КАРДИОТОНИЧЕСКИЙ ПРЕПАРАТ Российский патент 2001 года по МПК A61K38/33 

Изобретение относится к разделу экспериментальной медицины и может быть использовано для создания нового эффективного кардиотонического препарата.

По своей структуре это соединение пептидной природы следующего состава:
D-Ala2'N-Me-Phe4'Gly5-ol-enkephalin (DAGO)
DAGO - синтетический аналог энкефалинов, селективный агонист μ- опиатных рецепторов [7].

Использованный нами препарат был синтезирован в ТОО "БиоПро" (630090, Новосибирск, пр.Лаврентьева, 6а-301).

На сегодняшний день известно, что DAGO обладает антиноцицептивными свойствами [8] , участвует в регуляции центральной барорефлекторной чувствительности [6] , увеличивает кровяное давление [9], стимулирует высвобождение кортикостерона [5].

Нами впервые выявлено его кардиотоническое действие.

Профилактика реоксигенационных нарушений сократимости сердца с помощью традиционных инотропных препаратов (адреномиметики, ингибиторы фосфодиэстеразы, сердечные гликозиды) способствует возникновению аритмий при восстановлении коронарного кровообращения. В литературе имеются сведения о том, что введение агонистов μ- опиатных рецепторов приводит к повышению устойчивости сердца к аритмогенным воздействиям [1, 3]. Исследованиями, ранее проведенными в нашей лаборатории, было показано, что при стимуляции эндогенной опиоидной системы организма происходит увеличение устойчивости изолированного сердца к повреждающему воздействию ишемии и реперфузии [2]. Кроме того, существуют данные об отсутствии существенной роли вегетативной нервной системы в реализации эффектов опиоидных пептидов [4]. Следовательно, опиатные рецепторы, расположенные непосредственно в сердце, могут принимать участие в патогенезе ишемических и реперфузионных повреждений сердца. Поэтому интерес представляли экспериментальные исследования ишемических и реперфузионных повреждений миокарда, выполненные на изолированном перфузируемом сердце при введении синтетических аналогов энкефалинов как in vivo, так и непосредственно в раствор для перфузии сердца.

Изобретение будет понятно из следующего описания.

Эксперименты проведены на изолированных перфузируемых по методу Лангендорфа сердцах крыс линии Вистар массой 250-300 г. Сократительную функцию сердца регистрировали в изовалюмическом режиме с помощью латексного баллончика, вводимого в полость левого желудочка, соединенного с тензодатчиком. Проводили запись кривой внутрижелудочкового давления, ее первой производной и электрокардиограммы (ЭКГ) для последующего расчета параметров сократимости с помощью ПЭВМ IBM/486 с использованием оригинального пакета прикладных программ. Продолжительность периода адаптации изолированного сердца к условиям перфузии составляла 20 мин. После регистрации исходных параметров сократимости моделировали ишемические и реперфузионные повреждения изолированного сердца путем прекращения подачи физиологического раствора на 45 мин с последующей 60 мин реперфузией.

В отдельных сериях экспериментов крысам вводили агонист μ- опиатных рецепторов DAGO внутривенно за 15 мин до выделения сердца (в дозе 0,1 мг/кг) или непосредственно в физиологический раствор для перфузии (в дозе 0,001 мг/мл). Контролем служила группа интактных животных. Результаты обрабатывали статистически, используя пакет прикладных программ STATGRAPHICS 3.0.

Пример 1. Для выявления влияния DAGO на максимальное давление, развиваемое левым желудочком изолированного сердца в условиях реперфузионного повреждения, нами были проведены следующие серии экспериментов.

1) В первой серии 14 животным за 15 мин до выделения сердца внутривенно вводился исследуемый пептид в дозе 0,1 мг/кг. Сердце перфузировали по методу Лангендорфа, регистрировали исходные параметры сократительной активности и ЭКГ, моделировали 45 мин тотальную ишемию с последующей 60 мин реперфузией, последующие записи сократимости миокарда проводили через каждые 15 мин.

2) Во вторую серию также взято 14 животных. Сердца выделяли, перфузировали по методу Лангендорфа, регистрировали исходные параметры сократительной активности и ЭКГ, после чего сердца перфузировали в течение 10 мин физиологическим раствором, содержащим DAGO в концентрации 0,001 мг/мл. Затем моделировали тотальную ишемию (45 мин) с последующей реперфузией (60 мин).

3) Контрольная серия без введения препарата: тотальная ишемия (45 мин) с последующей реперфузией (60 мин). В эксперименте 28 животных.

Как показано в табл. 1, при введении DAGO происходит увеличение давления, развиваемого левым желудочком изолированного сердца как исходно, до моделирования ишемического повреждения, так и при реоксигенации. Введение DAGO in vivo оказывало значительно более сильный эффект, чем непосредственная перфузия изолированного сердца физиологическим раствором, содержащим исследуемый пептид. Таким образом, введение селективного агониста μ- опиатных рецепторов DAGO эффективно улучшает восстановление сократительной активности изолированного сердца после ишемического повреждения.

Пример 2. Помимо улучшения сократительной активности изолированного сердца под действием DAGO, происходит достоверное увеличение устойчивости миокарда к аритмогенному действию тотальной ишемии и реперфузии. Антиаритмический эффект при предварительном внутривенном введении DAGO практически полностью идентичен действию этого препарата при введении его в перфузат изолированного сердца (табл. 2).

Полученные нами результаты свидетельствуют о том, что синтетический аналог энкефалинов DAGO улучшает сократимость изолированного сердца крыс и, кроме того, оказывает антиаритмическое действие при моделировании ишемических и реперфузионных повреждений.

Литература
1. Лишманов Ю.Б., Маслов Л.Н. Опиоидные нейропептиды, стресс и адаптационная защита сердца. Томск. Изд-во Том. ун-та, 1994.

2. Лишманов Ю. Б. , Маслов Л.Н., Афанасьев С.А., Наумова А.В. Участие опиоидной системы в реализации инотропных эффектов экстракта родиолы розовой при ишемических и реперфузионных повреждениях сердца in vitro // Эксп. клин. фармакол. - 1997. - Т.60. - N 3. - С.34 - 36.

3. Лишманов Ю.Б., Маслов Л.Н., Угдыжекова Д.С. Экспериментальное изучение фармакологической активности лигандов опиатных рецепторов на модели адреналиновых аритмий. // Эксперим. Клин. Фармакол. - 1995.- 58(4). - С. 26-28.

4. Маслов Л.Н., Крылатов А.В., Лишманов Ю.Б. Антиаритмическое действие агонистов μ- опиоидных рецепторов при адреналовых аритмиях: роль вегетативной нервной системы // Бюл. эксп. биол. и мед. - 1996. - N 7. - С. 25-27.

5. Gonzalvez M.L., Milanes M.V., Vargas M.L. Effects of acute and chronic administration of mu- and deltaopioid agonists on the hypothalamic-pituitary-adrenocortical (HPA) axis in the rat. // Eur.J.Pharmacol. - 1991. - 200(1). - P. 155-158.

6. Gordon F.J. Opioids and central baroreflex control: a site of action in the nucleus tractus solitarius. // Peptides. - 1990. - 11 (2). - P. 305-309.

7. Handa B.K., Lane A.C., Lord J.A.H., Morgan B.A., Ranee M.J., Smith C. F. C. Analogues of beta-LPH 61-64 possessing selective agonist activity at mu-opiate receptors // Eur. J. Pharmacol. - 1981. - V.706. - P. 531-540.

8. Kola J. M., Randic M. mu-opioid receptor-mediated reduction of alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic acid-activated current in dorsal horn neurons. // Neurosci Lett. - 1996. - V.204. - P. 134-137.

9. Siren A.L., Feuerstein G. Hypothalamic opioid mu-receptors regulate discrete hemodynamic functions in the conscious rat. // Neuropharmacology. - 1991. - 30(2). - P. 143-152.

Изобретение относится к медицине и кардиологии. Предложен новый препарат с кардиотонической активностью. В качестве такого препарата предложен синтетический аналог энкефалинов DAGO следующего состава: D-Ala-2'N-Me-Phe 4'-6Lu-5-oL-enkephalin. Действие препарата связано со стимуляцией кардиальных μ-опиатных рецепторов. Изобретение расширяет арсенал средств указанного назначения. 2 табл.

Применение синтетического аналога энкефалинов, селективного агониста μ-опиатных рецепторов - DAGO - в качестве кардиотонического препарата.