формулы /C_Ib/

в которой R'₅, R'₆, R'₈, R'₉, R'₁₀, P₅ и P₆ имеют указанное для формулы /C₁/ значение, могут быть получены путем введения во взаимодействие соединения формулы /XIIb/:

в которой R'₅, R'₆, R'₈, R'₉, R'₁₀, P₅ и P₆ имеют указанные для формулы /C₁/ значения, с соединением формулы /VI/ для получения соединений формулы /XIIIb/:

в которой R'₁, R'₂, R'₅, R'₆, R'₈, R'₉, R'₁₀, P₁, P₂, P₄, P₅ и P₆ имеют указанные для формулы /XIIIа/ значения.

Соединения формулы /XIIIb/ затем обрабатывают, как указано для соединений формулы /XIIIа/, с целью получения соединений формулы /II/, в которой X' обозначает радикал формулы /C_1b/.

Соединение формулы /XIIb/, когда R'₉ обозначает атом водорода, могут быть получены из соединений формулы /X/. Это соединение превращают в соединение формулы /XV/:

согласно способу, эквивалентному таковому, описанному Ishikawa и др., в Carbohydrate Research, /1988/, 172, с. 37-64.

Из этого соединения и при использовании известных способов, описанных G. Jaurand и др. в Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters /1992/ 2 /N 9/, с. 897-900; J. Basten и др., в Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, /1992/, 2 /N 9/, с. 901-904; J.Basten и др., в Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters /1992, 2 /N 9/, с. 905-910; и M. Petitou и C.A.A. van Boeckel "Chemical Synthesis of heparin fragment and analogues" с. 203-210 - Progress in the Chemistry of Organic Natural Products, Ed. Springer Verlag Wien-n.y. /1992/; получают соединения формулы /XVI/:

в которой R'₅, R'₆, R'₈, R'₁₀ и P₆ имеют указанное для формулы /XIIb/ значение.

Эти соединения затем подвергают ацетолизу, после чего обрабатывают бензиламином и трихлорацетонитрилом, для получения соединений формулы /XIIb/.

Соединения формулы /XIIb/, для которых R'₉ не обозначает атома водорода, но имеет указанные для R'₁ значения, могут быть получены таким же образом.

Различные промежуточные соединения, позволяющие получать соединения формулы /ХIIb/, в которой R'₅, R'₆, R'₈, R'₁₀, P₅ и P₆ имеют указанное для формулы /С₁/ значение, а R'₉ имеет указанные для R'₁ значения и не обозначает атома водорода, представляют собой известные продукты, получение которых описано G. Jaurand и др. в Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters /1992/, 2 /N9/, c. 897-900.

Соединения формулы /II/, когда X' обозначает радикал формулы /A/ и R'₂ обозначает атом водорода, могут быть получены из соединения формулы /X/, которое превращают в соединение формулы /XVII/:

Соединение формулы /XVII/ впоследствии либо обрабатывают бензилатом натрия, затем ацилируют; либо обрабатывают аралкилгалогенидом, предпочтительно бензилбромидом, алк-2-енилгалогендом, предпочтительно аллилбромидом, затем обрабатывают бензилатом натрия и после этого ацилируют, для получения соединений формулы /XVIII/:

в которой R'₁, P₁ и P₂ имеют указанное для формулы /II/ значение.

Соединения формулы /XVIII/ затем обрабатывают в кислой среде с целью получения соединений формулы /XIX/:

в которой R'₁, P₁ и P₂ имеют указанные для формулы /II/ значения.

Соединения формулы /XIX/ затем подвергают селективному силилированию в положение 6', обрабатывают левулиновым ангидридом, окисляют согласно условиям Jones и этерифицируют до сложных эфиров с помощью алкилгалогенида, подвергают реакции удаления левулинильного радикала и алкилируют в кислой или нейтральной среде, для получения соединений формулы /II/, в которой X' обозначает радикал формулы /A/ и R'₂ обозначает атом водорода.

Таким же образом могут быть получены соединения формулы /II/, когда X' обозначает радикал формулы /A/ и R'₂ имеет указанные для R'₁ значения. Промежуточные соединения, необходимые для получения этих соединений, описаны в литературе и особенно G.Basten и др. в Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, /1992/, 2 /N9/, с. 905-910; и С.А.А. van Boeckel и др. в J.Carbohydrate Chem. /1985/, 4, с.293.

Соединения формулы /III/, когда R'₄ обозначает атом водорода, могут быть получены из соединений формулы /XX/:

в которой R'₃, R'₁₁, P₇ и P₈ имеют указанные для формулы /III/ значения; и P₁₀ обозначает левулинильный или хлорацетильный радикал.

Соединения формулы /XX/ подвергают ацетолизу, затем обрабатывают бензиламином, вводят во взаимодействие с реактивом Вильсмейера, обрабатывают спиртом в присутствии карбоната серебра и после этого подвергают воздействию гидразина, для получения целевых соединений формулы /III/ /R'₄ = H/.

Соединения формулы /III/, когда R'₄ имеет указанные для R'₁ значения, представляют собой известные соединения. Получение таких соединений описано в литературе J. Basten и др. в Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, /1992/, 2 /N 9/, с. 905-910.

Вышеописанный способ позволяет получать соединения изобретения в форме солей. Для соединения соответствующих кислот соединения изобретения в форме солей вводят в контакт с катионообменной смолой в кислой форме.

Соединения изобретения в форме кислот затем можно нейтрализовать основанием для получения желательной соли.

Для получения солей соединений формулы /I/, можно использовать любое неорганическое или органическое основание, дающее с соединениями формулы /I/ фармацевтически приемлемые соли.

Предпочтительно используют гидроксид натрия, калия, кальция или магния. Натриевые и кальциевые соли соединений формулы /I/ являются предпочтительными солями.

Соединения формулы /I/, составляющие предмет настоящего изобретения, обладают интересными фармакологическими и биохимическими свойствами. Преимущественно они обладают высокой активностью анти-фактор Xa и высоким сродством к АТ-III.

Как это было указано выше, фактор Xa активирует в каскаде коагуляции протромбин в тромбин, который протеолизует растворимый фибриноген с высвобождением нерастворимого фибрина, образующего основу сгустка крови. Ингибирование фактора Xa, следовательно, представляет собой преимущественную возможность достижения антикоагулирующей и антитромботической активности.

Активность анти-фактор Xa [анти-Xa] продуктов изобретения оценивали при pH 8,4 согласно методу, описанному Teien A.N. и Lie M. в Thrombosis Research /1977/, 10, c. 399-410, и было показано, что продукты изобретения обладают активностью анти-Xa, равной или выше таковой уже известных синтетических гепариноидов.

Сродство соединений формулы /I/ к АТ-III определялось путем спектрофлуорометрии в условиях, описанных D.Atha и др. в Biochemistry, /1987/, 26, c. 6454-6461. Результаты опытов показали, что соединения изобретения обладают очень высоким сродством к АТ-III.

Кроме того, общую антитромботическую активность продуктов формулы /I/ оценивали на крысе, путем модели веностаза и индукции за счет тромбопластина, согласно методу, описанному J. Reyers и др. в Thrombosis Research /1980/ 18, с. 669-674. ЭД₅₀ соединений изобретения по крайней мере того же порядка или ниже таковой других, уже известных синтетических гепариноидов. Соединения изобретения следовательно, обладают особенно интересными специфичностью действия и антикоагулирующей и антитромботической активностью.

Результаты, полученные во время различных фармакологических исследований, осуществленных с продуктами изобретения, показали, что они очень хорошо абсорбируются и их период полураспада большой. Это позволяет предусматривать, во время их использования в терапии, возможность ежедневного разового введения.

Эти исследования также показали, что продукты формулы /I/, составляющие предмет настоящего изобретения, абсорбируются пищеварительным трактом, причем вводимые количества не запрещены для использования в терапии человека. Соединения изобретения, следовательно, пригодны для приготовления фармацевтических композиций, вводимых также хорошо парентерально, как и перорально.

Соединения формулы /I/ очень малотоксичны; их токсичность вполне совместима с их использованием в качестве медикаментов.

Соединения изобретения также могут найти свое применение при лечении пролиферации гладких мышечных клеток, поскольку показано, что они проявляют ингибирующий эффект, в заметной степени выше такого гепарина, в отношении роста гладких мышечных клеток.

Соединения изобретения также эффективны в отношении ангиогенеза и пригодны для лечения некоторых инфекций, вызванных ретровирусами.

Кроме того, соединения изобретения оказывают также защитное и регенерирующее воздействие на нервные волокна.

Соединения изобретения очень стабильны, следовательно, таким образом особенно пригодны в качестве действующего начала медикаментов.

Изобретение также распространяется на фармацевтические композиции, содержащие в качестве действующего начала соединение формулы /I/ или одну из его фармацевтически приемлемых солей, в известных случаях в ассоциации с одним или несколькими соответствующими и инертными эксципиентами.

Таким образом полученные фармацевтические композиции предпочтительно находятся в различных формах, таких, как например, растворы для инъекции или питья, драже, таблетки или желатиновые капсулы с лекарством. Растворы для инъекции представляют собой предпочтительные фармацевтические формы.

Фармацевтические композиции, содержащие в качестве действующего начала по крайней мере одно соединение формулы /I/ или одну из его солей, особенно пригодны для лечения, в качестве предохранительного или лечебного средства, заболеваний стенок сосудов, таких, как атеросклероз и артериосклероз; состояний гиперкоагулируемости, наблюдаемых, например, вследствие хирургических операций, роста опухолей или нарушений коагуляции, вызванных вирусными бактериальными или ферментативными активаторами.

Дозировка может изменяться в широких пределах в зависимости от возраста, веса и состояния здоровья пациента, природы и тяжести заболевания, также, как пути введения. Эта дозировка включает введение одной или нескольких доз около 0,5 кг - 1000 мг в день, предпочтительно 1-100 мг в день, например, порядка 20 мг в день, внутримышечно или подкожно, причем введения осуществляют периодически или в регулярные интервалы, или суточная доза составляет порядка 200-1000 мг в день перорально.

Эти дозы, естественно, могут быть подобраны для каждого пациента в зависимости от наблюдаемых результатов и предварительно осуществляемых анализов крови. Предпочтительным путем введения является подкожный путь введения.

Изобретение иллюстрируется нижеприведенными примерами.

Получения
Получение I
Этил-2,4,6-три-O-бензоил-3-дезокси-1-тио-D-рибогексопиранозид [соединение формулы /VIII/].

Стадия А: 1,2,4,6-тетра-O-бензоил-3-дезокси-β-D-рибогексопираноза 66 моль 3-дезокси-1,2: 5,6-ди-O-изопропилиден-D-рибогексофуранозы [T.V.Rajanbabu, J. Org.Chem. /1988/, 53, с. 4522-4530] в виде раствора в смеси воды с этанолом и в присутствии кислой смолы Doweх нагревают в течение 4 часов при 60^oC для получения 3-дезокси-D-рибогексопиранозы. Выпаривают досуха, затем высушивают, выпаривая в присутствии пиридина.

Таким образом полученный сироп растворяют в 150 мл пиридина и добавляют 356 ммоль бензоилхлорида. Оставляют при перемешивании в течение 3 часов при комнатной температуре. Выпаривают досуха, разбавляют дихлорметаном, промывают водой и кристаллизуют из этилацетата с получением 7,66 г 1,2,4,6-тетра-O-бензоил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозы. Выход = 30%. Т. пл. 164^oC. [α]20D

= +1^o /c = 1,33, CH₂Cl₂/.

Стадия Б:
4,51 ммоль полученного в предыдущей стадии соединения растворяют в безводном толуоле и в атмосфере аргона при 20^oC, затем добавляют 9,03 ммоль этантиола. Добавляют 4,51 ммоль трифторида бора в виде раствора в диэтиловом эфире и оставляют при перемешивании в течение 3 часов. После промывки водой выпаривают досуха и полученный остаток в виде сиропа очищают на колонке с диоксидом кремния. Таким образом получают 1,64 г смеси аномеров α и β этил-2,4,6-три-O-бензоил-3-дезокси-1-тио-D-рибогексопиранозида. Это соединение используют без осуществления другой очистки. Выход = 70%.

Получение II
Этил-2,4,6-три-O-бензил-3-дезокси-1-тио-D-рибогексопиранозид [соединение формулы /V/].

5,82 ммоль полученного в получении I соединения растворяют в смеси метанола с дихлорметаном /1:1 по объему/. Добавляют 0,90 ммоль метилата натрия. Реакционную смесь оставляют при перемешивании в течение 3 часов при 20^oC, затем нейтрализуют с помощью кислой смолы Dowex /AG 50 WX 2/. Отфильтровывают и выпаривают досуха. Остаток растворяют в 18 мл безводного диметилформамида, затем, при 0^oC, добавляют 19,7 ммоль гидрида натрия и 17,0 ммоль бензоилбромида. Оставляют при перемешивании в течение 2 часов, затем добавляют 34,1 ммоль метанола. Реакционные растворители выпаривают и очищают на колонке с диоксидом кремния, получая 2,12 г целевого продукта в виде смеси аномеров. Выход: 76%.

Получение III
1,6:2,3-Ди-ангидро-4-O-/2,4,6-три-O-бензоил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозил/-β-D-маннопираноза [соединение формулы /IX/].

Согласно методу, описанному G.H.Veeneman и J.H.Boom в Tetrahedron Letters /1990/, 31, с. 275-278, при -20^oC, 8,53 ммоль продукта из получения I и 7,25 ммоль 1,6:2,3-ди-ангидро-β-D-маннопиранозы растворяют в 220 мл толуола в присутствии молекулярного сита и 21,3 ммоль N-иодсукцинимида, затем добавляют по каплям 1,7 ммоль 0,04 М раствора трифторметансульфокислоты. Оставляют реакционную среду при перемешивании в течение 2,5 часов, отфильтровывают и очищают на колонке с диоксидом кремния, получая 3,07 г 1,6:2,3-ди-ангидро-4-O-/2,4-три-O-бензоил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозил/-β-D-маннопиранозы. Кристаллизуют из смеси этилацетата с гексаном /90:10 по объему/. Выход = 65%. Т.пл. = 153^oC. /α/20D

= -12^o /c=1,10, CH₂Cl₂/.

Получение IV
1,6:2,3-Ди-ангидро-4-O-/3-дезокси-β-D-рибогексопиранозил/ -β-D-маннопираноза [соединение формулы /X/].

1,6:2,3-Ди-ангидро-4-O-/2,4,6-три-O-бензоил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозил/-β-D-маннопиранозу подвергают дебензоилированию с помощью метилата натрия, получая 1,6:2,3-ди-ангидро-4-O-/3-дезокси-β-D-рибогексопиранозил/-β-D-маннопиранозу. Выход = 95%. /α/20D

= -46^o /c = 1,02, CH₃OH/.

Получение V
3-O-Ацетил-1,6-ангидро-2-O-бензил-4-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозилуронат/-β-D-глюкопираноза [соединение формулы /VI/] .

Это соединение получают из 1,6:2,3-ди-ангидро-4-O-/3-дезокси-β-D-рибогексопиранозил/-β-D-маннопиранозы, соединения, описанного в получении IV, используя способы, аналогичные таковым, уже описанным M. Petitou и C. A.A. van Boeckel в "Chemical Synthesis of heparin fragment and analogues" с. 203-210. - Progress in the Chemistry of Organic Natural Products, Ed. Springer Verlag Wien - n.y. /1992/, а именно: получение 1,6:2,3-ди-ангидро-4-O-/3-дезокси-4,6-O-изопропилиден-β-D-рибогексопиранозил /-β-D-маннопиранозы, реакция с бензилатом натрия,
ацетилирование, удаление изопропилиденового радикала с помощью уксусной кислоты, силилирование, реакция с левулиновым ангидридом, окисление в условиях Jones, этерификация до сложного эфира с помощью бензилбромида, и затем обработка гидразином.

Различные стадии указаны ниже:
Стадия А:

К раствору 1,6:2,3-ди-ангидро-4-O-/3-дезокси-β-D-рибогексопиранозил-β-D-маннопиранозы в диметилформамиде /5 ммоль в 35 мл/ в атмосфере аргона прикапывают 1,5 ммоль п-толуолсульфокислоты /также может быть использована камфосульфокислота/ и 250 ммоль 2,2-диметоксипропана. Оставляют при перемешивании в течение 2,5 часов, затем добавляют 1,8 ммоль триэтиламина. Разбавляют дихлорметаном, промывают водой, сушат над безводным сульфатом натрия, отфильтровывают и выпаривают досуха, получая 1,6: 2,3-ди-ангидро-4-O-/3-дезокси-4,6-O-изопропилиден -β- D-рибогексопиранозил/ -β- D-маннопиранозы. Это соединение используют в следующей стадии без осуществления очистки. Выход = 81%.

Стадия Б:

К 5,0 ммоль полученного на стадии А соединения добавляют 25 ммоль бензилата натрия /1М раствор в бензиловом спирте/. В течение 30 минут нагревают при 110^oC. Охлаждают, нейтрализуют с помощью кислой смолы Dowex /AG 50 WX 2/, отфильтровывают и удаляют бензиловый спирт путем выпаривания под вакуумом. Остаток очищают на колонке с диоксидом кремния, используя в качестве элюирующего средства смесь толуола с ацетоном /3:1 по объему/. Целевой продукт получают в виде сиропа. Выход = 81%.

Стадия В

4,90 ммоль полученного в стадии Б соединения растворяют в 22 мл дихлорметана, охлажденного до 0^oC, и добавляют 19.6 ммоль уксусного ангидрида, 1,96 ммоль 4-диметиламинопиридина и 9,81 ммоль триэтиламина. При комнатной температуре и в течение 45 минут реакционную смесь перемешивают. Добавляют метанол и выдерживают при перемешивании еще в течение 30 минут. Затем реакционную среду разбавляют дихлорметаном, промывают водным раствором KHSO₄, затем водой, сушат над безводным сульфатом натрия, выпаривают досуха, получая целевой продукт в виде сиропа. Затем очищают на колонке с диоксидом кремния, используя в качестве элюирующего средства смесь толуола с ацетоном /9:1 по объему/.

Выход = 85%.

Стадия Г

4,11 ммоль полученного в предыдущей стадии соединения растворяют в 2,2 мл 1,1-дихлорэтана и добавляют 123 мл водного раствора уксусной кислоты /70%/. Оставляют при перемешивании в течение 35 минут при 50^oC. Концентрируют, добавляют толуол и выпаривают, получая целевой продукт в виде сиропа. Очищают на колонке с диоксидом кремния, используя в качестве элюирующего средства смесь циклогексана с ацетоном /1:1 по объему/. Выход = 90%.

Стадия Д:

3,61 ммоль полученного в стадии Г соединения растворяют в 3,3 мл дихлорметана и добавляют 1,42 ммоль 4-диметиламинопиридина, 10,82 ммоль триэтиламина и 5,41 ммоль трет.-бутилдиметил-силил-хлорида. Оставляют при перемешивании в течение около 1 часа при 20^oC, затем добавляют 43 мл безводного дихлорметана и 10,8 ммоль левулинового ангидрида. Оставляют при перемешивании в течение 2 часов, затем добавляют 150 мл дихлорметана, промывают сначала водным раствором KHSO₄, затем водным раствором NaHSO₄, сушат над безводным сульфатом натрия, отфильтровывают и выпаривают вплоть до получения коричневого сиропа. Продукт используют таким, какой есть в последующей стадии.

Стадия E:

2,51 г полученного в предыдущей стадии сиропа растворяют в 26 мл ацетона, охлажденного до 0^oC, затем добавляют 9,56 ммоль триоксида хрома и 4,2 мл 3,5 М раствора серной кислоты. Оставляют при перемешивании при комнатной температуре в течение 4 часов. Затем добавляют 250 мл дихлорметана, промывают водой, сушат над безводным сульфатом натрия, отфильтровывают и выпаривают вплоть до получения коричневого сиропа.

Стадия Ж:
Получение 3-O-ацетил-1,6-ангидро-2-O-бензил-4-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-4-O-левулинил-β-D-рибогексопирано-зилуронат/D-глюкопиранозы /соединение формулы /XI//:

2,15 г полученного в предыдущей стадии продукта растворяют в 22 мл безводного диметилформамида и в атмосфере аргона добавляют 7,22 ммоль бикарбоната калия и 10,83 ммоль бензилбромида. Оставляют при перемешивании в течение 3 часов, затем добавляют 0,5 мл метанола и выдерживают при перемешивании в течение 1 часа при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом, промывают водой, сушат над безводным сульфатом натрия, отфильтровывают и выпаривают вплоть до получения коричневого сиропа. Общий выход стадий Д, Е, Ж = 81%.

Стадия З:

3,61 ммоль 3-O-ацетил-1,6-ангидро-2-O-бензил-4-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-4-O-левулинил-β-D-рибогексопиранозилуронат-β-D-глюкопиранозы, соединения, полученного в стадии Ж, растворяют в 13 мл пиридина. Охлаждают до 0^oC и добавляют 18,1 ммоль гидразина [1М раствор в смеси пиридина с уксусной кислотой /3: 2 по объему/]. Реакционную смесь оставляют при перемешивании в течение 15 минут при комнатной температуре. Концентрируют, добавляют дихлорметан, промывают водным раствором KHSO₄, затем водой и после этого водным раствором NaHCO₃ и снова водой. Сушат над сульфатом натрия, отфильтровывают и выпаривают досуха, получая коричневый сироп. 3-O-Ацетил-1,6-ангидро-2-O-бензил-4-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозилуронат/-β-D-глюкопиранозу очищают на колонке с диоксидом кремния, используя в качестве растворителя смесь циклогексана с ацетоном /2:1 по объему/.

Выход = 86%. /α/20D

= -78^o /c = 0,7, CH₂Cl₂/.

Получение VI
O-/Бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-4-O-левулинил-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил-D- глюкопиранозил/-трихлорацетимидат [соединение формулы /XIIa/].

Это соединение получают из 3-O-ацетил-1,6-ангидро-2-O-бензил-4-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-4-O-левулинил-β-D-рибогексопиранозилуронат/-β-D-глюкопиранозы, соединения, описанного в получении V, согласно известным методам, а именно ацетолиза, удаления аномерных защитных групп и получения имидата. Различные стадии приводятся ниже:

К 1,02 ммоль полученного в получении V продукта добавляют 102 ммоль уксусного ангидрида и 10,2 ммоль трифторацетамида. Смесь оставляют при перемешивании и в атмосфере аргона в течение 2 часов. Затем выпаривают вплоть до получения коричневого сиропа и очищают на колонке с диоксидом кремния, используя в качестве элюирующего средства смесь циклогексана с этилацетатом /2:3 по объему/.

Стадия Б:

1,52 ммоль полученного в предыдущей стадии соединения растворяют в дихлорметане и добавляют 57,9 ммоль бензиламина. Оставляют при перемешивании в течение 4 часов при комнатной температуре, затем оставляют при -20^oC в течение ночи. Добавляют диэтиловый эфир и промывают с помощью водного 1н. раствора соляной кислоты. Экстрагируют дихлорметаном, сушат над безводным сульфатом натрия и выпаривают вплоть до получения коричневого сиропа. Очищают на колонке с диоксидом кремния, используя в качестве элюирующего средства смесь толуола с ацетоном /5:1 по объему/.

Стадия В:

Используют 0,246 ммоль дисахарида, полученного в предыдущей стадии, в виде раствора в дихлорметане. В атмосфере аргона, добавляют 0,39 ммоль карбоната калия и 1,23 ммоль трихлорацетонитрила. Оставляют при перемешивании в течение 16 часов, отфильтровывают и выпаривают досуха. O-/Бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-4-О-левулинил-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-3,6-ди-О-ацетил-2-О-бензил-D-глюкопиранозил/-трихлорацетимидат получают в виде смеси аномеров. Выход = 62% /общий/.

Получение VII
1,6: 2,3-Ди-ангидро-4-О-/3-дезокси-α-β-рибогексопиранозил/-β- D-маннопираноза [соединение формулы /XV/ - смесь глюко и идо].

Стадия A
1,6:2,3-Ди-ангидро-4-О-/3-дезокси-6-идо-β-D-рибогексопиранозил/-β-D-маннопираноза.

К раствору 1,6: 2,3-ди-ангидро-4-О-/3-дезокси-β-D-рибо-гексопиранозил/-β-D-маннопиранозы /22,81 ммоль/ в 400 мл смеси дихлорметана с ацетонитрилом добавляют 68,43 ммоль трифенилфосфина, 68,43 ммоль имидазола и 29,65 ммоль иода. Оставляют при перемешивании при 70^oC в течение 4 часов. Раствор выпаривают и таким образом полученный сироп очищают на колонке с диоксидом кремния, используя в качестве растворителя смесь дихлорметана с ацетоном /10: 1 по объему/. Таким образом получают 1,6:2,3-ди-ангидро-4-О-/3-дезокси-6-идо-β--D-рибогексопиранозил/-β-D-маннопиранозу. Выход = 72%.

Стадия Б:
23,4 ммоль 1,6:2,3-Ди-ангидро-4-О-/3-дезокси-6-идо-β-D-рибогексопиранозил/-β-D-маннопиранозы растворяют в 150 мл метанола и добавляют 42 ммоль метилата натрия в виде раствора в метаноле /1М/. Смесь нагревают в течение 9 часов при 80^oC, охлаждают и очищают на колонке с Сефадексом LH-20, элюируя смесью дихлорметана с метанолом /1:1 по объему/. Таким образом получают 1,6:2,3-ди-ангидро-4-О-/3-дезокси-5,6-экзо-метилен-β-D-рибогексопиранозил/-β-D-маннопиранозу. 13,3 ммоль этого соединения растворяют в 100 мл тетрагидрофурана и при 20^oC прикапывают 54,4 ммоль диборана в виде раствора в тетрагидрофуране. Оставляют в течение 2 часов при перемешивании, затем добавляют 65,28 ммоль этанола. Оставляют при перемешивании в течение 1 часа, затем добавляют 24 мл 3М раствора гидроксида натрия и 24 мл 30%-ного раствора пероксида водорода. Нагревают до 50^oC, нейтрализуют с помощью кислой смолы Dowex /AC 50WX4/ и выпаривают досуха, получая 1,6: 2,3-ди-ангидро-4-О-/3-дезокси-α-D-рибогексопиранозил/-β-D-маннопиранозу в виде смеси глико- и идодисахаридов. /1:6,25/.

Получение VIII
3-О-Ацетил-1,6-ангидро-2-О-бензил-4-О-/бензил-2-О-ацетил-3-дезокси-4-О-левулинил-α-L-ликсо-гексопиранозилуронат/-β-D-глюкопираноза [соединение формулы /XVI/].

3-О-Ацетил-1,6-ангидро-2-О-бензил-4-О-/бензил-2-О-ацетил-3-дезокси-4-О-левулинил-α-L-ликсо-гексопиранозилуронат/D-глюкопиринозу получают из соединения, описанного в получении VII, используя классические способы [G. Jaurand и др. Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters /1992/, 2 /N 9/, c. 897-900/; J. Basten и др. Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, /1992/, 2 /N 9/, c. 901-904; J. Basten и др.; Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters /1992/, 2 /N 9/, c. 905-910], а именно: получение двух соответствующих 4'-6' - изопропилиденов; очистка и разделение на колонке с диоксидом кремния глико- и идо-изомеров; реакция с бензилатом натрия; ацетилирование; удаление изопропилиденового радикала, селективное силилирование; реакция с левулиновым ангидридом; окисление согласно условиям Jones, и этерификация до сложного эфира с помощью бензилбромида. Выход = 45%.

Различные стадии приводятся ниже:
Стадия А:

3,6 ммоль 1,6:2,3-Ди-ангидро-4-О-/3-дезокси-α-D-рибогексопиранозил/-β-D-маннопиранозы растворяют в 25 мл диметилформамида и добавляют 21,64 ммоль диметоксипропана и 3,96 ммоль п-толуолсульфокислоты /также может быть использована камфосульфокислота/. Оставляют при перемешивании в течение 1,5 часов и вводят 5,94 ммоль триэтиламина. Концентрируют вплоть до получения сиропа и очищают на колонке с диоксидом кремния, используя в качестве элюирующего средства смесь толуола с этилацетатом /2:3 по объему/. Выход = 70%.

Стадия Б:

К 6,81 ммоль полученного в стадии А соединения добавляют 29,7 ммоль бензилата натрия в виде раствора в бензиловом спирте /1М/. Нагревают при 110^oC и при перемешивании в течение 1 часа. Затем разбавляют с помощью 200 мл дихлорметана, после чего нейтрализуют с помощью кислой смолы Dowex /AG 50WX4/, отфильтровывают и выпаривают под вакуумом, получая коричневый сироп. Очищают на колонке с диоксидом кремния, используя в качестве элюирующего средства смесь дихлорметана с ацетоном /10:1 по объему/. Выход = 85%.

Стадия В:

5,76 ммоль полученного в стадии Б соединения растворяют в дихлорметане и добавляют 3,92 ммоль 4-диметиламинопиридина, 72,27 ммоль триэтиламина и 65,7 ммоль уксусного ангидрида. Оставляют при перемешивании при комнатной температуре в течение 2,5 часов, затем добавляют 100 мл дихлорметана, промывают водным 10%-ным раствором KHSO₄, сушат над безводным сульфатом натрия, затем отфильтровывают. Концентрируют и очищают таким образом полученный сироп на колонке с диоксидом кремния, используя в качестве элюирующего средства смесь дихлорметана с ацетоном /10:1 по объему/. /α/20D/

= -102^o /c = 1,37, CH₂Cl₂.

Стадия Г:

К 5,74 ммоль полученного в стадии В соединения добавляют 25 мл водного 70%-ного раствора уксусной кислоты. Нагревают при 80^oC в течение 6 часов. Концентрируют за счет выпаривания в присутствии толуола, получая порошок желтого цвета.

Стадия Д:


Сокращения к реакционной схеме:
DMAP = 4-диметиламинопиридин; tBOMSCl = трет.-бутил-диметилсилилхлорид; BnBr = бензилбромид; LevO₂ = левулиновый ангидрид; DMF - диметилформамид; Bn = бензильный радикал; Ac = ацетильный радикал, Lev = левулинильный радикал; tBDMSi = трет.-бутил-диметил-силильный радикал.

Используя полученный в предыдущей стадии продукт, поступая как описано в получении V, стадии Д, Е и Ж, получают 3-O-ацетил-1,6-ангидро-2-O-бензил-4-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-4-O-левулинил-α-L-ликсо-гексопиранозилуронат/-β-D-глюкопиранозу. Общий выход: 59%.

Получение IX
Метил-3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил-4-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-α-L-ликсо-гексопиранозилуронат/-β-D-глюкопиранозид [соединение формулы /III/].

Полученный в получении VIII дисахарид подвергают ацетолизу, обрабатывают с помощью бензиламина, вводят во взаимодействие с реактивом Вильсмейера, затем с метанолом в присутствии карбоната серебра. Затем полученное соединение обрабатывают с помощью гидразина, получая метил-3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил-4-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-α-L-ликсо-гексопиранозилуронат/D-глюкопиранозид.

Различные стадии приводятся ниже:
Стадия А

К 1,02 ммоль полученного в получении VII дисахарида добавляют 102 ммоль уксусного ангидрида и 10,2 ммоль трифторуксусной кислоты, нагревают при 50^oC в течение 2 часов в атмосфере аргона. Затем выпаривают вплоть до получения коричневого сиропа и очищают как описано в получении VI, стадия А, получая целевой продукт. Выход = 92%.

Стадия Б:

1,52 ммоль полученного в стадии А соединения растворяют в безводном диэтиловом эфире и добавляют 57,9 ммоль бензиламина. Поступают как описано в стадии Б получения VI, получая целевой продукт. Выход = 70%.

Стадия В:

Готовят реактив Вильсмейера, смешивая, при 0^oC, 2,15 ммоль брома с 2,15 ммоль трифенилфосфина в 5 мл диметилформамида. Осадок белого цвета отфильтровывают в атмосфере аргона и добавляют, поддерживая ту же температуру, 0,269 ммоль полученного в стадии Б продукта в виде раствора в 15 мл безводного дихлорметана. Оставляют реакционную смесь при перемешивании в течение 2 дней при комнатной температуре. Затем разбавляют дихлорметаном, промывают водой, охлажденной до 0^oC, вплоть до достижения pH 6, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют вплоть до получения сиропа. Очищают на колонке с диоксидом кремния, используя смесь дихлорметана с диэтиловым эфиром /5:1 по объему/. Выход = 77%.

Стадия Г:

0,46 мл метанола, 0,34 ммоль карбоната серебра и 150 мг сульфата кальция в 3 мл дихлорметана смешивают в течение 1 часа в атмосфере аргона при 0^oC. 0,227 ммоль полученного в стадии В соединения растворяют в 8 мл дихлорметана. Этот раствор прикапывают к реакционной смеси и оставляют при перемешивании в течение 20 часов при 20^oC. Защищают от света. Затем разбавляют дихлорметаном, отфильтровывают и концентрируют, получая метил-3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил-4-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-4-O-левулинил-α-L-ликсо-гексопиранозилуронат/-β-D-глюкопиранозид в виде сиропа. Очищают на колонке с диоксидом кремния, используя в качестве элюирующего средства смесь дихлорметана с диэтиловым эфиром /5:1 по объему/. Выход = 75%. /α/20D/

= +27^o /c = 1,18, CH₂Cl₂/.

Стадия Д:

0,276 ммоль полученного в предыдущей стадии продукта растворяют в 2 мл охлажденного до 0^oC пиридина и добавляют 1,38 мл 1М раствора гидразингидрата в смеси пиридина с уксусной кислотой /3:2 по объему/. Затем реакционную смесь концентрируют, добавляют метиленхлорид, промывают водным раствором KHSO₄, сушат над безводным сульфатом натрия, отфильтровывают и концентрируют вплоть до получения сиропа. Очищают на колонке с диоксидом кремния, используя смесь дихлорметана с диэтиловым эфиром /3:1 по объему/. Выход = 87%.

/α/20D

= +10^o /c = 0,99, CH₂Cl₂/.

Получение X
O-/2,4,6-Три-O-бензил-3-дезокси-α-D-рибогексопиранозил-/1--->4/-/O-бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-3-O-ацетил-1,6-ангидро-2-O-бензил-β-D-глюкопираноза /соединение формулы /VII/./.

2,03 ммоль Этил-2,4,6-три-O-бензил-3-дезокси-1-тио-D-рибогексопиранозида /получение II/ и 1,69 ммоль 3-O-ацетил-1,6-ангидро-2-O-бензил-4-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозилуронат/-β-D-глюкопиранозы /получение V/ растворяют в 2,03 ммоль дихлорметана, при 20^oC добавляют молекулярное сито, затем, 5,07 ммоль трифторметансульфоната серебра и 1,52 ммоль брома. Оставляют при перемешивании в течение 45 минут и затем, реакционную смесь отфильтровывают, промывают водой, выпаривают досуха. Очищают на колонке с диоксидом кремния, получая целевой продукт. Выход = 35%.

Получение XI
O-/6-O-Ацетил-2,4-ди-O-бензил-3-дезокси-α-D-рибогексопиранозил/-/1--->4/-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил-β-D-глюкопиранозил-трихлорацетимидат [соединение формулы /II/].

0,51 ммоль полученного в получении X соединения в виде раствора в смеси трифторуксусной кислоты с уксусным ангидридом подвергают ацетолизу, затем обрабатывают бензиламином в диэтиловом эфире, после этого обрабатывают трихлорацетонитрилом в дихлорметане в присутствии карбоната калия, получая целевой продукт. Выход = 50%.

Пример 1.

Метил-O-/3-дезокси-2,4,6-три-O-сульфо-α-D-рибогексопиранозил/-/1--->4/-O-/3-дезокси-2-O-сульфо-β-D-рибо-гексопиранозилуронат/-/1--->4/-O-/2,3,6-три-O-сульфо-α-D-глюкопиранозил/-/1--->4/-O-/3-дезокси-2-O-сульфо-α-D-ликсо-гексопиранозилуронат/-/1--->4/-2,3,6-три-O-сульфо-β-D-глюкопиранозид, тридека-кис-натриевая соль.

Стадия А
Метил-O-/6,О-ацетил-2,4-O-бензил-3-дезокси-α-D-рибогексопиранозил/-/1--->4/-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-O-/3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил-α-D-глюкопиранозил/-/1--->4/-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-α-L-ликсо-гексопиранозилуронат/-/1--->4/-O-ацетил-2-O-бензил-β-D-глюкопиранозид. 0,121 ммоль описанного в получении XI соединения и 0,093 ммоль соединения из получения IX растворяют в 3,2 мл дихлорметана. Охлаждают до -20^oC в присутствии молекулярного сита и, в атмосфере аргона, добавляют 0,470 мл раствора триметилсилилтрифторметансульфоната в дихлорметане. Оставляют при перемешивании при -20^oC в течение 1 часа, затем реакционную среду отфильтровывают, промывают водой, выпаривают и очищают на колонке с Сефадексом 1.Н-20, используя в качестве растворителя смесь дихлорметана с метанолом /1:1 по объему/, затем на колонке с диоксидом кремния, используя в качестве растворителя смесь циклогексана с этилацетатом /3:2 по объему/, получая целевой продукт. Выход = 62%.

Стадия Б:
0,052 ммоль полученного в предыдущей стадии продукта растворяют в смеси дихлорметана /0,43 мл/ с метанолом /1,7 мл/. Затем добавляют 85 мг 10%-ного палладия-на-угле и смесь оставляют на 4 часа при 20^oC и при небольшом давлении водорода. Отфильтровывают и выпаривают досуха, получая метил-O-/6-O-ацетил-3-дезокси-α-D-рибогексапиранозил/-/1--->4/-O-/2-O-ацетил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозилуроновая кислота /-/1--->4/-O-/3,6-ди-O-ацетил-α-D-глюкопиранозил/-/1--->4/-O-/2-O-ацетил-3-дезокси-α-L-ликсо-гексопиранозилуроновая кислота /-/1--->4/-3,6-ди-O-ацетил-β--D-глюкопиранозид. Это соединение растворяют в 0,96 мл этанола, охлаждают до 0^oC, затем добавляют 0,30 мл 5М гидроксида натрия. Оставляют при перемешивании при 0^oC в течение 5 часов, очищают на колонке с Сефадексом G-25, используя в качестве элюирующего средства воду. Выпаривают досуха, получая метил-O-/3-дезокси-α--D-рибогексопиранозил/-/1--->4/-O-/-3-дезокси-β-D-рибо-гексопиранозилуроновая кислота /-/1--->4/-O-/-α-D-глюкопиранозил/1/1--->4/-O-/3-дезокси--α-L-ликсо-гексопиранозилуроновая кислота -/1--->4/-β-D-глюкопиранозид.

Это соединение растворяют в 5 мл диметилформамида, выпаривают досуха, затем снова, в атмосфере аргона, растворяют в 2,6 мл безводного диметилформамид. Добавляют 302 мг комплекса триоксид серы - триэтиламин и в течение 20 часов при 55^oC перемешивают. Реакционную смесь охлаждают, добавляют 491 мг бикарбоната натрия в виде водного раствора и оставляют при перемешивании в течение 3 часов. Очищают на колонке с Сефадексом G-25, используя в качестве растворителя воду, затем лиофилизуют, получая метил-O-/3-дезокси-2,4-6-три-O-сульфо-α-D-рибогексопиранозил/-/1--->4/-O-/3-дезокси-2-O-сульфо-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-O-/2,3,6-три-O-сульфо-α-D-глюкопиранозил/-/1--->4/-O-/3-дезокси-2-O-сульфо-α-L-ликсо-гексопиранозилуронат/-/1--->4/-2,3,6-три-O-сульфо-β-D-глюкопиранозид, тридека-кис-натриевая соль. Выход = 65%.

/α/20D

= +25^o /с = 0,52, H₂O/ - партия 1.

/α/20D

= +33^o /с = 0,64, H₂O/ -партия 2.

Спектр ядерного протонного магнитного резонанса: /500 МГц, растворитель D₂O/: H 1: 4,78 м.д., J_1-2 = 7,2 Гц; H'1 : 5,22 м.д., J_1'-2':1,8 Гц; H'' 1: 5,26 м.д., J_1''-2''=3,5 Гц; H'''1: 4,78 м.д., J_1'''-2'''=5,4 Гц; H'''': 5,16 м.д., J_{1'''' -2''''}=3,3 Uц.

Пример 2.

Метил-O-/3-дезокси-2,4,6-три-O-сульфо-α-D-рибогексопиранозил/-/1--->4/-O-/3-дезокси-2-O-сульфо-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-O-/2,3,6-три-O-сульфо-α-D-глюкопиранозил/-/1--->4/-O-/3-дезокси-2-O-метил-α-L-ликсо-гексопиранозилуронат/-/1--->4/-2,3,66-три-O-сульфо-β-D-глюкопиранозид, додека-кис-натриевая соль.

Это соединение получают из O-/6-O-ацетил-2,4-ди-O-бензил-3-дезокси-α-D-рибогексопиранозил/-/1--->4/-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозилуронат /-/1--->4/-3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил-D-глюкопиранозил-трихлорацетимидата и метил --3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил-4-O-/бензил-2-O-метил-3-дезокси -α- L-ликсо-гексопиранозиларонат/-β-D-глюкопиранозида согласно способу, описанному в примере 1. Метил-3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил-4-O-/бензил-2-O-метил-3-дезокси-α-L-ликсо-гексопиранозилуронат/-β-D-глюкопиранозид получают из 1,6: 2,3-ди-ангидро-4-O/3-дезокси-β-D-рибогексопиранозил/-β-D-маннопиранозы согласно способу, подобному таковым, описанным в получениях VII, VIII и IX. /α/20D

= +25^o /с= 0,48; H₂O/.

Спектр ядерного магнитного протонного резонанса /500 МГц, растворитель D₂O/: H 1 : 4,82 м.д., J =1-2:4,2 Гц; H' 1: 5,08 м.д., J1'-2'=1,0 Гц; H''1: 5,27 м.д., J1''-2''=3,7 Гц; H'''1:4,76 м.д., J1'''-2'''=7,7 Гц; H'''':5,15м. д., J1''''-2'''' =3,5 Гц.

Пример 3.

Метил-O-/3-дезокси-2,4-ди-O-метил-6-O-сульфоD-рибогексопиранозил /1/--->4/-O-/3-дезокси-2-O-сульфо-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-O-/2,3,6-три-O-сульфо-α-D-глюкопиранозил/-/1--->4/-O-/3-дезокси-2-O-сульфо-α-L-ликсо-гексопиранозилуронат/-/1--->4/-2,3,6-три-O-сульфо-β-D-глюкопиранозид, ундекакис-натриевая соль.

Это соединение получают из O-/6-O-бензил-2,4-ди-O-метил-3-дезокси-α-D-рибогексопиранозил/-/1--->4/-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил-D-глюкопиранозил-трихлорацетимидата и метил-3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил-4-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-α-L- ликсо-гексопиранозилуронат/-β-D-глюкопиранозида согласно способу, описанному в примере 1. O-/6-О-Бензил-2,4-ди-O-метил-3-дезокси-α-D-рибогексопиранозил-/-/1--->4/-O/-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозилуронат /-/1--->4/-3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил-D-глюкопиранозил-трихлорацетамидат получают из этил--6-O-бензил-2,4-ди-O-метил-3-дезокси-1-тио-β-D-рибогексопиранозида и 3-O-ацетил-1,6-ангидро-2-O-бензил-4-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозилуронат/-β-D-глюкопиранозы согласно способу, описанному в получениях X.

/α/20D

= +24^o /с = 0,6, H₂O/.

Спектр ядерного магнитного протонного резонанса /500 МГц, растворитель D₂O: H1 : 4,77 м.д., J1-2=5,0 Гц; H'1:5,22 м.д., J1'-2'=2,2 Гц; 5,24 м.д. J1''-2''= 3,7 Гц, H'''1: 4,76 м. д., J1'''-2''' =7,5 Гц; H'''':5,10 м.д., J1''''-2''''=3,6 Гц.

Пример 4.

Метил--O-/3-дезокси-4-O-метил-2,6-ди-O-сульфо-α-D-рибогексопиранозил/-/1--->4/-O-/3-дезокси-2-O-сульфо-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-O-/2,3,6-три-O-сульфо-α-D-глюкопиранозил/-/1--->4/-O-/3-дезокси-2-O-сульфо-α-L-ликсо-гексопиранозилуронат/-/1--->4/-2,3,6-три-O-сульфо-β-D-глюкопиранозид додекакис-натриевая соль.

Это соединение получают согласно способу, описанному в примере 1, из соединения, описанного в получении IX, и O-/2,6-ди-O-бензил-4-O-метил-3-дезокси-α-D-рибогексапиранозил/-/1--->4/-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил-D-глюкопиранозил-трихлорацетимидата. Это последнее трисахаридное производное получают из этил-2,6-ди-O-бензил-4-O-метил-3-дезокси-1-тио-D-рибогексопиранозида и соединения, описанного в получении V, согласно способу, описанному в получениях X и XI.

/α/20D

=+22^o /с = 0,54, H₂O/.

Спектр ядерного магнитного протонного резонанса /500 МГц, растворитель D₂O/: H1:4,78 м.д. J1-2 = 5,1 Гц; H'1:5,22 м.д., J1'-2' = 2,6 Гц; H''1:5,27 м.д., J1''-2" = 3,9 Гц; H''' 1:4,75 м.д., J1'''-2''' = 7,9 Гц; H'''':5,11 м. д., J1''''-2''''=3,5 Гц.

Пример 5.

Метил-O-/3-дезокси-2,4,6-три-O-сульфо-α-D-рибогексопиранозил/-/1--->4/-O-/3-дезокси-2-O-метил-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-O-/2,3,6-три-O-сульфо-α-D-гликопиранозил/-/1--->4/-O-/3-дезокси-2-O-метил-α-L-ликсо-гексопиранозилуронат/-/1--->4/-2,3,6-три-O-сульфо-β-D-глюкопиранозид-ундекакис-натриевая соль.

Это соединение получают из метил-3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил-4-O-/бензил-2-O-метил-3-дезокси-α-L-ликсо-гексопиранозилуронат/-β-D-глюкопиранозида и O/6-O-ацетил-2,4-ди-O-бензил-3-дезокси-α-D-рибогексопиранозил/-/1--->4/-O-/бензил-2-O-метил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил-D-глюкопиранозил-трихлорацетимидата согласно способу, описанному в примере 1. Используемый в качестве исходного продукта трисахарид получают из 3-O-ацетил-1,6-ангидро-2-O-бензил-4-O-/бензил-2-O- метил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозилуронат-β-D-глюкопиранозы и соединения, описанного в получении II, согласно способу, описанному в получениях X и XI.

/α/20D

= +20^o /c = 0,39 : H₂O/.

Спектр ядерного магнитного протонного резонанса /500 МГц, растворитель D₂O/: H 1 : 4,83 м.д., J 1-2=3,0 Гц, H' 1: 5,11 м.д., J 1' - 2' = 2,6 Гц; H''1: 5,31 м. д., J 1'' - 2'' = 3,3 Гц; H'''1 = 4,68 м.д., J 1''' - 2''' = 7,7 Гц; H'''' : 5,18 м.д., J 1'''' - 2'''' = 3,2 Гц.

Пример 6.

Метил-O-/3-дезокси-2,4,6-три-O-сульфо-α-D-рибогексопиранозил/-/1--->4/-O-/3-дезокси-2-O-метил-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-O-/2,3,6-три-O-сульфо-α-D-глюкопиранозил/-/1--->4/-O-/3-дезокси-2-O-сульфо-α-L-ликсо-гексопиранозилуронат/-/1--->4/-2,3,6-три-O-сульфо-β-D-глюкопиранозид, додекакис-натриевая соль.

Это соединение получают согласно способу, описанному в примере 1 из O-/6-O-ацетил-2,4-ди-O-бензил-3-дезокси-α-D-рибогексопиранозил/-/1--->4/-O-/бензил-2-O-метил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозилуронат-/1--->4/-3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил-D-глюкопиранозил-трихлорацетимидата и соединения, описанного в получении IX. /α/20D

= +30 /c = 0,40, H₂O/.

Спектр ядерного магнитного протонного резонанса /500 МГц, растворитель D₂O/: H 1 : 4,77 м.д., J 1-2=5,0 Гц, H'1: 5,20 м.д., J 1' - 2' = 2,5 Гц; H''1: 5,27 м. д., J 1'' - 2'' = 4,0 Гц; H'''1 : 4,67 м.д., J 1''' - 2''' = 8,0 Гц; H'''' : 5,14 м.д., J 1'''' - 2'''' = 3,5 Гц.

Пример 7.

Метил-O-/3-дезокси-2,4,6-три-O-сульфо-α-D-рибогексопиранозил/-/1--->4/-O-/3-дезокси-2-O-метил-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-O-/2,3,6-три-O-сульфо-α-D-глюкопиранозил/-/1--->4/-O-/3-O-метил-2-O-сульфо-α-L-идопиранозилуронат/-/1--->4/-2,3,6-три-O-сульфо-α-D-глюкопиранозид, додекакис-натриевая соль.

Это соединение получают согласно способу, описанному в примере 1 из O-/6-O-ацетил-2,4-ди-O-бензил-3-дезокси-α-D-рибогексопиранозил/-/1--->4/-O-/бензил-2-O-метил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил-D-глюкопиранозил-трихлорацетимидата и метил-2,3,6-три-O-бензил-4-O-/бензил-2-O-бензил-3-O-метил-α-L-идопиранозилуронат/D-глюкопиранозида. Это последнее соединение получают согласно способу, описанному M. Petitou и C.A.A. van Boeckel в "Chemical Synthesis of heparin fragments and analogues" c. 203-210. - Progress in the Chemistry of Organic Natural Products, Ed. Springer Verlag Wien - n.y., 1992. /α/20D

= +46^o /c = 0,58, H₂O/.

Спектр ядерного магнитного протонного резонанса /500 МГц, растворитель D₂O/: H 1 : 5,10 м.д., J 1-2=3,0 Гц, H'1: 5,10 м.д., J 1' - 2' = 5,0 Гц; H''1: 5,48 м.д., J 1'' - 2'' = 3,60 Гц; H'''1 = 4,68 м.д., J 1''' - 2''' = 7,5 Гц; H'''' : 5,16 м.д., J 1'''' - 2'''' = 3,6 Гц.

Пример 8.

Метил-O-/3-дезокси-2,4-ди-три-O-сульфо-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-O-/2,3,6-три-O-сульфо-α-D-глюкопиранозил/-/1--->4/-O-/3-дезокси-2-O-сульфо-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-O-/2,3,6-три-O-сульфо-α-D-глюкопиранозил/-/1--->4/-O-/3-дезокси-2-O-сульфо-α-L-ликсо-гексопиранозилуронат/-/1--->4/-2,3,6-три-O-сульфо-β-D-глюкопиранозид, гексадекакис-натриевая соль.

Это соединение получают из O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-4-O-левулинил-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил-D-глюкопиранозил/-трихлорацетимидата /получение VI/ и 3-O-ацетил-1,6-ангидро-2-O-бензил-4-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-β-D-рибогексопиранозилуронат/--β-D-глюкопиранозы /получение V/. Вводя во взаимодействие эти оба соединения в условиях, описанных в примере 1, стадия A, получают соединение:

Выход = 64%.

Таким образом полученный продукт подвергают ацетолизу согласно способу, описанному в получении VI, стадия А, затем воздействию бензиламина в условиях, описанных в стадии Б получения VI для высвобождения аномерного гидроксила. Соответствующий имидат получают затем путем взаимодействия с трихлорацетонитрилом в присутствии карбоната калия согласно способу, описанному в получении VI, стадия В.

Вводя во взаимодействие этот последний продукт с метил-3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил-4-O-/бензил-2-O-ацетил-3-дезокси-α-L-ликсогексопиранозилуронат/-β-D-глюкопиранозидом /получение IX/ получаютметил-O-/3-дезокси-2,4-ди-O-сульфо-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-O-/2,3,6-три-O-сульфо-α-D-глюкопиранозил/-/1--->4/-O-/3-дезокси-2-O-сульфо-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1--->4/-O-/2,3,6-три-O-сульфо-α-D-глюкопиранозил/-/1--->4/-O-/3-дезокси-2-O-сульфо-α- L-ликсо-гексопиранозилуронат/-/1--->4/-2,3,6-три-O-сульфоD-глюкопиранозид, гексадекакис-натриевая соль.

Спектр ядерного магнитного протонного резонанса /500 МГц, растворитель D₂O/: H 1: 4,78 м.д., J 1-2 = 7,0 Гц; H' 1 : 5,22 м.д., J 1'-2' = 1,9 Гц; H'' 1 : 5,25 м.д., J 1''-2'' = 3,50 Гц; H''' 1 : 4,79 м.д., J 1'''-2''' = 5,6 Гц; H'''' 1 : 5,31 м.д., J 1''''-2'''' = 3,50 Гц; H''''': 4,80 м.д., J 1'''''-2''''' = 5,9 Гц.

Изобретение относится к новым производным 3-дезоксиолигосахаридов формулы I, в которой Х обозначает радикал формулы В или радикал формулы С; Y обозначает радикал формулы D; R₁, R₃, R₅, R₇, R₈, R₁₀, R₁₃ - одинаковые или разные, обозначают каждый линейный или разветвленный алкоксильный радикал с 1-6 С-атомами или радикал -OSO-3

; R₂, R₄, R₆, R₉, R₁₁ - одинаковые или разные, обозначают каждый атом водорода, линейный или разветвленный алкоксильный радикал с 1-6 С-атомами или радикал -OSO-3, R₁₂ означает гидроксильный радикал или радикал -OSO-3, однако, при условии, что по крайней мере один из заместителей R₂, или R₄, или R₆, или R₉, или R₁₁ обозначает, атом водорода; в виде фармацевтически приемлемых солей и соответствующих кислот. Описанные соединения обладают очень большой антифакторной Ха-активностью и большим сродством к АТ-Ш. Они хорошо адсорбируются в пищеварительном тракте и потому могут вводиться перорально. Описываются способы получения вышеуказанных соединений, промежуточные соединения и фармацетическая композиция на основе соединений формулы I. 6 с. и 8 з.п. ф-лы.

1. Производные 3-дезоксиолигосахаридов формулы I

в которой Х обозначает радикал формулы В

или радикал формулы С

Y обозначает радикал формулы D

R₁, R₃, R₅, R₇, R₈, R₁₀, R₁₃, одинаковые или разные, обозначают каждый линейный или разветвленный алкоксильный радикал с 1-6 С-атомами или радикал - OSO₃ ^-;
R₂, R₄, R₆, R₉, R₁₁, одинаковые или разные, обозначают каждый атом водорода, линейный или разветвленный алкоксильный радикал с 1-6 С-атомами или радикал - OSO₃ ^-;
R₁₂ - гидроксильный радикал или радикал -OSO₃ ^- при условии, что по крайней мере один из заместителей R₂, или R₄, или R₆, или R₉, или R₁₁ обозначает атом водорода,
в виде фармацевтически приемлемых солей и соответствующих кислот. 2. Соединение формулы I по п.1, отвечающее формуле Ia

в которой R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₆, R₇, R₁₁, R₁₂ и R₁₃ имеют значения, указанные в п.1 для формулы I. 3. Соединения формулы I по п.1, отвечающие формуле Ib

в которой R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₆, R₈, R₉, R₁₀, R₁₁, R₁₂ и R₁₃ имеют значения, указанные в п.1, для формулы I. 4. Соединения формулы I по п.1, в которой R₂ обозначает атом водорода. 5. Соединение формулы I по п.1, в которой R₂ и R₆ обозначают атом водорода, R₃, R₁₁ и R₁₂ обозначают радикал - OSO₃ ^-, R₁₃ обозначает линейный или разветвленный алкоксильный радикал с 1-6 С-атомами. 6. Соединение формулы I по п.1, представляющее собой метил-O-/3-дезокси-2,4,6-три-O-сульфо-α-D-рибогексапиранозил /-/1-->4/-O-/3-дезокси-2-O-сульфо-β-D-рибогексапиранозилуронат /-/1-->4/-O-/2,3,6-три-O-сульфо-α-D-глюкопиранозил /-/1-->4/-O-/3-дезокси-2-O-сульфо-α-L-ликсогексопиранолизуронат -/-/1-->4/-2,3,6-три-O-сульфо-β-D-глюкопиранозид или его фармацевтически приемлемые соли с основанием. 7. Соединение формулы I по п.1, представляющее собой метил-O-/3-дезокси-2,4-ди-O-метил-6-O-сульфо-α-D-рибогексопиранозил/-/1-->4/-O-/3-дезокси-2-O-сульфо-β-D-рибогексопиранозилуронат/-/1-->4/-О-/2,3,6-три-O-сульфо-α-D-глюкопиранозил/-/1-->4/-О-/3-дезокси-2-O-сульфо-α-L-ликсогексопиранозилуронат/-/1-->4/-2,3,6-три-O-сульфо-β-D-глюкопиранозид, или его фармацевтически приемлемые соли с основанием. 8. Соединение формулы I по п.1, представляющее собой метил-O-/3-дезокси-4-O-метил-2,6-ди-O-сульфо-α-D-рибогексопиранозил/-/1-->4/-O-/3-дезокси-2-O-сульфо-β-D-рибогексопиранозилуронат /-/1-->4/-O-/2,3,6-три-O-сульфо-α-D-глюкопиранозил/-/1-->4/-O-/3-дезокси-2-O-сульфо-α-L-ликсогексопиранозилуронат /-/1-->4/-2,3,6-три-O-сульфо-β-D-глюкопиранозид или его фармацевтически приемлемые соли с основанием. 9. Способ получения производных 3-дезоксиолигосахаридов формулы I, заключающийся в том, что соединение формулы II

в которой X' обозначает хлорацетокси-, левулинилоксирадикал, радикал формулы В₁

или радикал формулы С₁

R'₁ означает ациклический ацилоксирадикал с 1-6 С-атомами, предпочтительно ацетоксирадикал,
Р₁, Р₂, одинаковые или разные, обозначают каждый защитную группу, выбранную из ациклического ацильного радикала с 1-6 С-атомами, предпочтительно ацетильного радикала или бензильного радикала,
Р₄ означает бензильный радикал;
Р₃ и Р₅ одинаковые или разные, обозначают каждый защитную группу, такую, как ациклический ацильный радикал с 1-6 С-атомами, предпочтительно ацетильный радикал, ароматический ацильный радикал, предпочтительно бензоильный радикал, алк-2-енильный радикал с 2-7 С-атомами, предпочтительно алкильный радикал, или бензильный радикал;
Р₆ обозначает защитную группу, такую, как алкильный радикал с 1-6 С-атомами, предпочтительно метильный радикал, или бензильный радикал,
R'₅, R'₆, одинаковые или разные, обозначают каждый линейный или разветвленный алкоксильный радикал с 1-6 С-атомами, ациклический ацилоксирадикал с 1-6 С-атомами, предпочтительно ацетоксирадикал, ароматический ацилоксирадикал, предпочтительно бензоилоксирадикал, или алк-2-енилоксирадикал с 2-7 С-атомами, предпочтительно аллил оксирадикал,
R'₇, R'₁₀, одинаковые или разные, имеют указанные для R'₁ значения или они обозначают хлорацетоксирадикал или левулинилоксирадикал,
R'₂, R'₆, R'₉, одинаковые или разные, обозначают каждый атом водорода или имеют указанные для R'₁ значения, вводят во взаимодействие с соединением формулы III

в которой Р₇ имеет указанные для Р₄ в формуле II значения;
Р₈ имеет указанные для Р₁ в формуле II значения,
R'₄ и R'₁₁, одинаковые или разные, имеют указанные для R'₂ в формуле II значения,
R'₃, R'₁₂, и R'₁₃, одинаковые или разные, имеют указанные для R'₁ в формуле II значения,
с получением соединения формулы IV

в которой Х ', Р₁, Р₂, Р₃, Р₄, R'₁ и R'₂ имеют указанное в формуле II значение,
Р₇, R'₃ и R'₄ имеют указанное для формулы III значение,
Y' обозначает радикал формулы D₁

в которой Р₈, R'₁₁, R'₁₂ и R'₁₃ имеют указанное для формулы III значение,
которое затем подвергают либо каталитическому гидрированию, затем омылению и сульфатации, либо сначала омылению, затем сульфатации и после этого каталитическому гидрированию, либо сначала каталитическому гидрированию, затем сульфатации и после этого омылению, с получением соединения формулы I. 10. Способ получения соединений формулы I по п.1, заключающийся в том, что моносахарид, содержащий защитные группы гидроксильных радикалов и возможно карбоксирадикалов, если они имеются, вводят во взаимодействие с другим защищенным моносахаридом с образованием дисахарида, который затем вводят во взаимодействие со следующим защищенным моносахаридом с образованием защищенного трисахарида, исходя из которого можно получить защищенный тетрасахарид, затем защищенный пентасахарид и затем защищенный гексасахарид и далее у тетра-, пента- или гексасахаридов удаляют защитные группы и при необходимости сульфатируют или сначала у них частично удаляют защитные группы, затем сульфатируют и после этого удаляют защитные группы. 11. Соединения формулы I по любому из пп.1-8, отличающиеся тем, что они обладают антитромботической и антикоагулирующей активностью. 12. Фармацевтическая композиция, обладающая антитромботической и антикоагулирующей активностью, содержащая активное вещество и фармацевтически приемлемые добавки, отличающаяся тем, что в качестве активного вещества она содержит производные 3-дезоксиолигосахаридов общей формулы I по любому из пп.1-8 в эффективном количестве. 13. 1,6:2,3-Ди-ангидро-4-O-дезокси -β-D-рибогексапиранозил -β-D-маннопираноза или ее 3-дезокси-2,4,6-три-O-бензоил -β-D-рибогексапиранозильное производное формулы IX

в котором М означает водород или бензоил. 14. Соединение формулы X

в которой R'₁ обозначает ациклический ацилоксирадикал с 1-6 С-атомами, предпочтительно ацетоксирадикал;
Р₁, Р₂, одинаковые или разные, обозначают каждый защитную группу, выбираемую среди ациклического ацильного радикала с 1-6 С-атомами, предпочтительно ацетильного радикала, или бензильного радикала;
Р₄ обозначает бензильный радикал;
Р₉ обозначает левулинильный радикал.