СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ РАННИХ И ПОЗДНИХ ФОРМ НЕЙРОСИФИЛИСА Российский патент 1999 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к области медицины, а именно к биофизическим методам диагностики различных форм нейросифилиса.

Существуют методы хемилюминесценции, используемые для диагностики опухолей спинного мозга: предлагается сравнивать интенсивность перекисной люминесценции спинномозговой жидкости после замораживания (Журнал невропатологии и психиатрии, т. 94, вып. 4, 1994 г., с. 30-33) или интенсивность люминесценции фотоиндуцированной спинномозговой жидкости (А. с. N 1318913 G 01 N 33/483, 1987 г. ) с критериальным значением люминесценции и по отношению к нему диагностировать экстра или интрамедуллярную опухоль.

Недостатки используемых методов заключаются в следующем: во-первых, интенсивность спонтанного сверхслабого свечения в спинномозговой жидкости больных нейросифилисом довольно мала (1-2 имп/с), что обусловлено низким уровнем свободнорадикального окисления в биосубстрате при этой патологии. Это препятствует четкой дифференциации различных форм нейросифилиса между собой и контролем. Предлагаемое фотоиндуцирование ликвора увеличивает интенсивность люминесценции незначительно (не выше 7-8 имп/с). Во-вторых, замораживание спинномозговой жидкости замедляет диагностический процесс и также способствует угнетению исходно низкой хемилюминесценции.

Цель изобретения - повышение точности дифференциальной диагностики ранних и поздних форм нейросифилиса, ускорение и облегчение диагностического процесса, снижение экономических затрат на лабораторные исследования.

Поставленную цель решают за счет определения уровня индуцированной перекисью водорода люминесценции спинномозговой жидкости. Измеряют уровень максимальной интенсивности перекисной хемилюминесценции (I_max). Проведенные ранее эксперименты показали, что в случаях сифилитического менингита (острого и подострого течения) максимум интенсивности ХЛ наблюдается в пределах от 250 имп/с и выше, при менинговаскулярном сифилисе 114 I_max<250 имп/с. Поздние формы нейросифилиса характеризуются низким уровнем сверхслабого свечения, сопоставимого с контролем (I_max<114 имп/с).

Способ осуществляют следующим образом. Пробу цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) в объеме 1 см³ помещают в кварцевую кювету, не имеющую хемилюминесцентных свойств. Инициацию осуществляют путем добавления 5% раствора перекиси водорода в объеме 0,02 мл последовательно 3 раза в каждую кювету. Хемилюминесценцию ЦСЖ измеряют на серийном медицинском хемилюминометре CL 3604, предназначенном для исследования сверхслабых свечений биологически активных объектов в спектральной области 200 - 650 нм. Прибор выполнен в виде единого конструктива и работает под управлением ПЭВМ типа IBM PC-286 XT/AT. Кювету с исследуемой пробой помещают в термостатируемый барабан с температурой 37,0±0,5^oC. В качестве детектора в установке используют 24-разрядный счетчик импульсов ФЭУ-85. В рабочем режиме установки напряжение питания для ФЭУ-85 составляет 1500 В, световая чувствительность фотокатода 9•10 exp^-5, энергетический эквивалент собственных шумов 0,85 КЭВ. Число импульсов за интервал времени в режиме счета фотонов пропорционально количеству импульсов, испускаемых контрольным источником ядерного заряда за этот же промежуток времени (7300 имп/с). Сигнал из ФЭУ считывается аналого-цифровым преобразователем, фильтруется от помех и посылается через последовательный интерфейс типа RS232 в ПЭВМ, где средствами прилагаемого программного обеспечения строится кривая хемилюминесценции для каждой пробы. Время измерения одной точки хемилюминесцентной кривой составляло 0,1 с, минимальное число точек измерения на каждую кривую - 1, пауза между измерениями 0 с, общее время измерения ХЛ пробы - 120 минут. Графическую информацию подвергают математической обработке функцией полинома с коэффициентом фильтрации 10, после чего рассчитывают максимальный показатель интенсивности хемилюминесценции и проводят сравнительный анализ с установленными экспериментально значениями интенсивности для менингеальных, менинговаскулярных и поздних форм нейросифилиса.

Пример 1. Больной Е., 35 лет. Диагноз при поступлении: вторичный свежий сифилис. Жаловался на умеренную головную боль, тяжесть и шум в голове, преходящее головокружение, общую слабость. На фоне проводимого лечения пенициллином (курсовая доза 44 800 тыс. ЕД в/м) указанные жалобы сохранялись. После проведения перекисной хемилюминесценции спинномозговой жидкости больного (I_max = 315 имп/с) был диагностирован подострый сифилитический менингит, лечение скорректировано по методикам терапии нейросифилиса (курсовая доза 168 млн. ЕД в/м). В течение 3 дней наступил регресс менингеальной симптоматики.

Пример 2. Больная Л., 45 лет. Диагноз при поступлении: поздний скрытый сифилис. У больной отмечалась эмоциональная лабильность, повышенная забывчивость, постоянные головные боли, рассеянная микроорганическая симптоматика, шаткость при ходьбе. После проведения перекисной хемилюминесценции спинномозговой жидкости больной (I_max = 101 имп/с) был диагностирован поздний васкулярный сифилис мозга с дементным синдромом. Назначен курс лечения по методикам терапии позднего нейросифилиса.

Способ применен в клинике Краевого кожно-венерологического диспансера. Исследована инициированная перекисью водорода ХЛ ЦСЖ у 20 больных с нейросифилисом и у 5 лиц контрольной группы. Нейросифилис был представлен следующими формами: подострый сифилитический менингит - 8 больных; ранний менинговаскулярный сифилис - 7 больных; васкулярный сифилис мозга, прогрессивный паралич, спинная сухотка - 5. Анализ ЦСЖ проводился до начала специфической терапии, больные подбирались с учетом отсутствия отягощающих анамнез заболеваний и травм нервной системы. Диагноз нейросифилиса у всех больных подтвержден комплексным клинико-лабораторным обследованием. Результаты исследования представлены в таблице и наглядно отображены на фиг. 1. Выявлена сильная корреляционная связь между интенсивностью ХЛ и выраженностью воспалительных изменений СМЖ у больных нейросифилисом (см. фиг. 2).

Преимущества предлагаемого способа дифференциальной диагностики ранних и поздних форм нейросифилиса заключаются в использовании нативной спинномозговой жидкости больных нейросифилисом, катализированной перекисью водорода, простоте выполнения, широкой доступности в лабораторных условиях (используется стандартная серийная аппаратура), возможности быстрого получения точных результатов, подвергающихся статистической обработке. Способ не требует затрат каких-либо дорогостоящих материалов (по сравнению с реакцией Ланге с использованием коллоидного золота), создания особых условий для анализа и позволяет провести исследование до 35 проб спинномозговой жидкости одновременно.

Изобретение относится к медицине, а именно к биофизическим методам диагностики различных форм нейросифилиса. Способ обеспечивает повышение точности дифференциальной диагностики ранних и поздних форм нейросифилиса, ускорение и облегчение диагностического процесса, снижение экономических затрат на лабораторные исследования. Проводят определение уровня индуцированной перекисью водорода люминесценции нативной спинномозговой жидкости. Пробу цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) в объеме 1 см помещают в кварцевую кювету, не имеющую хемилюминесцентных свойств. Инициацию осуществляют путем добавления 5% раствора перекиси водорода в объеме 0,02 мл последовательно 3 раза в каждую кювету. Хемилюминесценцию ЦСЖ измеряют на серийном медицинском хемилюминометре CL 3604, предназначенном для исследования сверхслабых свечений биологически активных объектов в спектральной области 200 - 650 нм. В качестве детектора в установке используют 24-разрядный счетчик импульсов ФЭУ-85. Сигнал из ФЭУ считывается аналого-цифровым преобразователем, фильтруется от помех и посылается через последовательный интерфейс типа RS 232 в ПЭВМ, где средствами прилагаемого программного обеспечения строится кривая хемилюминесценции для каждой пробы. Графическую информацию подвергают математической обработке, рассчитывают максимальный показатель интенсивности хемилюминесценции (I max) и проводят сравнительный анализ. В случае сифилитического менингита (острого и подострого течения) максимум интенсивности ХЛ наблюдается в пределах от 250 имп/с и выше, при менинговаскулярном сифилисе 114≤ I max ≤ 250 имп/с. Поздние формы нейросифилиса характеризуются низким уровнем сверхслабого свечения, сопоставимого с контролем (Imax < 114 имп/с). 1 табл., 2 ил.

Способ дифференциальной диагностики ранних и поздних форм нейросифилиса путем исследования ликвора, отличающийся тем, что исследуют уровень индуцированной перекисью водорода люминесценции нативной спинномозговой жидкости, измеряют уровень максимальной интенсивности и при Imax 250 имп/с диагностируют сифилитический менингит (острый, подострый), при 114 Imax < 250 имп/с диагностируют менинговаскулярный сифилис, при Imax < 114 имп/с диагностируют поздние формы нейросифилиса (васкулярный сифилис мозга, прогрессивный паралич).