СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИБАКТЕРИАЛЬНОГО И АНТИФУНГАЛЬНОГО СРЕДСТВА ИЗ СОЛОДКИ Российский патент 1999 года по МПК A61K35/78 

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается производства антибактериальных и антифунгальных средств из растительного сырья. Известен способ получения антимикробного фитокомплекса, заключающийся в том, что измельченная трава солодки голой экстрагируется хлороформом в соотношении 1:10 - 1:12 с последующим упариванием и высушиванием извлечения. Полученный продукт обладает существенным антибактериальным действием (патент РФ N 2038090, A 61 K 35/78 от 27.06.95). Однако предложенный в указанном патенте способ при практической реализации его в фармацевтическом производстве имеет ряд недостатков:
1. Технологическая схема производства фитокомплекса сложна и длительна.

2. Технологическая схема предусматривает использование достаточно токсичного и дорогого органического растворителя - хлороформа, поэтому она, с точки зрения экологической и экономической приемлемости, несовершенна. Хлороформ, кроме того, имеет низкую температуру кипения и летуч, что вызывает большие сложности технологического характера (А. Гордон, Р. Форд Спутник химика. М. : Мир, 1976). В связи с этими свойствами хлороформа, в фитохимическом производстве он является нежелательным экстрагентом. Поэтому замена вида экстрагента, уменьшение гидромодуля экстракции, упрощение технологической схемы с сохранением антимикробной активности предлагаемого средства из травы солодки целесообразна.

Сущность изобретения в том, что трава солодки голой, содержащая 8% влаги, измельчается до степени мелкости 0,3-1,0 мм и насыпной плотности 0,63-0,71 г/см³, экстрагируется ацетоном на воронке Бюхнера непрерывным током экстрагента через слой измельченного сырья по принципу фильтрационной экстракции (В.И.Литвиненко и др., 1978, Попова Т.П., Литвиненко В.И. 1995). Общее соотношение сырья и экстрагента (гидромодуль) составляет 1:6 (в отличии от 1:10-1:12 от прототипа).

Далее извлечение упаривается в роторном испарителе до смолообразной массы и высушивается в вакуум-сушильном шкафу до порошкообразного состояния.

Выход целевого продукта сравним с прототипом и составляет 9,30-9,75%.

Полученный продукт представляет собой темный порошок с зеленоватым оттенком, со своеобразным запахом, горьковатого вкуса.

Содержит: хлорофилл, смолистый комплекс, жирные кислоты, стерины, флавоноиды.

Способ поясняется следующими примерами.

Пример 1. 100,0 г травы солодки голой, измельченной до размера 0,3 мм (проверку степени мелкости осуществляли с помощью сита, изготовленного из шелковой ткани (ГОСТ 4403-77)), экстрагировали на воронке ацетоном. Время экстракции составляло 60 минут. После чего извлечение дополнительно фильтровали также через воронку Бюхнера и упаривали под вакуумом до состояния густого экстракта. Затем досушивали целевой продукт в вакуум-сушильном шкафу и измельчали в порошок. Выход его в этом случае составил 9,75%.

Пример 2. 100,0 г травы солодки голой, измельченной до размера 0,5 мм (проверку степени мелкости осуществляли с помощью сита, из тканевой сетки с квадратными ячейками, ТУ 14-4-1063-80), на воронке экстрагировали ацетоном. Время экстракции 63 минуты. Извлечение фильтровали через воронку Бюхнера, после чего упаривали под вакуумом до состояния густого экстракта, досушивали в вакуум-сушильном шкафу и измельчали в порошок. Выход целевого продукта составил в этом случае 9,50%.

Пример 3. 100,0 г травы солодки голой, измельченной до степени мелкости 1,0 мм (проверку осуществляли с помощью сита, изготовленного из решетного полотна ГОСТ 214-83), экстрагировали на воронке ацетоном. Время экстракции 70 минут. После чего извлечение фильтровали также через воронку Бюхнера и упаривали под вакуумом до состояния густого экстракта. Затем досушивали в вакуум-сушильном шкафу и измельчали в порошок. Выход целевого продукта составил 9,3%. Полученные результаты с учетом запредельных значений параметра иллюстрируются табл. 1.

Таким образом, оптимальными параметрами следует считать пределы: степень мелкости 0,3 мм и время процесса 60 минут. (В то время, как получение продукта по прототипу длится, примерно, 3 ч).

Проверку антифунгального и антибактериального действия проводили in vitro методом диффузии в агар. Для приготовления газона культур брали 1 мл суспензии спор грибов в стерильной очищенной воде с концентрацией 1 млн/мл, определяемой с помощью камеры Горяева и 1 мл взвеси микробных клеток в стерильной очищенной воде в концентрации 1 млн/мл, определяемой по оптическому стандарту мутности ГКИ. На приготовленный газон помещали диски из фильтровальной бумаги диаметром 10 мм, на которые равномерно наносили полученный целевой продукт. В качестве сравнения использовали прототип.

О степени активности препаратов судили по величине зон задержки роста тест-культур микроорганизмов вокруг дисков после инкубирования посевов соответственно через 48 ч, при 37^oC для бактерий и через 7 суток при 28^oC для микромицетов. Зона задержки роста более 1 мм свидетельствовала о наличии антибактериального или антифунгального действия целевого продукта. Результаты испытаний приведены в табл. 2. Как видно из табл. 2, целевой продукт обладает выраженной антифунгальной активностью в отношении патогенных грибов-дермафитов, так как зоны задержки роста культур выражаются в см.

Рассматриваемый прототип - фитокомплекс травы солодки голой, получаемый с использованием экстрагента - хлороформа, обладал незначительной антифунгальной активностью в отношении указанных в табл. 2 тест-культур микроорганизмов. Антибактериальная активность прототипа по сравнению с активностью целевого продукта ниже в отношении патогенного стафилококка и спорообразующих бацилл.

Итак, на основании данных табл. 2 полученный предлагаемым способом целевой продукт обладает значительным антибактериальным, антифунгальным действием и отношении различных групп патогенных микроорганизмов. Таким образом, заявляемый способ получения целевого продукта отличается от прототипа тем, что:
1. Целевой продукт обладает большей антибактериальной активностью и более широким спектром антимикробного действия, т.к. оказывает и антифунгальный эффект.

2. Получение целевого продукта происходит более компактно и просто: уменьшены гидромодуль экстракции в 2 раза (вместо соотношения сырье - экстрагент 1:12 - используется 1:6), число технологических операций (вместо семи - четыре).

3. Проведена замена экологически несовершенного и достаточно токсичного экстрагента - хлороформа на менее токсичный и более распространенный в фармацевтическом производстве ацетон.

4. Значительно сокращено время получения целевого продукта по сравнению с прототипом.

Литература
1. Патент РФ N 2038090, A 61 K 35/78. Степанова Э.Ф., Околелова М.С., Ващенко Т.Н. Способ получения антимикробного фитокомплекса.

2. Гордон А., Форд Р. Спутник химика. - М.: "Мир", 1976. - С. 12, 440.

3. Литвиненко В.И., Литвинов В.И., Нечиноренко И.А. Разработка снособов экстракции тонкоизмельченного растительного сырья // Пути повышения эффективности производства и улучшения качества фитохимических препаратов: Тез. докл. науч.-технич. совещ. - М., 1978. - С. 17-18.

4. Попова Т.П., Литвиненко B.I. Делкi загальнi закономiрностi екстрагувания дiючих речовин з лiкарськоi рослиной сировини. // Фармац. журн. - 1995. - N 3. - С. 91-92 (Повiдомлення II); - N 4. - С. 75-77 (Повiдомлення III).

Изобретение относится к фармацевтической промышленности. Измельченную до 0,3-1,0 мм траву солодки голой экстрагируют ацетоном в течение 601-70 мин. Затем упаривают и высушивают извлечение. Изобретение позволяет упростить и удешевить процесс. 2 табл.

Способ получения антибактериального и антифунгального средства из солодки путем экстрагирования сырья, упаривания и высушивания извлечения, отличающийся тем, что измельченную до 0,3 - 1,0 мм траву солодки голой экстрагируют ацетоном в течение 60 - 70 мин.